程琳琳
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 加工番茄PCR-SSCP分子标记体系的建立与优化
- 2015年
- 以加工番茄为试验材料,采用PCR-SSCP分子标记技术,对DNA提取方法、PCR反应程序、聚合酶链式反应-单链构象多态性分子标记体系的电泳条件、变性剂等诸多因素进行了研究,筛选和建立了多态性检出率高、带型清晰、重复性好的PCR-SSCP反应体系和反应程序。结果表明：采用CTAB法提取番茄叶片DNA时,在CTAB缓冲液中加入5mol/L NaCl,第一次抽提离心速度和离心时间分别为8 000r/min和15min,可以获得高质量的DNA,PCR扩增程序为94℃5min,94℃1min,52℃30s,72℃1min,72℃10min,29个循环,退火温度52℃,引物大小100～300bp、98℃变性10min,非变性聚丙烯酰胺凝胶浓度8%,电泳1.5～2.5h,聚丙烯酰胺凝胶中不添加甘油为加工番茄PCR-SSCP分子标记体系最佳的条件组合。
- 马海新庞胜群闫丽娟汪斌魏海滨程琳琳
- 关键词：加工番茄PCR-SSCP聚丙烯酰胺凝胶银染
