刘佩
- 作品数：15 被引量：28H指数：4
- 供职机构：河南科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家肉羊产业技术体系建设项目河南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鹌鹑性别的分子鉴定方法研究被引量：5
- 2020年
- 为快速、准确鉴定出鹌鹑胚胎或组织样品的性别,研究以CHD1基因为候选基因,设计并合成了用于朝鲜鹌鹑性别鉴定的引物,建立了两种鉴定鹌鹑性别的分子生物学方法。第一种鉴定方法是对提取的鹌鹑基因组DNA进行PCR扩增,将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,出现单一条带的个体为雄性鹌鹑;出现两条清晰条带的个体为雌性鹌鹑。第二种方法是利用荧光定量PCR进行扩增,接着进行熔解曲线分析,出现单个峰的为雄性鹌鹑;出现两个峰的为雌性鹌鹑。结果表明:这两种方法均能有效地进行鹌鹑性别的分子鉴定,其中第一种方法的结果直观可靠,可应用于鹌鹑的育种工作中;第二种方法操作简便,需要的时间短,适合实验室中大量组织样品(个体)性别的分子鉴定。
- 张小辉庞有志雷莹赵淑娟赵淑娟郭灿甫祁艳霞刘佩
- 关键词：鹌鹑性别鉴定
- 牛肌肉组织中胶原和ADAMTS2基因表达与肉质的相关性分析被引量：5
- 2014年
- 肌内脂肪含量和嫩度是肉质性状的重要指标,也是影响牛肉经济价值的主要因素。肌肉组织中胶原蛋白的含量和结构对嫩度有直接的影响,而ADAMTS2是原胶原转变为胶原过程中的剪切酶。本研究利用qRTPCR技术分析了南阳牛肌肉发育过程中编码胶原的COL1A1,COL2A1,COL3A1和ADAMTS2基因的表达变化规律,发现这些基因在3月龄和24月龄时具有较高的表达量,在12月龄时表达量最低,编码胶原的COL1A1,COL2A1,COL3A1与ADAMTS2基因具有相似的表达变化规律。采集了24头2岁左右的南阳牛背最长肌组织,分别测定了肌内脂肪含量和剪切力值,其中肌内脂肪含量的平均值为(1.88±0.64)%,剪切力的平均值为4.94±1.12,同时利用qRT-PCR技术分析了这24头南阳牛背最长肌组织中COL1A1,COL2A1,COL3A1和ADAMTS2基因的表达情况,发现ADAMTS2基因的表达量与肌内脂肪含量之间存在显著的正相关关系(P<0.05);COL3A1基因的表达量与剪切力之间存在显著的正相关关系(P<0.05)。本研究表明,ADAMTS2基因可能通过对胶原蛋白生物合成的调控间接影响肌内脂肪含量和嫩度。
- 祁艳霞张小辉王玉琴王丹丹郭钊刘佩
- 关键词：肌肉发育基因表达肉质
- 鹌鹑MITF基因的克隆、表达及启动子甲基化研究
- 2022年
- 【目的】研究MITF基因在鹌鹑胚胎发育过程中的表达变化及其与羽色形成的关系,分析启动子甲基化对MITF基因表达的影响。【方法】利用RT-PCR克隆鹌鹑MITF基因mRNA的CDS区域并进行DNA测序,对得到的序列进行BLAST比对等生物信息学分析。利用RT-qPCR分析MITF基因在栗羽朝鲜鹌鹑和北京白羽鹌鹑胚胎发育第6、8、10、12和14天的表达变化。克隆朝鲜鹌鹑和北京白羽鹌鹑MITF基因的启动子区域并进行DNA测序,利用BS-PCR分析启动子CpG岛的甲基化水平。【结果】鹌鹑MITF基因与日本鹌鹑同源基因相似度达99%,包含1476 bp的开放阅读框,编码蛋白由492个氨基酸残基组成,没有信号肽和明显的跨膜区,成熟蛋白位于细胞核中。在胚胎发育的6~12 d,朝鲜鹌鹑MITF基因m RNA表达水平显著或极显著高于北京白羽鹌鹑(P<0.05或P<0.01)。鹌鹑MITF基因启动子区域包含丰富的顺式作用元件和1个346 bp的CpG岛,朝鲜鹌鹑MITF基因启动子区域的平均甲基化水平为18.52%,北京白羽鹌鹑的平均甲基化水平为29.63%,两者差异显著(P<0.05)。【结论】北京白羽鹌鹑MITF基因启动子区域高甲基化状态导致其表达水平下降,这与其羽色白化有一定的关系。
- 祁艳霞张小辉张小辉刘佩庞有志霍琳珂
- 关键词：鹌鹑羽色甲基化
- 微量元素添加剂在蛋用鹌鹑中的应用
- 2016年
- 鹌鹑是一种饲养广泛的小型家禽,具有抗病力强、生长发育快、性成熟早的特点。根据经济用途的不同,鹌鹑可以分为蛋用型和肉用型两种,我国目前饲养的鹌鹑以蛋用型为主,主要的品种有日本鹌鹑、朝鲜鹌鹑、中国白羽鹌鹑和黄羽鹌鹑。鹌鹑具有很高的食用价值,据《本草纲目》记载,鹌鹑肉能'补五脏、益中续气、实筋骨、耐寒暑。
- 张伟欣张小辉祁艳霞刘佩
- 关键词：微量元素添加剂日本鹌鹑蛋用型肉用型白羽
- TNC基因在牛肌肉发育和前体脂肪细胞诱导分化过程中的表达研究被引量：2
- 2019年
- 【目的】分析TNC基因在牛背最长肌组织发育和前体脂肪细胞诱导分化过程中的表达变化趋势及其与脂肪沉积之间的关系。【方法】利用qRT-PCR技术分析了3、6、12、18、24和30月龄南阳牛背最长肌组织中TNC基因的表达变化,利用索氏抽提法测定了24头牛背最长肌组织中的脂肪含量。分离了牛前体脂肪细胞,通过在培养基中添加2μmol/L柠檬苦素干扰细胞的分化,利用qRT-PCR技术分析了正常诱导分化和柠檬苦素干扰后的诱导分化过程中TNC基因的表达变化。【结果】TNC基因在18月龄之后的牛背最长肌组织中的表达水平逐渐升高。根据肌肉组织中脂肪含量的高低分为高肌内脂肪含量组和低肌内脂肪含量组,发现TNC基因的表达水平在这2组之间没有显著差异。TNC基因在牛前体脂肪细胞诱导分化开始后的第6小时表达量急剧升高,之后开始下降;在诱导分化的后期,当细胞质中有明显的脂质液滴积累时,TNC基因的表达水平再次升高。在诱导分化培养基中添加柠檬苦素能够抑制细胞的分化和脂质的积累,同时也导致TNC基因表达量显著下降。【结论】TNC基因参与了脂肪细胞的分化和脂质沉积的调控过程,该基因表达量上调有利于细胞质中脂质液滴的积累。
- 祁艳霞王玉琴张小辉张小辉刘佩
- 关键词：TNC肌肉发育脂肪细胞基因表达
- 朝鲜鹌鹑OCA2基因克隆及其多态性与羽色的相关性被引量：3
- 2020年
- 【目的】克隆朝鲜鹌鹑(Korean quail)OCA2基因的cDNA序列,检测其在不同羽色(白羽和栗羽)群体胚胎发育不同阶段翅组织中mRNA的表达情况,探讨OCA2基因多态性对朝鲜鹌鹑羽色的影响,筛选可能与羽色相关的多态性位点。【方法】取白羽、栗羽朝鲜鹌鹑孵化6,8,10,12和14 d的胚胎翅组织,提取总RNA,RT-PCR扩增OCA2基因cDNA序列,利用实时荧光定量PCR检测OCA2基因mRNA在朝鲜鹌鹑胚胎发育不同阶段和不同羽色鹌鹑胚胎翅组织中的表达水平;用胚胎发育10 d时的cDNA样品扩增OCA2基因cDNA序列并进行生物信息学分析。以300羽白羽朝鲜鹌鹑和栗羽朝鲜鹌鹑孵化10 d时的胚胎为研究材料,采集翅组织样品,提取基因组DNA,PCR扩增OCA2基因,通过不对称PCR-SSCP方法结合测序确定基因型,分析不同基因型对朝鲜鹌鹑羽色形成的影响。【结果】朝鲜鹌鹑OCA2基因胚胎发育6~8 d时的表达量低于胚胎发育10~14 d时的表达量,且在10 d时达到最高。6~8 d时,OCA2基因的表达水平在2种羽色朝鲜鹌鹑胚胎中差异不显著;10~14 d时,栗羽朝鲜鹌鹑OCA2基因mRNA的表达水平显著高于白羽朝鲜鹌鹑(P<0.05)。OCA2基因CDS区片段大小为2660 bp,含有24个外显子,开放阅读框长2556 bp,编码含851个氨基酸的稳定疏水性蛋白。在朝鲜鹌鹑OCA2基因中检测到3个SNP位点,分别为外显子2上的c.93A>G、外显子9上的c.999A>G、3′UTR上的c.2569C>T;群体遗传学分析显示,3个突变位点均表现为中度多态(0.250.05)。在3′UTR上的c.2569C>T位点,栗羽朝鲜鹌鹑3种基因型(CC、CT和TT)的频率分布与白羽朝鲜鹌鹑存在极显著差异(P<0.01),说明该突变位点与鹌鹑羽色之间存在一定的关联性。【结论】白羽朝鲜鹌鹑翅组织中OCA2基因低表达可能与其羽毛白化有一定的关系,OCA2基因3′UTR上的c.2569C>T突变与朝鲜鹌鹑羽色性
- 刘佩庞有志张小辉张小辉祁艳霞赵淑娟刘坤举
- 关键词：朝鲜鹌鹑羽色基因多态性
- 不同羽色朝鲜鹌鹑胚胎期皮肤、毛囊组织发育研究
- 廖辉庞有志张小辉赵淑娟祁艳霞李亦昕刘佩
- 凝结芽孢杆菌对朝鲜鹌鹑生长性能、蛋品质和血清抗氧化指标的影响被引量：8
- 2017年
- 为探究不同水平的凝结芽孢杆菌制剂对朝鲜鹌鹑生长性能、蛋品质和血清抗氧化指标的影响,试验选取300只蛋用朝鲜鹌鹑,随机分为5组,每组设3个重复,每个重复20只。对照组饲喂基础日粮,4个试验组分别在基础日粮中添加0.1%、0.15%、0.2%和0.3%的凝结芽孢杆菌制剂。结果表明:与对照组相比,试验3组的平均日增重显著提高(P<0.05);试验1、2、3和4组的蛋白高度和哈夫单位极显著高于对照组(P<0.01),试验1、2和3组的蛋壳强度极显著高于对照组(P<0.01);与对照组相比,试验3组血清中的过氧化氢酶(CAT)含量显著提高(P<0.05);与对照组相比,试验1、2和3组血清中的总抗氧化能力(T-AOC)极显著提高(P<0.01),试验2组血清中的丙二醛(MDA)含量极显著降低(P<0.01)。以上结果表明,日粮中添加凝结芽孢杆菌制剂可提高朝鲜鹌鹑的生长性能,改善蛋品质,提高血清抗氧化能力,添加量以0.2%较为适宜。
- 王维张小辉庞有志刘佩李东昆孙晶展张德明
- 关键词：凝结芽孢杆菌朝鲜鹌鹑蛋品质
- 柠檬苦素对牛前体脂肪细胞分化过程中核纤层蛋白基因表达的影响被引量：3
- 2017年
- 核纤层位于核膜内侧,主要由核纤层蛋白构成,对细胞核起重要的机械支持作用。编码核纤层蛋白的基因突变能导致人类肌肉、脂肪等组织病变,统称为核纤层病。为了研究柠檬苦素对牛前体脂肪细胞分化过程中核纤层蛋白基因表达的影响,试验利用qRT-PCR技术分析了编码核纤层蛋白的LMNA、LMNB1和LMNB2基因在牛前体脂肪细胞诱导分化过程中的表达变化,同时在细胞培养基中添加柠檬苦素,以分析柠檬苦素对细胞分化和核纤层蛋白编码基因表达的影响。结果表明:在培养基中添加柠檬苦素能够有效抑制牛前体脂肪细胞向成熟脂肪细胞的分化,试验组细胞中脂质沉积量极显著低于对照组(P<0.01)。LMNA基因在牛前体脂肪细胞中具有较高的表达水平,添加柠檬苦素的试验组LMNA基因表达水平有降低的趋势。试验组LMNB1和LMNB2基因表达量在诱导分化的第0.5天极显著低于对照组(P<0.01),在诱导分化的10~12 d试验组LMNB1基因表达量显著高于对照组(P<0.05)。LMNA、LMNB1和LMNB2基因在牛前体脂肪细胞诱导分化过程中具有相似的表达变化趋势,均在诱导分化开始的0.5~1 d表达量升高。说明柠檬苦素在牛前体脂肪细胞早期分化时具有抑制核纤层蛋白基因表达的作用,而在分化后期则能够促进核纤层蛋白基因表达。
- 徐铁山张小辉刘佩廖辉李亦昕
- 关键词：核纤层蛋白柠檬苦素脂肪沉积基因表达
- 基质金属蛋白酶2,3,13基因表达水平与牛肉质性状的相关性分析被引量：5
- 2016年
- 系水力、剪切力和蒸煮损失是肉质性状的重要指标,肌纤维细胞外基质的成分和结构对肉质性状有重要的影响,基质金属蛋白酶(MMPs)是体内降解细胞外基质的蛋白酶。本研究采用qRT-PCR技术分析了南阳牛肌肉发育过程中MMP2,3,13基因的表达变化规律,发现MMP2和MMP3基因在18月龄时表达量显著降低(P<0.05),MMP13基因表达水平在整个发育期间无显著差异。采集了24头2岁左右的南阳牛与夏洛莱F1代杂交牛背最长肌组织,分别测定了系水力、剪切力、蒸煮损失和肌内脂肪含量,发现MMP2基因的表达量与剪切力间呈显著负相关(r=-0.542 0,P<0.01);MMP13基因的表达量与系水力间呈显著负相关(r=-0.489 1,P<0.05)。结合已有研究,可初步推断MMPs基因可能通过调控胶原蛋白等细胞外基质成分的重构而影响肉质。
- 祁艳霞张小辉王玉琴刘佩张天留张振兴
- 关键词：MMPS肌肉发育肉质
