刘乐
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：内蒙古农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 骨髓间充质干细胞为核供体的克隆绵羊的生产与鉴定
- 2016年
- 本研究旨在采用骨髓间充质干细胞(BMSCs)为核供体进行体细胞核移植,以获得成体干细胞克隆绵羊。选择幼体绵羊BMSCs为核供体,构建重构胚进行克隆胚胎移植,克隆绵羊诞生后,选取IASG上公布的绵羊10个微卫星标记位点,PCR扩增克隆羊、供体细胞及代孕母羊微卫星DNA,利用Quantity One软件进行基因分型,计算供体细胞与克隆羊之间的父子关系相对机会(RCP)值。结果显示,以幼体绵羊BMSCs为核供体,与去核成熟卵母细胞进行核移植,构建重构胚进行电融合,其融合率达80.62%,重构胚发育至桑椹胚阶段,经手术植入20只代孕母羊,获得克隆绵羊5只,成活3只。克隆羊基因型与供体细胞一致,供体细胞与克隆羊之间的RCP≥99.999%,证明克隆羊来自幼体绵羊BMSCs。本试验最终成功获得了首例以BMSCs为核供体的克隆绵羊。
- 郭园刘宗正刘乐孟凡华张焱如周欢敏刘春霞
- 关键词：骨髓间充质干细胞体细胞核移植克隆绵羊
- 马的骨髓间充质干细胞诱导为软骨细胞和成骨细胞及其鉴定被引量：3
- 2020年
- 本研究旨在将建立的马(Equus caballus)骨髓间充质干细胞诱导分化为成骨细胞和软骨细胞。通过原代细胞培养获取马的骨髓间充质干细胞,并对第3代(P3)纯化细胞进行干细胞特性鉴定,之后诱导其向不同细胞分化并对诱导分化的细胞进行染色和特异性基因表达的鉴定。实验结果显示,获得的马骨髓细胞表达了干细胞转录因子和间充质干细胞表面标记物,确定获得的细胞为马骨髓间充质干细胞。P3代细胞经诱导培养后由长梭形转变为“骨结节”形态的成骨细胞和“铺路石”形态的软骨细胞。茜素红将诱导的成骨细胞团染成红色,并随着时间的递增红色“骨结节”逐步增大;阿尔新蓝则将蛋白聚糖和透明质酸等含量丰富的诱导细胞染为蓝色,并且随着诱导天数的增加被染成蓝色的软骨细胞逐渐增多,而对照组细胞未见着色。实时荧光定量PCR检测发现,成骨细胞中Col和ALPL基因的表达量随诱导时间的延长发生明显变化;普通PCR结果显示,在诱导的软骨细胞中扩增获得了collagenⅡ、aggrecan和Sox9软骨特异基因,而对照组细胞不表达特异基因。综上所述,本实验建立了马骨髓间充质干细胞并成功将其诱导分化为成骨细胞和软骨细胞,为骨组织缺损修复和软骨细胞的治疗提供了实验基础。
- 房君魏奥刘乐徐鸿洋张焱如周欢敏
- 关键词：骨髓间充质干细胞诱导分化成骨细胞软骨细胞
- 马骨髓间充质干细胞向软骨细胞的诱导分化被引量：1
- 2017年
- 试验旨在建立马骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)细胞系,并诱导其向软骨细胞分化。通过获取马BMSCs,进行细胞培养和纯化,对第3代(P3)细胞进行干细胞特性鉴定,并诱导其向软骨细胞分化,对分化后的细胞染色,并检测其软骨细胞特异性基因的表达。结果显示,获得的马BMSCs表达标记基因Sox2和Nanog,并表达间充质干细胞表面标记因子CD44、CD90和CD105,不表达造血细胞表面标志物CD34和CD45。P3代细胞经诱导培养后形态发生改变,阿尔新蓝染色为阳性,并表达软骨细胞特异基因Col,且其表达量随着诱导分化时间的增加而增高。综上表明,本试验建立了马BMSC细胞系,并成功诱导其分化为软骨细胞,为软骨损伤的干细胞治疗提供了试验依据。
- 刘乐王彦妮庞玉娟张婷婷刘紫佳朱梦曹俊伟张焱如刘春霞
- 关键词：骨髓间充质干细胞诱导分化软骨细胞
- 人脐带间充质干细胞分离鉴定及向角质形成细胞的诱导分化被引量：1
- 2019年
- 该研究从人脐带华通胶中获得了人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs),通过基因鉴定和分化能力检测其纯度,建立hUCMSCs系。检测结果表明,获得的hUCMSCs表达转录因子SOX2、间充质干细胞表面标志物基因CD29、CD90和CD105,不表达造血系细胞表面标志物基因CD34、CD45及人白细胞抗原基因HLA-DR。hUCMSCs可以向神经细胞和成骨细胞分化,证明其多向分化潜能。P3代hUCMSCs向角质细胞分化后,免疫荧光染色鉴定结果为阳性,实时荧光定量PCR检测表达角蛋白CK19基因,随着诱导分化时间的增加而升高。该实验建立了hUCMSCs系和角质形成细胞的诱导分化体系,为后续研究奠定基础。
- 魏奥张东刘乐刘春霞曹俊伟孟凡华张焱如
- 关键词：人脐带间充质干细胞诱导分化角质形成细胞多向分化潜能
