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杨梦琳
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
广东药学院生命科学与生物制药学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
陈展歌
广东药学院生命科学与生物制药学...
蔡洪敏
广东药学院生命科学与生物制药学...
李黄金
广东药学院生命科学与生物制药学...
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原核表达
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广东药学院
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李黄金
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蔡洪敏
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陈展歌
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杨梦琳
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生物技术
年份
1篇
2014
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昆明鼠肠激酶轻链的原核表达、复性与纯化
被引量:2
2014年
目的:构建昆明小鼠十二指肠肠激酶轻链(mEKL)大肠杆菌高效表达系统,并建立复性与纯化方法。方法:RT-PCR法扩增mEKL全长cDNA,以融合表达载体pET32a克隆于大肠杆菌BL21(DE3)和Origami(DE3),采用阴离子交换层析纯化复性表达产物,经牛肠激酶消化回收mEKL。结果:扩增得到723bp的mEKL全长cDNA,经序列分析发现,昆明鼠来源的mEKLcDNA序列的Ser131密码子中存在1个同义点突变。mEKL在2种宿主菌中的表达产物均为包涵体蛋白,经稀释复性、阴离子交换层析纯化和肠激酶切割可得高纯度mEKL。结论:成功构建昆明鼠源mEKL高效表达工程菌,并建立相应的纯化方法。
陈展歌
陈锡贤
杨梦琳
蔡洪敏
李黄金
关键词:
复性
纯化
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