郜赵伟
- 作品数：9 被引量：20H指数：3
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科技统筹创新工程计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血清腺苷脱氨酶水平与系统性红斑狼疮活动度的关系研究被引量：5
- 2017年
- 目的探讨血清腺苷脱氨酶(ADA)水平与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动度的相关性。方法收集确诊的SLE住院患者(57例)的血清标本,并选取同时期体检的健康成人血清标本(57例)作为对照,检测血清标本中ADA活性并对SLE患者的病历资料进行回顾性分析,以SLE活动指数(SLEDIA)作为判断疾病活动程度的标准,将患者分为3组:缓解组(SLEDAI:0~4分),轻度活动组(SLEDIA:5~9分),中重度活动组(SLEDIA≥10分),分析SLE患者血清ADA活性与疾病活动程度的相关性。同时通过回顾性研究记录SLE患者的红细胞沉降率(ESR)和高敏C-反应蛋白(hs-CRP)并分析二者与患者疾病活动程度的相关性。结果 SLE患者和对照组血清中的ADA活性水平均值分别为(14.58±6.50)U/L和(8.26±2.05)U/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。缓解组SLE患者血清中的ADA活性均值为(10.94±5.27)U/L,轻度活动组SLE患者血清中的ADA活性均值为(13.69±4.36)U/L,中重度活动组SLE患者血清中的ADA活性均值为(17.75±7.09)U/L,组间差异有统计学意义(P<0.05)。血清ADA活性水平与SLEDAI积分呈正相关(r=0.361,P=0.006)。ESR、hs-CRP与SLEDAI积分无相关性(P>0.05)。结论血清中ADA活性检测可作为监测SLE患者疾病活动度的重要诊断指标。
- 赵冠华郜赵伟李自越张惠中
- 关键词：自身免疫性疾病腺苷脱氨酶系统性红斑狼疮
- siRNA沉默HepG-2细胞B7-H3对细胞行为学影响的研究被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨siRNA方法沉默HepG-2细胞中B7-H3基因表达对细胞周期、增殖及迁移能力的影响。方法:设计合成针对B7-H3基因的siRNA及无关干涉siRNA序列,并分别构建干涉载体pSilencer4.1-CMV neo/B7-H3及无关干涉载体pSilencer4.1-CMV neo/NC;采用脂质体Lipofectamine^(TM)2000转染对数生长期肝癌细胞HepG-2,经G418筛选后获得相应细胞模型;利用RT-PCR和Western blot方法分别检测空白对照组(WT)、无关干涉组(si-NC)和B7-H3干涉组(si-B7-H3)细胞中B7-H3 mRNA及蛋白表达水平;利用CCK-8细胞增殖实验及克隆形成实验评价各组细胞增殖情况;利用碘化丙锭(PI)染色流式细胞术检测各组细胞周期分布情况;利用细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力。结果:成功构建了pSilencer4.1-CMV neo/B7-H3干涉载体。RT-PCR及Western blot结果显示,B7-H3干涉组较空白对照组、无关干涉组mRNA及蛋白水平明显下降;CCK-8增殖、克隆形成实验、细胞划痕实验及流式结果表明B7-H3干涉组增殖受到明显抑制,克隆较小且克隆数减少,细胞周期阻滞于G_0/G_1期,细胞迁移能力受抑制。结论:利用siRNA靶向干涉B7-H3表达可抑制HepG-2细胞增殖并诱导细胞周期阻滞,降低细胞迁移能力,实验结果为开发针对B7-H3靶点的肝癌免疫治疗提供了初步实验及理论基础。
- 左佳蕙张喆龙敏郜赵伟刘冲董轲张惠中
- 关键词：肝癌B7-H3细胞周期细胞迁移
- 抗AEG-1单链可变区抗体的原核表达及纯化
- <正>目的构建抗AEG-1单链可变区抗体(V23)的原核表达载体,并对表达蛋白进行纯化及免疫活性检测。方法应用Primer5软件设计针对抗AEG-1单链可变区抗体基因序列的引物,构建PRsetC/V23原核表达质粒,经限...
- 路蔓刘昕阳王琛刘冲郜赵伟欧阳永日龙敏张惠中
- 文献传递
- 小鼠抗星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)单克隆抗体的制备及应用
- 2016年
- 目的制备并纯化具有高特异性的抗星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)单克隆抗体(mAb),并进行异硫氰酸荧光素(FITC)标记,鉴定标记的mAb与肿瘤细胞的结合能力。方法小鼠腹水诱生法制备并纯化抗AEG-1 mAb,Western blot法和免疫组织化学染色检测mAb的纯度及免疫活性。流式细胞术检测FITC标记mAb的标记效率,流式细胞术及免疫细胞化学染色检测FITC标记mAb与肿瘤细胞的结合能力。结果纯化得到了具有较高纯度的抗AEG-1 mAb,免疫活性良好;流式细胞术检测结果显示,FITC标记的mAb标记的肿瘤细胞表面荧光强度明显增加,标记率可达到90%以上;FITC标记的mAb可特异性识别并结合AEG-1阳性表达的肿瘤细胞,还能与小鼠体内注射的肿瘤细胞结合,在BALB/c小鼠血液中可检测出荧光染色阳性的肿瘤细胞。结论成功制备出小鼠抗AEG-1 mAb并进行了FITC标记,标记的mAb在体内外均可与肿瘤细胞特异性结合。
- 路蔓龙敏郜赵伟刘冲张惠中
- 关键词：单克隆抗体肿瘤特异性
- 腺苷抑制乳腺癌细胞增殖和迁移的机制被引量：1
- 2016年
- 目的:检测腺苷对乳腺肿瘤细胞增殖及迁移能力的影响,并探究其潜在的分子机制。方法:以MCF-7细胞为模型,采用梯度浓度的腺苷处理细胞,MTT及细胞计数法检测腺苷对细胞增殖的影响,流式细胞术检测腺苷对细胞凋亡及周期的影响,划痕修复实验检测腺苷对细胞迁移能力的影响。结果:腺苷可显著抑制MCF-7细胞增殖,且抑制效果与腺苷浓度及作用时间呈相关性。流式细胞术检测结果表明腺苷可诱导MCF-7细胞凋亡,并引起细胞的G_2/M期阻滞。划痕实验结果表明腺苷抑制MCF-7细胞的迁移能力。实时定量PCR检测结果发现,促细胞凋亡分子Bax及Bak表达量显著升高,而凋亡抑制分子Bcl-2表达量显著下降,同时Caspase-3的表达量也显著升高。结论:腺苷可诱导MCF-7细胞凋亡,抑制细胞的增殖,同时腺苷可以抑制MCF-7细胞的迁移能力。腺苷诱导MCF-7细胞凋亡与其激活线粒体凋亡通路密切相关。
- 王会平郜赵伟刘冲龙敏李岩沈建军董轲张惠中
- 关键词：腺苷增殖凋亡迁移
- 血清腺苷脱氨酶检测在几种自身免疫性疾病中的临床意义研究被引量：6
- 2017年
- 目的:探讨血清腺苷脱氨酶(ADA)检测在几种自身免疫性疾病诊断中的应用价值。方法:收集确诊的系统性红斑狼疮(127例)、类风湿性关节炎(103例)和重症肌无力患者(34例)的血清标本,以同时期体检的正常成人(149例)为对照,采用ADA偶联嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)和黄嘌呤氧化酶(XOD)法检测血清中ADA活性。结果:系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、重症肌无力患者和正常体检者血清中的ADA活性均值分别为(12.91±5.82)U/L、(10.91±3.70)U/L、(9.21±3.57)U/L、(8.73±2.79)U/L。系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎患者血清中ADA活性均显著高于正常体检者(P<0.05),而重症肌无力患者血清中ADA活性和正常体检者相比差别无统计学意义(P>0.05)。ROC结果显示将血清ADA活性>10U/L同时作为RA和SLE诊断的阳性值,ADA活性诊断SLE的AUC为0.748,敏感性为59.8%,特异性为83.2%。ADA活性诊断RA的敏感性为42.7%,特异性为83.2%。血清ADA活性为10 U/L作为诊断的参考值上限,其诊断SLE的效果优于ESR和hs-CRP,其诊断RA的效果低于ESR和hs-CRP。结论:系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎患者血清ADA活性均有升高,在系统性红斑狼疮患者中升高更为明显,可作为系统性红斑狼疮潜在的辅助诊断标志物。
- 赵冠华郜赵伟董珂黄晶张惠中
- 关键词：自身免疫性疾病腺苷脱氨酶系统性红斑狼疮类风湿性关节炎重症肌无力
- 抗AEG-1单链可变区抗体的原核表达及纯化
- 2015年
- 目的构建抗星形细胞上调基因1(AEG-1)单链可变区抗体(V23)的原核表达载体,并对表达蛋白进行纯化及免疫活性检测。方法应用Primer5软件设计针对抗AEG-1单链可变区抗体基因序列的引物,构建PRsetC/V23原核表达质粒,经限制性内切酶Pst1酶切以及DNA测序鉴定正确后,将原核表达质粒导入大肠杆菌BL21中,构建含V23基因的原核表达工程茵。经IPTG诱导后,用带His标签的磁珠纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳检测目的蛋白含量,Western blot及ELISA检测抗AEG-1单链可变区抗体的免疫活性。结果构建的原核表达质粒PRsetC/V23经单酶切和测序分析显示,构建的V23基因与设计序列100%一致。IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳显示在31×103处出现一条明显蛋白条带,Western blot检测在80×103处出现AEG-1特异反应条带,ELISA检测显示阳性结果。结论成功构建了PRsetC/V23原核表达质粒及V23原核表达工程茵,该工程茵可表达抗AEG-1单链可变区抗体蛋白,且该蛋白具有良好的免疫活性。
- 路蔓刘昕阳龙敏王琛刘冲郜赵伟欧阳永日陈曦张惠中
- 关键词：单链可变区抗体原核表达
- 抗AEG-1单链可变区抗体的原核表达及纯化
- 目的 通过本实验室前期构建的抗AEG-1 单链可变区抗体的基因序列，设计引物、构建原核表达载体，并对表达出来的蛋白进行纯化及活性检测。
- 路蔓刘昕阳刘冲郜赵伟欧阳永日龙敏张惠中
- 关键词：AEG-1原核表达
- 血清腺苷脱氨酶检测在自身免疫性疾病诊断中的应用价值研究进展被引量：7
- 2017年
- 腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)是在机体免疫反应的调控过程中发挥重要作用的一种酶。血清ADA水平的改变与一些自身免疫性疾病相关,国外多个研究认为系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病患者血清ADA活性水平较健康对照有所升高(P<0.05)。许多研究认为血清ADA水平的升高与自身免疫性疾病的病情有一定相关性,但仍然存有争议。为探索血清ADA活性检测是否有助于自身免疫性疾病的诊断和病情监测,该文对血清ADA检测在几种自身免疫性疾病诊断中的应用研究进展作以综述。
- 赵冠华郜赵伟张惠中
- 关键词：腺苷脱氨酶自身免疫性疾病同工酶
