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广藿香青枯病菌低致病力突变株的遗传稳定性研究: 2020年; 目的对广藿香青枯病菌低致病力突变株进行遗传稳定性评价。方法以广藿香青枯菌菌株PRS-84(对照)及通过Tn5转座子插入获得的低致病力突变株PRS-84-4-7、PRS-84-4-49为供试菌株,分别继代培养至100代;以Tn5转座子上的Kanr基因设计引物,对继代突变株进行PCR验证,并根据Tn5转座子序列设计引物,通过反向PCR检测转座子插入位点,以考察突变株基因组中Tn5转座子的遗传稳定性;通过观察菌体形态,并测定生长曲线、运动性、生物膜形成能力及致病性,考察突变株继代前后表型的变化。结果Tn5转座子在继代100代的低致病力突变株基因组中仍稳定存在,且插入位点不变;继代对低致病力突变株的菌体形态、生长速率、运动性、生物膜形成能力及致病力没有明显的影响。结论通过Tn5转座子插入突变获得的低致病力突变株具有良好的遗传稳定性,为研发防治广藿香青枯病的生防菌株奠定基础。; 黎广卫贺红李颛张宇瑶王亚琴蔡静李巧张泳; 关键词：广藿香

广藿香青枯病菌rep-PCR基因指纹图谱分析被引量：1: 2016年; 目的对广藿香青枯病病原菌进行鉴定,并利用rep-PCR基因指纹图谱技术,对广藿香青枯病菌进行遗传多样性分析,以了解青枯病菌的遗传结构及菌株间的遗传分化情况。方法利用青枯菌特异性引物OLI1/Y2对广藿香青枯菌疑似菌株进行PCR鉴定;利用rep-PCR技术,分别用3组引物(BOX A1R;ERIC 1R,ERIC2;REP 1R,REP 2-1)对广藿香青枯病菌进行PCR扩增及基因指纹图谱分析。结果共有12株广藿香青枯菌疑似菌株扩增出288 bp大小的目标条带;BOX-PCR、ERIC-PCR及REP-PCR指纹图谱分析结果表明,供试菌株在相似系数为0.5处,分别分成6,7,8个簇群;在相似系数为0.8处,均分为8个簇群,其中簇群Ⅰ均包括5个亲缘关系相近的菌株。结论 rep-PCR基因指纹图谱技术能有效地区分供试菌株间的遗传差异;广藿香青枯病菌具有较丰富的遗传多样性,部分菌株间遗传相似度较高,组成优势菌群。; 李颛邓志成贺红金华张宇瑶; 关键词：广藿香

广藿香青枯病菌Tn5转座子插入突变体的构建被引量：1: 2019年; 该研究以从感染了青枯病的广藿香植株中分离的青枯菌菌株PRS-84为供试菌株,利用电击转化法,对青枯菌进行Tn5转座子插入突变,在含卡那霉素的培养基上筛选抗性克隆。对抗性克隆进行卡那霉素抗性基因的PCR鉴定,并利用反向PCR技术获得转化子Tn5转座子插入位点的侧翼序列并进行序列测定与分析。结果表明,青枯菌感受态细胞经电击转化后,获得了抗性克隆。经PCR扩增,抗性克隆在预计的约700 bp处出现特异性条带。反向PCR扩增获得了转化子Tn5转座子插入位点的侧翼序列,经序列测定及同源性分析,初步推测3个突变体的Tn5转座子插入位点基因分别为typ A基因、rec O基因和gid A基因。该研究建立了广藿香青枯病菌Tn5转座子插入突变体系,获得了青枯菌Tn5转座子插入突变体,为构建广藿香青枯菌突变体库及发现青枯菌致病基因奠定了基础。; 王亚琴张宇瑶贺红李颛邓志成金华黎广卫; 关键词：广藿香青枯菌电击转化突变体

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李颛