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异种VEGF融合蛋白疫苗对小鼠Lewis肺癌的抑制作用被引量：2: 2008年; 目的:利用原核表达系统,构建异源血管内皮生长因子融合蛋白疫苗,研究该融合蛋白疫苗对小鼠Lewis肺癌肿瘤模型的抗血管生成主动免疫治疗效果。方法:将鸡VEGF基因克隆入pGEX-4T-2原核表达载体,经IPTG诱导融合蛋白表达,Ni-NTA纯化,透析复性,构建GST-cVEGF融合蛋白疫苗。将C57BL16J小鼠随机分为3组,GST-cVEGF疫苗组10只、cVEGF疫苗组10只、生理盐水组(NS)10只。将各组样品与等体积弗氏佐剂混合,各组小鼠每只分别0、2、3周免疫100μgGST-cVEGF融合蛋白疫苗、单纯cVEGF蛋白疫苗、生理盐水。接种Lewis肺癌细胞,观察肿瘤的生长情况和小鼠状态。接种肿瘤18d后,处死小鼠,剥离肿瘤称重。检测小鼠血清中特异性抗VEGF抗体滴度。结果:GST-cVEGF疫苗组、cVEGF组、生理盐水组肿瘤均重分别为(1·55±0·534)g、(1·93±0·607)g、(2·87±0·642)g。GST-cVEGF疫苗组肿瘤重量明显小于生理盐水组(P<0·01)。疫苗组血清产生抗VEGF抗体滴度为1∶2000。结论:异种血管内皮生长因子基因重组融合蛋白疫苗可干扰机体对自身VEGF的免疫耐受,可产生较高水平的特异性抗VEGF抗体,并具有抑制小鼠Lewis肿瘤生长的效应。; 刘倩唐亮李英辉周彩存谈立松赵玉军张培德张尚权; 关键词：血管内皮生长因子融合蛋白疫苗小鼠

鸡VEGF基因的克隆及融合蛋白的表达与分离纯化: 2008年; 为获得鸡VEGF基因片段,原核表达GST-cVEG基因,并对融合蛋白进行分离纯化,应用RT-PCR从鸡睾丸中扩增出VEGF片段,将PCR产物克隆至pMD 18-T载体。随后,将cVEGF片段亚克隆至带有GST的原核表达载体pGEX-4T-2中,测序鉴定。将重组质粒pGEX4T2-cVEGF转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导,并进一步通过Ni-NTA Agarose亲合层析纯化,纯化产物以SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,结果表明,成功地构建了原核表达质粒pGEX4T2-cVEGF。GST-cVEGF融合蛋白在大肠杆菌中得到了表达,Ni-NTA Agarose纯化后得到较纯的蛋白。Western blot分析证实,纯化后蛋白是GST-cVEGF融合蛋白,为进一步研究GST-cVEGF融合蛋白疫苗抗小鼠肿瘤模型奠定了基础。; 刘倩唐亮谈立松赵玉军; 关键词：融合蛋白原核表达

基因敲除和RNAi在畜牧兽医领域的研究及展望被引量：1: 2007年; 进入21世纪,生命科学已经进入后基因组时代,大规模的基因功能研究正成为生命科学研究的热点,基因组技术的重要性也越来越明显。论述了基因敲除和RNA干涉两方面技术,并对其在畜牧兽医领域的应用进行了展望,提出了利用基因敲除和RNA干涉技术,能够更清楚地研究和发现基因新的功能,同时还可以用于制备疾病动物模型,用于科学研究和新药的筛选,为畜牧兽医带来广大的前景。; 舒小琼周博栾新红刘虹邹美刘倩谭正英罗伟; 关键词：基因敲除 RNA干涉畜牧兽医

苏门答腊虎胸膜间皮肉瘤诊断报告被引量：1: 2008年; 周景博赵玉军吴长德张交尔栾承贵光海红王新刘倩林颖田宝中张波李秀霞胡玉苗; 关键词：肉瘤腹膜病理组织学检查恶性肿瘤病理解剖学

异种表皮生长因子受体胞外段的表达及其抗肿瘤效果研究被引量：1: 2008年; 目的:构建异种EGFR蛋白疫苗并研究其抗肿瘤效果。方法:用PCR方法获得鸡EGFR胞外片段,与pGEX-4T-2载体连接,并在E.coli BL21(DE3)中表达鸡的EGFR胞外片段与GST的融合蛋白,融合蛋白经Ni2+亲和层析柱纯化、复性后,免疫小鼠,免疫3次后,接种小鼠Lewis细胞,观测肿瘤生长情况,ELISA检测小鼠血清中抗EGFR蛋白的抗体效价。结果:成功构建了EGFR胞外段基因的原核表达载体;SDS-PAGE显示成功表达了目的融合蛋白;融合蛋白免疫小鼠后,ELISA法检测到特异性抗EGFR抗体;实验组与对照组肿瘤体积的比较结果显示,融合蛋白疫苗能够在一定程度上抑制肿瘤的生长。结论:异种EGFR蛋白能够克服免疫耐受问题,诱导机体产生抗体,有一定的抗肿瘤效果,为后续的肿瘤疫苗研究打下了基础。; 李英辉唐亮刘倩陈德坤谈立松; 关键词：表皮生长因子受体胞外段原核表达抗肿瘤

噬菌体展示技术研究进展被引量：6: 2007年; 噬菌体表面展示技术是一种将外源蛋白或抗体可变区与噬菌体表面特定蛋白质融合并展示于其表面,构建蛋白质或抗体库,并从中筛选特异蛋白质或抗体的基因工程技术。介绍这一技术的原理、相关展示系统以及在蛋白质相互作用的研究,抗体及疫苗的制备、多肽药物的研制等方面的应用潜力和独特的优点。; 刘倩赵玉军; 关键词：噬菌体融合蛋白

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刘倩