李昕
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
- 供职机构:中国医科大学附属第四医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人膀胱逼尿肌中肾上腺素能β_3受体基因的克隆及其载体的构建
- 2006年
- 目的:克隆人膀胱逼尿肌中肾上腺素能β3受体基因全长,并构建其反义真核表达载体.方法:采用RT-PCR法从人膀胱逼尿肌中扩增出β3-AR的全长cDNA序列,上游引物5′端加有BamH I及C laI酶切位点,下游引物加有HindIII酶切位点,将该片段插入pUC18载体中,摇菌扩增后,用C laI和HindIII切下目的基因,然后将目的片段反向插入逆转录病毒表达载体pLNCX上.最后对产生的重组子进行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定.结果:经琼脂糖凝胶鉴定,所克隆的目的基因大约为1.2 kb,并成功地连接到逆转录病毒载体pLNCX上,经测序证明,插入的目的片段其碱基序列与Genbank上报道的完全一致,且插入载体的方向完全正确.结论:成功克隆了人逼尿肌中肾上腺素能β3受体基因的全长cDNA序列和构建了其反义真核表达载体.
- 李昕王平李刚刘屹立
- 关键词:受体肾上腺素能Β3