曹秀丽
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 小鼠紧密连接蛋白ZO-2真核表达载体的构建和表达
- 2012年
- 目的:克隆小鼠紧密连接蛋白ZO-2(zonula occludens protein2)基因构建其真核表达载体,并验证其在293T细胞系中的表达,为进一步研究其功能奠定基础。方法:从小鼠淋巴结来源的cDNA中分三段分别扩增,通过基因克隆方法获得紧密连接蛋白ZO-2基因全长,连接至pMD-18T载体中,酶切测序正确后,插入pEGFP-C2载体中,构建真核表达载体pEGFP-C2-ZO2。酶切正确后,瞬时转染入293T细胞中,48h后荧光显微镜观察其绿色荧光GFP融合蛋白的表达,并用Western blot检测其在转染细胞中的蛋白水平表达。结果:通过酶切鉴定和测序结果证明成功克隆了ZO-2基因,western blot结果表明成功构建了真核表达载体pEGFP-C2-ZO2。结论:小鼠紧密连接蛋白ZO-2基因的获得和真核表达载体pEGFP-C2-ZO2的成功构建为下一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 朱冰柯秦鸿雁付伟梁世倩曹秀丽韩骅梁英民
- 关键词：293T细胞真核表达
- 小鼠EVL基因的克隆和真核表达载体的构建
- 2012年
- 目的:构建小鼠EVL(Ena/VASP like)基因的真核表达载体,为深入研究EVL的功能奠定基础。方法:采用PCR方法,从小鼠cDNA文库中,扩增出1245bp的EVL编码区片段,经电泳、胶回收后连接入pMD-18T载体中,测序鉴定正确。用BamH I和HincII双酶切,定向克隆EVL编码区片段到真核表达载体pcDNA3.1中,用限制性内切酶酶切鉴定重组质粒正确后。将重组质粒转染入HELA细胞中,以RT-PCR检测EVL的mRNA的表达,以Western Blot检测EVL蛋白的表达。结果:酶切鉴定结果显示小鼠EVL编码区基因被成功克隆入真核表达载体pcDNA3.1中;RT-PCR和Western Blot结果以及免疫荧光染色显示Hela细胞中有EVL的mRNA和蛋白的表达。结论:成功获得pcDNA3.1-EVL的真核表达载体,为进一步深入研究EVL蛋白的功能奠定了基础。
- 邹海韩骅高方曹秀丽徐骁
- 关键词：基因克隆真核表达
- PBL教学法在医学遗传学课程中的应用被引量：5
- 2013年
- 医学遗传学一门基础学科和临床学科的桥梁学科,课程中存在大量的可供讨论的病例。在医学遗传学教学中尝试应用PBL教学法,能有效激发学生学习的积极性,培养学生的自学能力和综合素质,从而提高了教学质量。
- 张萍曹秀丽刘向东魏亚宁冯蕾秦鸿雁韩骅
- 关键词：医学遗传学PBL教学教学方法
