王大勇
- 作品数：5 被引量：54H指数：3
- 供职机构：南京军区联勤部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 促性腺激素释放激素类似物对大鼠睾丸间质细胞膜联蛋白5和3β-羟类固醇脱氢酶mRNA表达的影响被引量：15
- 2008年
- 目的:观察促性腺激素释放激素(GnRH)类似物对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD mRNA表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,分别用不同终浓度的GnRH激动剂(GnRH-agonist,GnRHa)(10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L)和GnRH拮抗剂(GnRH-antagonists,GnRHant)(10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L)处理细胞,提取细胞总RNA,反转录,设计特异性引物和Tagman探针,荧光定量PCR检测膜联蛋白5(annexin 5)和3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)mRNA表达的改变。结果:荧光定量PCR结果显示,与未加GnRH类似物的对照组相比,当GnRHa的终浓度为10-5mol/L、10-6mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞annexin 5 mRNA分别升高了38.89%和35.29%,均具有统计学意义(P<0.05);当GnRHa的浓度为10-5mol/L时,3β-HSD mRNA也显著升高了46.43%(P<0.01)。同样,与对照组相比,当GnRHant的浓度为10-6mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞annexin 5 mRNA下降了45.45%(p<0.05),当GnRHant的浓度为10-6mol/L,10-7mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA也分别显著地降低了63.64%(P<0.01)和50%(P<0.05),其余各组与对照组相比,差异无统计学意义。结论:GnRH类似物能够调控大鼠睾丸间质细胞annexin5和3β-HSD mRNA表达,GnRH类似物可能与睾丸间质细胞上GnRH受体结合后,通过特定的生理机制,进而影响annexin5和3β-HSDmRNA表达,为揭示GnRH类似物调控间质细胞分泌睾酮的作用机制提供了一定的依据,其内在的机制还有待进一步研究。
- 戈一峰王大勇蒋超张艳梅韩雪峰卢坤刚崔英霞黄宇烽黄祝姚兵
- 关键词：GNRH类似物荧光定量PCR大鼠睾丸间质细胞
- 膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响被引量：14
- 2010年
- 目的先前研究发现促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)刺激Leydig细胞后,膜联蛋白5(annexin 5)及睾酮水平同时增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在的联系,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)是间质细胞的标记酶。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-HSD表达的影响。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,用不同浓度的annexin 5(0、10-10、10-9、10-8mol/L)处理间质细胞24h和用10-9mol/L的annexin 5处理细胞不同时间(6、12、24、36h),收集培养液,用化学发光法测定培养液中的睾酮含量;Western blotting方法分析睾丸间质细胞中3β-HSD的表达变化。结果不同浓度的annexin 5处理间质细胞24h后,与对照组比较,终浓度为10-10mol/L和10-9mol/L时,睾酮水平分别升高了18%[(14.38±0.30)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01)和26%[(15.25±0.47)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01);浓度为10-8mol/L时,睾酮水平虽也有升高趋势,但无显著性差异;而Western blotting结果显示,浓度为10-9mol/L时,3β-HSD表达量升高了63%(2.19±1.00vs1.34±0.19,P<0.05),浓度为10-10mol/L和10-8mol/L时,3β-HSD表达量无显著性差异;睾酮分泌与3β-HSD的表达呈显著正相关(r=0.430,P<0.05)。10-9mol/L的an-nexin5处理细胞不同时间,与对照组相比,6h和12h后睾酮的分泌虽有升高,但无统计学意义(P>0.05);24h后睾酮的分泌量显著升高了18%[(12.59±0.41)nmol/Lvs(10.70±0.09)nmol/L](P<0.01);而处理36h后,睾酮分泌量下降了21%[(14.44±1.65)nmol/Lvs(17.46±0.31)nmol/L](P<0.01)。结论在大鼠睾丸间质细胞中,annexin 5对睾酮分泌具有调节功能且呈剂量和时间依赖性;3β-HSD是该调节过程中的关键酶之一。
- 陶晓倩王大勇柳海燕林钗英韩雪峰时姗姗崔英霞戈一峰姚兵
- 关键词：间质细胞睾酮
- 辅助生殖技术中伦理问题的探讨被引量：25
- 2009年
- 辅助生殖技术(ART)的发展和广泛应用,解决了无数不孕不育家庭的困难,但同时也引发了一系列社会伦理问题,本文主要探讨如何正确认识及处理ART过程中遇到的伦理学困境。
- 杨国斌王大勇张艳梅崔英霞姚兵
- 关键词：辅助生殖伦理配子胚胎
- 光照应激对SD大鼠睾丸中Annexin 5表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察光照应激状态下SD大鼠睾丸组织中annexin5的表达变化。方法建立SD大鼠光照应激模型,24h持续光照,分为光照应激短期(2、3、4、7d)和光照应激长期(14、21、28d),分别取应激状态和相应对照组的大鼠睾丸组织,采用免疫组织化学和Western blotting技术分析annexin5免疫定位和蛋白相对表达。结果Western blotting结果显示:短期光照应激组(2、3、4、7d)的实验组大鼠睾丸annexin5表达与对照组相比无明显变化;在持续光照14d和21d后,实验组大鼠睾丸annexin5的相对表达量与对照组相比分别从3.09提高到4.16,从4.20提高到5.28(P<0.01,P<0.05);而持续光照28d后,实验组大鼠睾丸annexin5的相对表达量(4.87)与对照组(4.13)比较无明显差异(P>0.05)。免疫组织化学显示,annexin5在大鼠睾丸中的分布未见明显改变,但光照应激长期实验组(14、21、28d)annexin5免疫组化显色较深,说明annexin5表达升高,这与Westernblotting的结果基本一致。结论长期光照应激使大鼠睾丸annexin5的表达量明显增加。annexin5参与了应激过程,并可能参与了睾丸中某些重要生理功能的调节。
- 时姗姗王大勇柳海燕陶晓倩韩雪峰卢坤刚张艳梅戈一峰崔英霞姚兵
- 关键词：应激ANNEXIN
- GnRH类似物对大鼠睾丸间质细胞MAPK的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:研究大鼠睾丸间质细胞中GnRH激动剂(GnRHa)和拮抗剂(GnRHant)对促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞24h后,血清饥饿2h。GnRHa(10-7mol/L)或Gn-RHant(10-6mol/L)处理大鼠睾丸间质细胞不同时间(0、5、15、30、60、90min)后,Western印迹检测磷酸化ERK(p-ERK)和磷酸化p38(p-p38)蛋白水平以0min组为对照。此外,不同终浓度(1、5、10、20μmol/L)的PKC抑制剂GF109203X和GnRHa或GnRHant共同作用后,Western印迹检测p-ERK蛋白水平。结果:GnRHa或GnRHant刺激间质细胞不同时间后,p-p38蛋白水平与对照组比较均无显著性差异(P>0.05);加入不同终浓度的PKC抑制剂GF109203X处理细胞20min后,再用GnRHa刺激细胞10min,发现GF109203X在终浓度为10μmol/L和20μmol/L时p-ERK水平显著下降(P<0.05)。GnRHant刺激间质细胞后,p-ERK水平在15min时升高了约65%(P<0.05);30min时升高了约81%,达到最高水平(P<0.05);60min时开始下降,90min时恢复到基础水平。不同浓度GF109203X处理细胞20min后,再用GnRHant刺激细胞30min,p-ERK水平与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:GnRHa可能通过PKC途径来诱导ERKMAPK信号通路的活化,而GnRHant对ERKMAPK信号通路的激活作用并非通过PKC途径来实现的;p38可能不参与间质细胞中GnRH类似物作用的MAPK分子信号通路。
- 柳海燕王大勇时姗姗陶晓倩韩雪峰林钗英姚兵
- 关键词：促性腺激素释放激素MAPKP38MAPK间质细胞
