马志禹
- 作品数：13 被引量：24H指数：4
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- 热应激对兔下丘脑-垂体-睾丸轴NMB及其受体基因表达和睾酮分泌的影响被引量：10
- 2019年
- 研究热应激对公兔下丘脑-垂体-睾丸(HPT)轴神经介素B(NMB)及其受体(NMBR)基因表达水平及血清皮质醇和睾酮分泌的影响,探讨热应激对神经肽和相关激素分泌的影响。建立热应激模型,采用荧光定量PCR(RT-PCR)检测兔NMB和NMBRmRNA在HPT轴的表达情况,采用放射免疫分析法(RIA)检测兔血清中皮质醇和睾酮浓度的变化规律。结果表明,兔NMB和NMBR基因在HPT轴中表达;NMB和NMBRmRNA在HPT轴的表达模式相似,且热应激后在一定程度上可以促进NMB和NMBR基因的表达,并按时序在下丘脑(热应激0.5h)、垂体(热应激1.0h)和睾丸(热应激2.0h)促进作用最为明显;热应激可以促进皮质醇的分泌,并抑制睾酮的分泌,但这种抑制作用随着热应激时间的增加(热应激2.0h)逐渐恢复正常。表明热应激可能通过NMB/NMBR系统调节HPT轴的功能,进而影响动物繁殖。
- 马志禹马志禹张莹杨盛杨盛胡佳慧张金龙张金龙
- 关键词：热应激睾酮
- 神经介素U在体外对猪树突细胞活性及功能的影响被引量：1
- 2017年
- [目的]本文旨在探讨不同浓度神经介素U(NMU)对外周血单核源树突细胞(DC)刺激T淋巴细胞增殖和相关细胞因子分泌的影响。[方法]采集小梅山猪外周血,用集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4联合诱导外周血单核细胞形成未成熟树突细胞,再加入脂多糖(LPS)刺激获得成熟的树突细胞,同时观察DC形态。加入不同浓度(0.01、0.1、1、10、100、1 000 nmol·L^(-1))NMU并分别培养2、4、8和12 h后,收集细胞上清液,用ELISA法测定IL-4、IL-5和IL^(-1)3的浓度。加入不同浓度(0.1、1、10、100、1 000 nmol·L^(-1))NMU培养24 h后,收集细胞,用CCK-8试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒分别检测DC刺激混合淋巴细胞时细胞的增殖和DC凋亡率。[结果]NMU(0.1~100 nmol·L^(-1))能够抑制未成熟树突细胞(i DC)的细胞凋亡(P<0.01),且NMU与NMU+LPS作用效果相一致,10 nmol·L^(-1)NMU组与10 nmol·L^(-1)NMU+LPS组都能降低i DC凋亡,凋亡率分别为2.383%和2.360%,与LPS组相比,NMU+LPS组抑制i DC细胞凋亡效果极显著(P<0.01),说明NMU与LPS协同发挥抑制i DC细胞凋亡作用;与对照组相比,0.1~100 nmol·L^(-1)NMU能极显著促进m DC分泌IL-5(P<0.01)和抑制IL-4分泌(P<0.01)。NMU对IL^(-1)3的影响呈现多样性,低剂量(0.01~0.1 nmol·L^(-1))NMU在2、4 h抑制m DC细胞分泌IL^(-1)3(P<0.05),中剂量(1~10 nmol·L^(-1))NMU在2 h先抑制m DC分泌IL^(-1)3(P<0.05),4 h后又促进其分泌(P<0.05),高剂量(100~1 000 nmol·L^(-1))NMU则促进m DC分泌IL^(-1)3(P<0.05)。经NMU诱导后,i DC和m DC均能促进T淋巴细胞增殖(P<0.01)。[结论]在一定浓度范围内,NMU能够抑制猪树突细胞的凋亡,并提高其细胞活性和促进树突细胞刺激淋巴细胞增殖的功能,并能影响树突细胞细胞因子分泌,提示神经介素U参与了对猪免疫功能的调节。
- 乔文娜王培永李翔马志禹苏娟雷治海
- 关键词：树突细胞细胞因子细胞增殖
- Kisspeptin-10对热应激引起大鼠心肌损伤的影响
- 2017年
- 试验旨在探究kisspeptin-10对热应激造成的大鼠心肌损伤的影响及其分子机制。将24只SD雄性大鼠随机分为3组(对照组、热应激组和热应激后kisspeptin-10皮下注射组),每组8只。诱导发生热应激后采用透射电镜、HE染色和masson染色来观察心脏组织病理变化情况;并采用RT-PCR技术检测与心肌损伤通路相关基因ITGA4、ITGB8、BNP、MYL7、HIF-1α和ITGB7的mRNA在心肌中的变化;用Western-Blot验证其关键蛋白ITGB8和BNP表达的变化。与对照组相比,热应激组(H)出现心肌损伤现象;热应激后kisspeptin-10皮下注射组(KH)与热应激组(H)相比,心肌纤维排列较整齐,细胞核染色较均匀,纤维增生减少,线粒体空泡和线粒体嵴断裂现象明显减少;另外,心脏组织中ITGB8和BNP在热应激组(H)发生上调,而热应激后kisspeptin-10皮下注射组(KH)与热应激组(H)相比显著下调。本研究从形态学和分子机制方面探究kisspeptin-10缓解SD大鼠由热应激所致心肌损伤的途径。一方面ITGB8作为心肌细胞膜的异二聚体在热应激后表达发生变化,另一方面热应激后心肌组织形态学上的改变。这些由热应激引起紊乱的在kisspeptin-10干预后有趋于正常表现,为进一步研究kisspeptin-10在热应激导致心肌损伤中的缓解作用机制提供了理论基础。
- 张莹马志禹索川侯园龙张征贾翠翠李翔雷治海苏娟
- 关键词：SD大鼠热应激BNP心肌损伤
- 兔神经介素U及其受体的基因克隆和组织表达的研究被引量：2
- 2017年
- 神经介素U(NMU)是从猪脊髓分离得到的一种神经肽,主要为NMU-25和NMU-8。NMU通过与其2个G蛋白偶联受体(NMU-R1和NMU-R2)结合而发挥作用。本文用RT-PCR方法克隆了兔NMU及其受体基因片段,分析了其结构特点,研究其在兔体内的表达分布。克隆了兔NMU、NMU-R1和NMU-R2基因片段,其大小分别为443,366和203 bp,并将基因序列提交到Gen Bank数据库(Gen Bank ID:kp276160.1,km-236787.1和km-236788.1),表明克隆的兔NMU基因片段核苷酸序列与其他物种如大鼠、猪、牛和人相比有较高的同源性(78%~83%),NMU-R1基因核苷酸序列同源性为80%~87%,NMU-R2基因核苷酸序列同源性为82%~89%。兔NMU-R1和NMU-R2具有G蛋白偶联受体的跨膜结构。NMU、NMU-R1和NMU-R2基因分别定位于第2号、3号和1号染色体上。此外,NMU、NMU-R1和NMU-R2 mRNA在兔体内广泛表达。试验结果为深入研究NMU及其受体的生理功能奠定了基础。
- Ejlal Ahmed Mohammed Adam马志禹李翔李晓亮雷治海
- 关键词：基因克隆基因表达
- 神经肽W对猪睾丸间质细胞增殖和睾酮分泌的影响被引量：2
- 2017年
- 为了明确神经肽W(NPW)对猪睾丸间质细胞功能的影响,本试验采用RT-PCR和免疫荧光(IFA)技术研究了NPW受体NPBWR1(GPR7)、NPBWR2(GPR8)基因和蛋白在睾丸间质细胞的表达与分布,用MTT法和放射免疫分析(RIA)技术研究了不同浓度的NPW(NPW-30)对睾丸间质细胞增殖和睾酮分泌的影响。结果表明,NPBWR1和NPBWR2 mRNA在猪睾丸间质细胞中表达,NPBWR1在睾丸间质细胞上分布;10-6和10-8mol/L NPW处理睾丸间质细胞24 h可分别极限著或显著促进睾酮的分泌(P<0.01,P<0.05),10-10mol/L NPW可极显著促进睾丸间质细胞的增殖P<0.01)。研究结果提示,NPW可促进猪睾丸间质细胞的增殖和睾酮的分泌,进而参与生殖的调控。
- 杨盛马志禹乔文娜索川苏娟雷治海
- 关键词：睾丸间质细胞睾酮
- miR-15a对猪卵泡颗粒细胞BDNF基因表达的影响被引量：1
- 2018年
- 为探索miR-15a对猪卵泡发育的影响,选取健康大卵泡、中等卵泡和闭锁卵泡,研究不同卵泡中miR-15a的相对表达量以及其是否对卵巢颗粒细胞中有BDNF表达具有调节作用。分别抽取直径3-5 mm、大于5 mm健康卵泡和3-5 mm闭锁猪卵泡,采用q PCR检测发现闭锁卵泡中miR-15a表达显著升高。免疫组化结果显示中等健康卵泡颗粒细胞上BDNF、Tr KB均有表达,而在靠近卵泡腔的凋亡颗粒细胞BDNF免疫阳性反应较弱。分离培养猪卵巢颗粒细胞,过表达miR-15a能显著上调BDNF基因表达水平,Bcl-2基因表达有下降趋势但差异不显著;抑制miR-15a表达能显著抑制BDNF、bcl-2基因表达水平。Western-Blot结果发现,过表达miR-15a显著下调BDNF蛋白水平,而抑制miR-15a表达则能显著上调BDNF蛋白水平。实验结果显示miR-15a可能经由其靶基因BDNF参与猪卵泡的发育和闭锁。
- 王文绍程玲赵肖李冬冬索川马志禹李俊安娜雷治海苏娟
- 关键词：转染BDNF
- 基于GC/TOF-MS技术研究猪健康大卵泡和中等卵泡液的代谢变化
- 2018年
- 为研究国内猪卵巢卵泡液的代谢组分轮廓特征以及由中等卵泡发育为大卵泡过程中的代谢成分变化,运用气相色谱-飞行时间质谱联用技术（GC/TOF-MS）对采自屠宰场三元杂交母猪卵巢中的11份大卵泡液（直径5-8 mm）和12份中等卵泡液（直径3-5 mm）进行代谢物检测,并采用主成分分析（PCA）及偏最小二乘判别法（PLS-DA）分析方法对数据进行多元统计分析。结果显示：猪大卵泡与中等卵泡液的代谢谱明显不同,共有33种差异代谢物与卵泡大小密切相关;与中等卵泡液相比,大卵泡液中α-酮戊二酸、葡萄糖1-磷酸、脯氨酸的浓度极显著升高（P〈0.01）,葡萄糖浓度显著升高（P〈0.05）,其他如氨基酸、脂肪酸在内的绝大多数代谢物浓度均显著性降低（P〈0.05）;代谢物通路富集分析显示差异代谢物主要与三羧酸循环、糖代谢、氨基酸代谢和核苷酸代谢等代谢通路相关。结果表明：应用GC/TOF-MS技术可有效筛选出猪不同大小卵泡之间的卵泡液差异代谢物,这些差异代谢物提示卵泡发育过程涉及很多代谢通路的变化,这为今后利用人工干预手段对卵泡发育进行调控提供参考依据,同时为猪卵母细胞发育潜能和早期胚胎发育研究提供一个新思路。
- 程玲王文绍索川马志禹李俊安娜雷治海苏娟
- 关键词：卵泡发育代谢通路
- 神经介素B研究进展被引量：6
- 2013年
- 神经介素B(neuromedine B,NMB)是1983年从猪脊髓提纯分离的一种神经肽,含10个氨基酸,大分子肽含32个氨基酸,属于蛙肽家族,为铃蟾肽相关肽。NMB通过其受体发挥生物学作用,铃蟾肽受体家族有3～4种(BB1、BB2、BRS-3、BB4或BRS-3.5),NMB优先受体是BB1(NBM-R),与其他受体的亲和力较低。NMB及其受体在中枢神经系统和外周组织广泛分布,具有多种生物学作用,包括刺激平滑肌收缩,改变胃肠道的运动性,抑制垂体促甲状腺素的释放;参与摄食和体温调节,介导应激和恐惧反应,影响行为和记忆,促进肿瘤生长等。
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- 神经介素U对猪免疫的调节作用
- 神经介素U(NMU)是上世纪80年代发现的哺乳动物一种保守的神经肽,有NMU-25和NMU-8两种肽。NMU在动物体内的广泛分布提示NMU参与多种生理功能的调节,包括免疫调控。然而,关于NMU对猪免疫调节的作用鲜见报导。...
- 李翔李晓亮乔文娜马志禹苏娟雷治海
- 关键词：NK细胞树突状细胞脾淋巴细胞肺泡巨噬细胞免疫调节
- 文献传递
- 神经介素U在体外调控猪单核源树突细胞免疫功能的研究
- 本试验以体外分离培养的两月龄仔猪的单核源树突状细胞(Monocyte derived dendritic cells,Mo-DCs)为研究对象,通过体外试验验证神经介素U(NMU)及受体(NMUR)与仔猪树突状细胞的相互...
- 乔文娜李晓亮李翔马志禹杨盛施玉萍雷治海
- 关键词：树突细胞细胞因子免疫调节
- 文献传递
