刘小兰
- 作品数：17 被引量：42H指数：4
- 供职机构：江西农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪丹毒杆菌分离鉴定及体外抑菌试验被引量：1
- 2019年
- 为了确诊临床疑似猪丹毒病例,采集病死猪的内脏,用常规生化法和PCR法进行细菌分离鉴定,用牛津杯法做体外抑菌试验。结果:分离菌H_2S、靛基质、枸橼酸盐等试验为阴性;分解葡萄糖、麦芽糖等,不能分解蔗糖;对青霉素、头孢唑啉等高度敏感,对氯霉素、链霉素等中度敏感;枯草芽孢杆菌、鸡唾液乳酸杆菌和猪小肠乳酸杆菌对其均有较强的抑制作用。结论:分离菌为猪丹毒杆菌,该病是由猪丹毒杆菌引起的急性热性传染病,防治首选药物为青霉素,枯草芽孢杆菌、鸡唾液乳酸杆菌和猪小肠乳酸杆菌可减少或部分取代抗生素对该病的防治。
- 陶王敏文东旭刘小兰单心怡张梦娟戚伟张丰薇朱芝秀
- 关键词：猪丹毒杆菌抑菌试验
- 胞内劳森菌TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：2
- 2022年
- 为建立用于检测临床粪便样品中胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis,L.intracellularis)的TaqMan荧光定量PCR方法,本研究参考GenBank中发表的L.intracellularis PHE/MN1-00株基因组序列设计50对引物,通过SYBR GreenⅠ荧光染料法PCR验证引物的特异性,针对扩增效率最好的特异性上、下游引物合成相应的TaqMan探针,优化反应条件,对其线性范围、敏感性和重复性进行验证,系统的完成了该方法的建立。结果表明,所建立的TaqMan荧光定量PCR方法,特异性强;在靶标核酸为2.95×10^(1)~2.95×10^(6)拷贝/μL区间线性关系良好,相关系数R^(2)=0.9981,扩增效率为96.51%;最低检测浓度为5拷贝/μL;批间和批内的CV均小于2%,重复性好。使用普通PCR方法与本方法对2020年10月至2021年2月采自江西地区猪场的373份粪便样品进行检测,L.intracellularis的总检出率分别为21.4%(80/373)和27.6%(103/373),显示本方法具有更高的敏感性,其检测场阳性率为88.9%(8/9),各阶段生产猪群阳性率分别为经产母猪28.7%、保育仔猪36.4%和育肥猪14.3%。该检测结果为江西地区的L.intracellularis的流行情况提供参考。
- 刘昌锦魏黄思梧胡换仪肖童林敏刘小兰边彦超罗峰邓舜洲
- 鸡痘病毒FJ01株的分离鉴定被引量：1
- 2020年
- 为调查福建规模化养鸡场病鸡的死亡原因,试验以福建省送检的鸡冠及头部皮肤有大量结节状痘痂的病鸡病料为研究对象进行了PCR鉴定。初步鉴定为鸡痘病毒(FWPV)株后,通过接种鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)分离病毒;用原代鸡胚成纤维细胞(CEF)和传代细胞DF-1细胞对病毒进行传代,观察该分离毒株在两种细胞上培养特性的异同;对被感染的CEF进行超薄切片观察病毒的分布及病毒粒子的形态;并针对该分离株的TK基因和FPV175基因序列进行同源性分析。结果显示,接种经抗生素处理后的病料匀浆液上清的CAM出现大面积单个白色隆起的痘斑,匀浆痘斑后同时接种CEF和DF-1细胞,两种细胞均能产生稳定可持续传代的细胞病变,但病变出现的时间及病变程度不同;透射电镜下观察到典型的FWPV粒子密集分布在CEF的胞浆中,清晰可见卵圆形外膜包裹着的两侧凹陷的核心。对其中23个病毒粒子进行统计测得病毒粒子的大小为(258~344)nm×(153~238)nm;针对FWPV TK基因和FPV175基因的PCR检测及测序结果与GenBank收录的FWPV(登录号:NC_002188.1)核苷酸序列同源性分别高达100%和99.8%。以上结果表明该分离毒株为FWPV,命名为FWPV-FJ01,为国内FWPV的防治提供了参考依据。
- 高映雪林敏胡换仪刘小兰刘昌锦万文忠罗锋邓舜洲
- 关键词：病毒粒子
- 獭兔巴氏杆菌的分离鉴定及抑菌作用分析被引量：1
- 2021年
- 为了确定引起南昌某兔场獭兔发病的病原,并找到有效的防治措施,试验对病死獭兔进行了临床诊断、细菌分离、生化鉴定、16S rRNA分子生物学鉴定、药敏试验、体外抑菌试验及动物回归试验。结果表明:剖检可见肝脏上有针尖状白色坏死点,分离菌瑞氏染色镜检呈两极浓染;菌落在5%兔血琼脂培养基上呈现圆润不溶血现象,为革兰氏阴性短小杆菌;分离菌均能发酵蔗糖,不能发酵乳糖,甲基红、乙酰甲基甲醇试验呈阴性;琼脂糖凝胶电泳得到大小为1 800 bp的目的条带,分离菌与NCBI中巴氏杆菌属的同源性高达97.3%~100%;分离菌对头孢氨苄高度敏感,对乙酰螺旋霉素和氨苄西林耐药;鸡唾液乳杆菌对分离菌的抑制效果较好;分离菌有较强的致病性,攻毒后12 h内小鼠全部死亡。说明分离菌为巴氏杆菌,防治首选头孢曲松或头孢氨苄。
- 刘小兰邓舜洲单心怡陶王敏文东旭康绍珠李雅婷张梦娟朱芝秀
- 关键词：獭兔巴氏杆菌体外抑菌试验
- 鸡巴氏杆菌的分离鉴定及体外抑制实验被引量：5
- 2018年
- 为了诊断一起鸡暴发性死亡病例,对死亡鸡肝脏进行细菌分离、生理生化实验、药敏实验、动物致病性实验。结果:分离菌生理生化特性与巴氏杆菌标准株基本一致;分离菌对青霉素类抗生素完全耐药,对卡那霉素、红霉素、氧氟沙星等中度敏感;分离菌肌注健康试验鸡0.5m L,鸡12h内死亡,口服0.5m L,鸡24h内死亡;鸡唾液乳酸杆菌对分离菌有较强的抑制作用。结论:分离菌为多杀性巴氏杆菌强毒株,该病例是由多杀性巴氏杆菌引起的鸡巴氏杆菌病,有效药物为:卡那霉素、红霉素、氧氟沙星等,鸡唾液乳酸杆菌可减少或部分取代抗生素对该病的使用。
- 边彦超刘小兰康绍珠李雅婷梁诗毅曹刚陈飞虎陈林文朱芝秀
- 关键词：巴氏杆菌药敏实验
- 一例猪链球菌病的诊断及其病原分离鉴定被引量：6
- 2021年
- 对某猪场送检的一份出现神经症状的保育仔猪病料进行了细菌分离,并对该分离菌株进行了染色镜检、生化鉴定、PCR检测和药敏试验。革兰氏染色结果表明从病料中分离到1株革兰氏阳性链状球菌,其生化鉴定结果与猪链球菌生化特性一致。分离菌株16srRNA基因测序结果表明其与2型猪链球菌亲缘关系最近,同源性达100%,确定该分离菌株为2型猪链球菌。药敏试验结果表明该分离菌株对青霉素、恩诺沙星、氨苄西林、氟苯尼考、头孢噻肟、阿莫西林、氧氟沙星、诺氟沙星等高度敏感;对复方新诺明、多西环素、土霉素、头孢曲松、丁安卡那等中度敏感,对磺胺异恶唑耐药。
- 胡换仪林敏刘小兰刘昌锦聂佳婷邓舜洲
- 关键词：猪链球菌药敏试验
- 蜜蜂球囊菌的分离鉴定及体外抑菌试验
- 2019年
- 蜜蜂白垩病在世界各地呈现稳定高发态势,为了找到防治该病的有效方法,对疑似白垩病虫体进行真菌分离鉴定及体外抑菌试验。用点种法对虫体进行真菌分离培养;用显微观察法对分离菌进行形态学鉴定;用PCR扩增法,对分离菌菌丝进行分子生物学鉴定;用PDA液体试管培养法,做枯草芽孢杆菌抑制分离菌菌丝试验;用PDA平板培养法,做枯草芽孢杆菌抑制分离菌菌斑生长及孢子萌发试验。结果得到4株分离株;分离菌菌丝直径、孢子球直径、孢子长宽比均与蜜蜂球囊菌的大小一致;分离菌约580bp处出现目的条带,16S rDNA基因序列同源性与蜜蜂球囊菌最高;在PDA液体试管中,分离菌菌丝停止生长;在PDA平板上,分离菌菌斑逐渐萎缩消失;在PDA平板上,分离菌孢子不萌发。结论分离菌为蜜蜂球囊菌;枯草芽胞杆菌可抑制蜜蜂球囊菌生长,可用于蜜蜂白垩病的防治。
- 戚伟刘小兰单心怡张丰薇梁诗毅周亚南区海蕴朱芝秀
- 关键词：蜜蜂球囊菌体外抑菌
- 猪轮状病毒江西株AY01的分离鉴定被引量：2
- 2022年
- 【目的】确定江西省某猪场哺乳仔猪发生腹泻的病因。【方法】对送检的仔猪小肠样品进行猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)和猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)的RT-PCR检测,将阳性样品接种MA104细胞传代进行PoRV的分离;对分离毒株进行电镜观察、间接免疫荧光试验、PoRV VP4和VP7基因序列测序和动物回归等试验。【结果】猪小肠病料样品经终浓度15μg/mL的胰酶处理37℃孵育2 h,接种MA104细胞,能在细胞上增殖传代,第6代开始表现稳定的细胞病变;电镜观察可见病毒粒子直径大小为61~70 nm,平均大小为65 nm,呈带有短纤突且外缘光滑的形似车轮状的粒子,具有轮状病毒粒子典型的形态特征;间接免疫荧光试验和RT-PCR检测均为PoRV阳性,确定该分离株为PoRV。分离株VP4和VP7基因序列分析显示,VP4基因型与P[23]基因型相似性最高,VP7基因型与G5基因型相似性最高,根据A群轮状病毒最新分类方法,分离株属于G5P[23]型。动物回归试验结果显示,经口感染该分离株的1日龄初生仔猪于感染后24 h左右陆续出现水样腹泻、呕吐等临床症状,并能在粪便中检测到PoRV。【结论】通过MA104细胞连续传代,从江西某猪场的腹泻仔猪小肠样品成功分离到1株PoRV,该分离株属于G5P[23]型PoRV,为哺乳仔猪发生腹泻的病原。
- 刘小兰刘昌锦余文洋李潇翔边彦超黄校花罗锋邓舜洲
- 关键词：动物回归试验
- 甲鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定及体外抑菌试验被引量：6
- 2019年
- 本试验采用分离培养法观察菌落形态特征,微量生化法检测生化特性,PCR扩增法进行分子鉴定,纸片扩散法检测耐药性,牛津杯法检测体外抑菌作用,人工感染动物法检测致病性,以期找到防控甲鱼大量发病的有效办法,对具有典型病状的甲鱼进行细菌分离鉴定。试验结果表明:得到4株形态一致的G-短杆菌JAY-1、JAY-2、JAY-3、JAY-4;均分解葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等,不分解乳糖、鼠李糖、木糖等,硝酸盐、枸橼酸盐等为阳性,H2S、尿素等为阴性;均在约1 500 bp处出现目的条带,与气单胞菌同源性最高,与嗜水气单胞菌同一分支;对青霉素G、阿莫西林、林可霉素、头孢氨卞等完全耐药,对红霉素、四环素等耐药,对头孢曲松、环丙沙星、恩诺沙星敏感;8株乳酸杆菌对分离菌均有明显的抑菌圈;攻毒小白鼠24 h内均死亡,均分离到与自然发病株一致的菌株。说明分离菌均为嗜水气单胞菌,乳酸杆菌对分离菌具有显著的抑致作用,头孢曲松、环丙沙星、恩诺沙星等与乳酸杆菌配合用药,可作为临床防控嗜水气单胞菌的参考依据。
- 康绍珠黄志琴刘小兰林敏李雅婷曹刚陈林文梁诗毅陈飞虎朱芝秀
- 关键词：嗜水气单胞菌甲鱼药敏试验体外抑菌
- 兔巴氏杆菌与大肠杆菌混合感染病例诊断及药敏试验（英文）被引量：2
- 2017年
- 为了诊断患病死亡兔,对死亡兔进行临床解剖,细菌分离培养,获得DX01、DX02、JX01、JX02等4株菌。按照常规生化鉴定法,对分离菌进行生理生化实验,结果:DX01、DX02对甘露醇、乳糖、葡萄糖、麦芽糖均产酸产气,不发酵蔗糖,枸橼酸钠、尿素、V-P、硫化氢、明胶等反应均为阴性,靛基质、M-R、硝酸盐等反应均为阳性,与大肠杆菌标准株完全一致;JX01、JX02均发酵甘露醇、蔗糖、葡萄糖、麦芽糖,不发酵乳糖,靛基质、M-R、V-P、硫化氢、明胶等反应均为阴性,硝酸盐反应为阳性,与巴氏杆菌标准株基本一致,JX01、JX02进一步经过16Sr DNA检测与测序分析,与巴氏杆菌同源性为100%。分离菌动物接种试验结果,试验组小白鼠在2日内均死亡。死亡小白鼠体内均分离出了原培养物。结论:DX01、DX02为大肠杆菌,JX01、JX02为大肠杆菌,患病死亡兔由大肠杆菌和巴氏杆菌混合感染引起的。按照琼脂扩散法做药敏实验,结果 DX01、DX02只对卡那霉素、氧氟沙星、甲氧嘧啶敏感,对其他的药物不敏感;JX01、JX02对氧氟沙星、甲氧嘧啶、庆大霉素、呋喃唑酮、强力霉素、链霉素、复方新诺明、大观霉素等敏感,对头孢拉啶等中度敏感。治疗该病临床用药首选氧氟沙星、甲氧嘧啶。
- 朱芝秀蒋新华邓舜洲林敏刘小兰柳仲彦超
- 关键词：大肠杆菌巴氏杆菌
