李丽娜
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 供职机构：华中农业大学植物科学技术学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室更多>>
- 发文基金：国家梨产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 苹果茎沟病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清的制备被引量：5
- 2010年
- 构建了来源于梨的苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)分离物P-4-1-69和P-L2的原核表达载体pET-P-4-1-69和pET-P-L2,转化大肠杆菌BL21(DE3),在1 mmol.L-1 IPTG下诱导表达。SDS-PAGE和用商业化ASGV抗体对诱导表达产物进行Western Blot分析结果表明,2个分离物的外壳蛋白基因(cp基因)在大肠杆菌中成功地进行了高效表达,重组外壳蛋白的大小约为31 ku。分别用含分离物P-4-1-69和P-L2的重组外壳蛋白的胶条免疫大耳白兔,制备了抗ASGV重组外壳蛋白的抗血清。采用间接ELISA法用所制备的抗血清对回收的重组外壳蛋白进行检测,当抗分离物P-4-1-69和P-L2的重组外壳蛋白的抗血清分别稀释512 000倍和64 000倍时,检测结果仍为阳性。Western Blot分析和组织免疫印迹检测(Tissue blotting immunoassay,TBIA)结果表明,纯化的抗体具有较强的特异性,可有效检测梨样品中的ASGV。
- 宋艳苏郑银英李丽娜王国平洪霓
- 关键词：苹果茎沟病毒CP基因原核表达抗血清
