张存娟
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：陕西省科学技术研究发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂联素改善间歇性低氧性肺动脉高压大鼠离体肺动脉舒张功能及其机制被引量：4
- 2016年
- 目的研究重组人球状脂联素(g Ad)对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠离体肺动脉舒张功能的影响并研究其作用机制。方法将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、HPH 2周组(HPH2W)、HPH 4周组(HPH4W),每组8只。正常对照组动物在正常环境中饲养,低氧组大鼠以间歇性低压低氧法建立HPH模型。低氧组模型建立后,以右心导管法测定平均肺动脉压(m PAP)、平均右心室压(mRVP),称重测量右心室/左心室+室间隔(RV/LV+S)、右心室/体质量(RV/BW);ELISA检测试剂盒检测血清g Ad及NO浓度。右肺下叶肺组织经HE染色后观察肺小动脉血管显微结构的改变。取大鼠左、右肺动脉干制备血管环,行离体灌流实验,观察不同浓度的乙酰胆碱及硝普钠诱导的血管舒张作用。取HPH4W组动物肺外肺动脉干,分组进行孵育(HPH4W组:Krebs液孵育;HPH4W+g Ad组:g Ad 2μg/ml孵育;HPH4W+g Ad+L-NAME组:g Ad 2μg/ml+L-NAME 0.5 mmol/L孵育),孵育后观察不同浓度的乙酰胆碱及硝普钠诱导的血管舒张作用,然后收集作用于血管环的灌流液,检测NO产物。取HPH4W组大鼠肺动脉血管按上述分组进行孵育,然后行Western blot检测AMPK、Akt、e NOS等信号蛋白分子的表达及磷酸化水平。结果与正常对照组相比,HPH组大鼠的m PAP、mRVP、RV/LV+S、RV/BW均显著增高(P<0.05);血清g Ad、NO水平下降(P<0.05);光镜下肺动脉平滑肌及弹力纤维层增生,管壁增厚,管腔狭窄。与正常对照组比较,HPH组大鼠肺动脉对乙酰胆碱诱导的血管舒张作用明显减弱(P<0.05),正常对照组最大舒张率69.94%,HPH2W组最大舒张率48.79%,HPH4W组最大舒张率仅42.09%。经g Ad体外孵育后,血管环内皮依赖的舒张作用明显增强,HPH4W组最大舒张率可达到46.35%,加入L-NAME组的血管环舒张作用被显著阻断。各组大鼠对硝普钠诱导的血管舒张均有良好反应,无统计学意义。经g Ad孵育后的血管环组织AMPK、Akt、e NOS磷酸化水平、灌流液NO
- 张存娟杨瑞邢文娟梁向艳苏慧张海锋孙新
- 关键词：低氧性肺动脉高压脂联素内皮功能障碍
- 脂联素改善低氧诱导的大鼠肺微血管内皮细胞功能障碍及机制研究被引量：4
- 2017年
- 目的研究重组人球状脂联素(APN)改善低氧诱导的大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)功能障碍,探讨其潜在的分子机制。方法取SD雄性大鼠PMVECs原代培养,传至第三代行细胞鉴定;PMVECs分3组,常氧(210ml/L O_2,37℃)组;低氧(20 ml/L O_2,37℃)组;低氧(20 ml/L O_2,37℃)+APN(1μg/ml)处理组,分别培养3 h、6 h、9 h和12 h,收集细胞上清测NO浓度;3组PMVEC行RT-PCR测定eNOS基因表达;BCA法测定各组总蛋白含量;行Western blot检测AMPK/p-AMPK、PI3K/p-PI3K、Akt/p-Akt和eNOS/p-eNOS表达。结果 (1)鉴定培养细胞为PMVECs;(2)在相应时间点,与正常组比较,低氧诱导的NO浓度、eNOS mRNA表达水平、总蛋白表达显著下降(P<0.01);与低氧组对比,低氧+APN组显著增加了低氧诱导的NO浓度、eNOS mRNA表达水平、总蛋白表达(P<0.01);(3)3组AMPK、PI3K、Akt和eNOS总蛋白表达水平不变;与正常组比较,低氧诱导的AMPK、PI3K、Akt、eNOS磷酸化表达水平下降(P<0.05);与低氧组对比,低氧+APN组增加了低氧诱导的AMPK、PI3K、Akt、eNOS磷酸化表达水平(P<0.05)。结论在细胞水平上,APN能改善低氧条件下诱导的PMVECs功能障碍,促进肺血管具有舒张作用的NO产生,其可能机制可能是伴随着AMPK/PI3K/Akt/eNOS/NO信号通路的激活,APN可能成为潜在治疗低氧性肺动脉高压的辅助药物。
- 徐海军张存娟张存娟张娟吴海霞苏慧张海峰
- 关键词：肺动脉内皮细胞脂联素内皮细胞功能障碍
- 脂联素对低氧性肺动脉高压的血管舒张作用及其机制
- 张存娟
- 脂肪因子CTRP9对低氧性肺动脉高压大鼠肺血管的舒张作用及其机制被引量：9
- 2016年
- 目的观察脂肪因子C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)对于低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠离体肺动脉的舒张作用,并探讨其可能的分子机制。方法将24只雄性SD大鼠随机分为对照组、HPH 2周组和HPH 4周组,每组8只。对照组动物在正常环境中饲养,低氧组动物按低压低氧法建立HPH模型。模型建立后,用右心导管法测定肺动脉平均压(m PAP)、右心室平均压(mRVP),称质量测量右心室/(左心室+室间隔)〔RV/(LV+S)〕、右心室/体质量(RV/BW);ELISA法检测血清NO和CTRP9水平;HE染色高倍镜下观察肺小动脉显微结构改变。取大鼠左、右肺动脉干制备血管环,行离体灌流实验,观察不同浓度CTRP9的舒张血管作用;收集作用于血管环的灌流液,检测NO产物。收集剩余的肺动脉血管组织,分组后用不同浓度CTRP9孵育,部分组别孵育前加入Compound C或L-NAME,然后行Western blot检测p AMPK/AMPK、p Akt/Akt、pe NOS/e NOS等信号蛋白分子。结果与对照组比,HPH组大鼠的m PAP、mRVP、RV/(LV+S)、RV/BW均显著增高(P<0.01),且血清NO、CTRP9水平下降(P<0.05,P<0.01)。病理切片显示HPH组大鼠肺动脉平滑肌和弹力纤维层增生,血管壁增厚,管腔狭窄、变形。选取对乙酰胆碱和硝普钠有良好舒张反应的血管环,加入CTRP9后血管环明显舒张,预先加入Compound C或L-NAME组,CTRP9舒血管作用被显著抑制;血管环组织AMPK、Akt和e NOS磷酸化水平、灌流液NO产物增加(P<0.05,P<0.01)。结论 HPH时血管内皮功能受损,CTRP9有明显的舒张血管作用,其机制可能与增加AMPK/Akt/e NOS磷酸化和NO释放有关。
- 杨瑞张存娟邢文娟梁向艳苏慧张海锋孙新
- 关键词：低氧性肺动脉高压内皮功能障碍
- 脂联素对低氧条件下大鼠肺微动脉内皮细胞NO生成的促进作用及其机制被引量：3
- 2017年
- 目的重组人球状脂联素(APN)促进低氧条件下大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)NO的生成,探讨其潜在的分子机制研究。方法原代培养SD大鼠PMVECs,传至第3代经免疫组化法鉴定细胞传至第3代鉴定细胞;PMVECs分4组,常氧组(210 ml/L O_2,37℃);低氧组(20 ml/L O_2);低氧+APN组(20 ml/L O_2+APN 1μg/ml),低氧+APN+L-NAME组(20 ml/L O_2,+APN 1μg/ml+L-NAME 1μg/ml)处理,各组细胞同时处理(加药)后,培养12 h收集上清,硝酸还原法测NO浓度,RTPCR测定eNOS mRNA的基因表达Western blot检测AMPK/p-AMPK、PI3K/p-PI3K、Akt/p-Akt、eNOS/p-eNOS蛋白表达。结果鉴定细胞为PMVECs。与常氧组比较,低氧组NO浓度、eNOS mRNA表达水平显著下降(P<0.01);与低氧组比较,低氧+APN组低氧诱导的NO浓度、eNOS mRNA表达水平显著增加(P<0.01);L-NAME可阻断NO的产生和eNOS mRNA的表达。各组AMPK、PI3K、Akt、eNOS总蛋白表达量无差异;与常氧组比较,低氧组中AMPK、PI3K、Akt、eNOS磷酸化表达水平下降(P<0.05);与低氧组比较,低氧+APN组AMPK、PI3K、Akt、eNOS磷酸化表达水平增加(P<0.05);与低氧+APN组比较,低氧+APN+L-NAME组AMPK、PI3K、Akt磷酸化表达水平没有变化(P>0.05);L-NAME可阻断eNOS磷酸化的表达(P<0.01)。结论低氧条件下APN可促进PMVECs生成NO,其可能机制是AMPK/PI3K/Akt/eNOS/NO信号通路的激活。
- 徐海军张存娟周宁娟苏慧孙新
- 关键词：脂联素信号通路一氧化氮
- 脂联素改善低氧诱导的肺微血管内皮细胞功能障碍的作用及机制研究
- 徐海军张存娟张娟吴海霞苏慧张海峰孙新
