s-thanatin(Ts)具有21个氨基酸,是昆虫来源抗菌肽thanatin的突变体,将thanatin的15位苏氨酸替换为丝氨酸得到抗菌活性更好和对盐离子更加耐受的Ts。通过PCR合成Ts的基因,装入pET32a载体在大肠肝菌BL21(DE3)中进行表达。可溶性表达的融合蛋白使用中空纤维超滤浓缩后经凝血酶酶切,然后通过DEAE-Sephrose Fast Flow阴离子交换树脂去除内毒素和色素,最后使用制备反相高效液相对Ts进行精制,并在体外验证了其对大肠杆菌ATCC25922和临床耐药肺炎克雷伯氏菌的活性。实验证明中空纤维超滤和阴离子交换树脂的组合为大规模表达纯化抗菌肽提供了经济有效的策略。
