吴柘
- 作品数:1 被引量:2H指数:1
- 供职机构:青岛大学医学院生物学系更多>>
- 发文基金:山东省博士后创新项目青岛市自然科学基金项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 噬夏孢欧文氏菌crtY基因在大肠杆菌中的表达及其产物的纯化被引量:2
- 2007年
- 噬夏孢欧文氏菌(Erwinia uredovora)可以累积类胡萝卜素,合成过程涉及的一系列反应都是在相关酶的催化下完成的,其中番茄红素环化酶由基因crtY编码,催化由番茄红素转化为β-胡萝卜素的酶促反应。本研究以噬夏孢欧文氏菌基因组DNA为模板,通过聚合酶链式反应扩增获得crtY基因,测序正确后克隆进表达载体pET-15b,构建表达质粒pET-15b-crtY,重组质粒转化E.coli BL21(DE3),构建工程菌,经IPTG诱导后,重组番茄红素环化酶在大肠杆菌中实现了高效表达,通过镍离子树脂亲和层析和Superdex 75凝胶过滤层析,得到了电泳纯的重组噬夏孢欧文氏菌番茄红素环化酶,该蛋白体外具有催化番茄红素转化为β-胡萝卜素的活性。
- 李丽吴柘郭道森汪靖超李荣贵
- 关键词:ERWINIA纯化活性