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刘超
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
中山医学院
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登革病毒非结构蛋白NS4A的克隆表达及与其相互作用蛋白质的亲和纯化
被引量:2
2013年
目的克隆表达登革病毒非结构蛋白NS4A,分离纯化与其相互作用的细胞蛋白。方法用特异性引物PCR扩增出FLAG—NS4A-HA基因片段,克隆至真核表达载体pSG5中,将重组质粒通过脂质体法瞬时转染入A549细胞,并通过Western blot检测NS4A融合蛋白的表达情况。利用串联亲和纯化系统(TAP)纯化分离与NS4A相互作用的蛋白,Western blot技术及银染SDS.PAGE验证NS4A蛋白复合物的纯化和分离情况。结果成功构建NS4A蛋白融合表达载体和FLAG、HA串联亲和纯化系统,SDS·PAGE和银染结果显示TAP系统分离得到了NS4A蛋白带和2条可能与NS4A相互作用的蛋白质片段。结论成功分离纯化与NS4A相互作用的细胞蛋白,为进一步研究机体抗登革病毒感染的机制奠定了基础。
夏君
谢炯
张佩芬
李玉叶
刘超
黄曦
张萍
关键词:
登革病毒
NS4A
串联亲和纯化
相互作用
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