黄鹏
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 供职机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 草酸钙晶体刺激下人巨噬细胞高迁移率族蛋白B1的表达被引量：2
- 2015年
- 背景:研究发现在肾结石模型中肾间质晶体周围存在大量单核/巨噬细胞浸润,显示巨噬细胞可能参与晶体在肾脏中的沉积过程,而巨噬细胞是人体重要的固有免疫细胞,在肾脏中沉积的大量的单核/巨噬细胞吞噬晶体,会产生一些炎症因子损伤和破坏肾小管上皮细胞,最终有利于结石的形成。目的:探讨一水草酸钙晶体刺激人巨噬细胞后高迁移率族蛋白B1的表达水平。方法:用100 mg/L的一水草酸钙刺激巨噬细胞,分别于刺激后0,6,12,24和36 h,用Western blot检测细胞总蛋白和细胞浆内高迁移率族蛋白B1的含量;用实时荧光定量PCR,检测细胞中高迁移率族蛋白B1m RNA表达情况;分别于一水草酸钙刺激后0,1,2和4 h,用酶联免疫吸附实验测定细胞培养液上清中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的水平。结果与结论:一水草酸钙刺激后0-6 h细胞浆内高迁移率族蛋白B1的含量较低,刺激后12-36 h细胞浆内高迁移率族蛋白B1逐渐增加。一水草酸钙刺激后0-6 h,巨噬细胞总蛋白中高迁移率族蛋白B1含量不高,在刺激后12 h细胞总蛋白高迁移率族蛋白B1的含量开始增加,并且在刺激后24-36 h保持在较高水平。RT-PCR结果显示,一水草酸钙刺激后0-12 h,培养细胞中高迁移率族蛋白B1的m RNA表达量无明显变化,刺激后18-24 h培养细胞中高迁移率族蛋白B1的m RNA表达量明显增加。ELISA结果显示,一水草酸钙刺激后2 h,细胞培养液上清中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6表达和释放增加,4 h达到明显高峰。结果表明,一水草酸钙可以诱导人巨噬细胞高迁移率族蛋白B1的表达及m RNA表达增加;诱导人巨噬细胞内肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的表达增加,且高迁移率族蛋白B1表达的时间明显晚于肿瘤坏死因子a和白细胞介素6的释放时间。
- 黄鹏邓耀良黎承杨陶芝伟王翔奉有才吴博
- 关键词：巨噬细胞
- 高迁移率族蛋白B1对磷酸钙诱导巨噬细胞释放炎症因子的协同作用被引量：9
- 2014年
- 背景:研究表明,巨噬细胞及其炎症反应参与了肾结石的发生发展。前期实验发现结石晶体可刺激巨噬细胞释放高迁移率族蛋白B1。目的:观察高迁移率族蛋白B1对磷酸钙诱导巨噬细胞释放白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、单核细胞趋化因子1的协同作用。方法:实验分两部分:1将成功诱导为巨噬细胞的U937细胞分为空白组、100 mg/L磷酸钙组、100μg/L高迁移率族蛋白B1组、100 mg/L磷酸钙+100μg/L高迁移率族蛋白B1组,干预1,2,4 h后收集细胞上清液。2将已成功诱导为巨噬细胞的U937细胞分为100 mg/L磷酸钙组、磷酸钙+10μg/L高迁移率族蛋白B1组、磷酸钙+50μg/L高迁移率族蛋白B1组、磷酸钙+100μg/L高迁移率族蛋白B1组,干预4 h后收集细胞上清液。Elisa法检测白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、单核细胞趋化因子1水平。结果与结论:ELISA结果显示,磷酸钙组,100μg/L高迁移率族蛋白B1组上清液白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、单核细胞趋化因子1质量浓度均高于空白组,磷酸钙+100μg/L高迁移率族蛋白B1组上清液上述因子质量浓度均显著高于其他3组(P<0.05),且呈时间依赖性。不同质量浓度高迁移率族蛋白B1+磷酸钙组细胞上清液白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、单核细胞趋化因子1水平均显著高于磷酸钙组(P<0.05),且呈浓度依赖性。结果表明,磷酸钙及高迁移率族蛋白B1均可诱导巨噬细胞释放白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、单核细胞趋化因子1;高迁移率族蛋白B1可协同磷酸钙诱导巨噬细胞释放白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、单核细胞趋化因子1。
- 奉有才邓耀良陶芝伟王翔黎承扬黄鹏吴博
- 关键词：高迁移率族蛋白B1炎症因子巨噬细胞细胞培养技术炎症国家自然科学基金
