王幸
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 口蹄疫病毒2C3AB基因的原核表达及ELISA方法的建立
- 2012年
- 口蹄疫病毒(FMDV)的2C蛋白中存在对自然感染和灭活疫苗免疫动物具有鉴别诊断意义的抗原表位。为建立一种敏感的血清学鉴别诊断方法,本研究截取FMDV 2C蛋白的C端B细胞表位较为富集的区域与全长3AB基因组合,经原核表达获得分子量约为44 ku的目的蛋白。Western blot分析表明,表达产物2C3AB与FMDV感染动物的阳性血清呈特异性反应。以纯化的目的蛋白作为包被抗原建立间接ELISA方法,敏感性检测表明该方法比3ABC-ELISA具有更高的敏感性;同时检测猪圆环病毒、猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒、猪瘟病毒标准阳性血清均无交叉反应。批内和批间重复性试验显示,OD450nm值的变异系数小于9%。采用该方法检测不同背景的临床样品,并与3ABC-ELISA及进口试剂盒比较,总符合率分别为98.5%和90%。结果表明,该ELISA检测方法具有更高的敏感性和良好的特异性、重复性。
- 王幸周国辉刘云于力
- 关键词：口蹄疫病毒原核表达间接ELISA
- 蒲公英最佳药用部位、干燥温度及提取方法的初步考察被引量：2
- 2010年
- 刘艳艳李继昌陈雪英丁文雅王幸徐强
- 关键词：药用部位干燥温度蒲公英金黄色葡萄球菌药理试验停乳链球菌
- 抗A型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及抗原捕获ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2013年
- 为建立A型口蹄疫病毒(FMDV)病原学诊断方法,本研究应用纯化的A型FMDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选获得一株稳定分泌单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株5F7。经IFA特异性鉴定,5F7为一株血清型特异性MAb。亚类为IgG1/κ。间接ELISA检测杂交瘤细胞上清和腹水抗体效价分别为1∶12 800和1∶105。硫氰酸盐洗脱法测定其相对亲和力常数为1.5 mol/L。应用该A型特异性MAb及实验室已制备的MAb 3D9初步建立了检测A型FMDV的抗原捕获ELISA方法。该方法可以检出2.0 ng纯化FMDV和1.0×104TCID50病毒,与O型、Asia1型FMDV及牛肠道病毒、牛呼肠孤病毒、牛传染性鼻气管炎病毒等均无交叉反应,组内及组间重复性试验显示变异系数小于8%。本研究建立的抗原捕获ELISA方法为A型FMDV抗原检测提供了一种实用有效的技术手段。
- 孙静周国辉王幸李超斯魏萍于力
- 关键词：A型口蹄疫病毒单克隆抗体
- 犬整形外科发展趋势与研究进展
- 本文介绍了国内犬美容行业的发展现状及其发展进展，重点介绍了犬耳成形术以及犬断尾术的相关发展情况和进展，同时对中国犬美容整形这一行业提出一定的展望。
- 李响陈萌李德文王幸王茜刘云
- 关键词：整形外科宠物美容
- 黑龙江省蒲公英最佳药用部位及干燥温度的初步考察
- 【目的】目前关于蒲公英药用部位及加工方法未见报道,本试验以绿原酸及总黄酮为指标,考察不同提取方法、不同干燥温度及不同药用部位的含量变化,为提高药材蒲公英质量提供理论依据。【方法】本试验采用超声波提取法、乙醇回流法及水煎煮...
- 刘艳艳李继昌陈雪英王幸徐强
- 关键词：蒲公英干燥温度总黄酮绿原酸
- 文献传递
