王先磊
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：安徽农业大学生物技术中心更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 盐角草和盐芥3个超氧化物歧化酶基因的克隆和功能分析(英文)被引量：3
- 2012年
- 为了探究盐生植物的耐盐机制,比较不同盐生植物超氧化物歧化酶(SOD)基因耐盐性的大小,采用RACE技术克隆了盐角草锰和铜/锌两种SOD的cDNA全长。序列分析表明,盐角草MnSOD基因(SeMSD,GenBank登录号为JQ061158)含有699bp的开放阅读框,编码一个长233个氨基酸的多肽,其预测相对分子量为25.7kD。Cu/ZnSOD基因(SeCSD,GenBank登录号为JQ061160)开放阅读框长为684bp,并编码228个氨基酸的多肽,相对分子量为23.3kD。根据已获得的这两个cDNA序列和GenBank公布的盐芥MnSOD基因序列(ThMSD,EF140719),构建了3个原核表达载体pET30a-SeMSD、pET30a-SeCSD和pET30a-ThMSD,并将它们转化大肠杆菌BL21,成功表达出了目的蛋白。通过优化IPTG的诱导浓度,在6.5%和7.5%盐度下对这3个SOD基因的耐盐能力验证结果显示,相比对照菌BL21(pET30a),转化了pET30a-SeMSD和pET30a-ThMSD载体的重组菌具有更高的耐盐性,而转化pET30a-SeCSD载体的重组菌没有表现出耐盐性的提高。
- 吴凡余梅鲁茂龙李娟王荣富王先磊
- 关键词：盐角草MNSOD耐盐性
- 盐地碱蓬亲环素CYP1基因的克隆、表达及耐盐性分析
- 2013年
- 为探索盐地碱蓬亲环素与其耐盐性的关系,使用RT-PCR和RACE完成盐地碱蓬亲环素基因的全长克隆与测序,并命名为SsCYP-1。SsCYP-1基因全长为875 bp,编码区为531 bp,编码176个氨基酸。多重序列BLAST结果表明,SsCYP-1基因可归于亲环素家族,并具有特定的肽酰脯氨酸顺反异构酶活性结构域特征。为验证盐地碱蓬亲环素的耐盐特性,构建了SsCYP-1表达载体并在大肠杆菌(E.coli)BL21(Rosetta)中通过IPTG诱导表达,通过PAGE检测目的蛋白为19 KD,与Editseq软件预测的目的蛋白大小基本一致。对重组菌PET-SsCYP1进行耐盐分析表明其在高盐浓度培养下生长速度远高于对照菌pETDuet-1。据此,推测该基因在盐地碱蓬生长中可能具有相关的耐盐性作用。
- 吉虎臧洁余梅鲁茂龙王先磊李娟徐凯
- 关键词：盐地碱蓬亲环素耐盐性
