沈沅
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LC-MS/MS法测定家兔血浆中奥昔布宁浓度及其在生物等效性评价中的应用
- 2018年
- 目的建立家兔血浆中奥昔布宁的液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS/MS)定量方法,用于评价自制盐酸奥昔布宁凝胶和国外上市品Gelnique的生物等效性。方法以盐酸苯海拉明为内标,血浆样品经0.5 mol/L NaOH碱化后采用叔丁基甲醚液-液萃取。用Kinetex C_(18)色谱柱分离,流动相采用水相(1‰甲酸-10 mmol/L乙酸铵缓冲液)-乙腈(50∶50,v/v)进行洗脱;电喷雾离子源正离子检测,离子对为m/z 358→142(奥昔布宁),m/z 256→167(苯海拉明)。用以上方法测定家兔单次经皮给予自制盐酸奥昔布宁凝胶和Gelnique后血浆中奥昔布宁的浓度,评价两者的生物等效性。结果奥昔布宁在1~200μg/L范围内线性关系良好,低中高质控浓度的批间和批内精密度(RSD)介于1.67%~9.79%,准确度在92.9%~103%。自制盐酸奥昔布宁凝胶和Gelnique经评价生物等效。结论本方法简便,专属性强,灵敏度好且准确性高,适用于透皮制剂在家兔体内的药动学研究和生物等效性评价。
- 沈沅陈忠杰曾梦华
- 关键词：奥昔布宁液相色谱-串联质谱法生物等效性家兔血浆透皮制剂
- 瑞喹莫德(R848)具有更强的免疫佐剂效应被引量：4
- 2017年
- 目的选择目前常用的几种商业化Toll样受体(TLR)配体进行对比,考察各候选物在小鼠体内外诱导增强Th1型细胞免疫反应的特点,为新疫苗佐剂的研究和筛选提供支持。方法TLR配体多肌胞苷酸[poly(I∶C)]、单磷酰脂质A(MPLA)、瑞喹莫德(R848)、含CpG序列寡核苷酸C(CpG-C)体外刺激小鼠树突状细胞(DC),采用ELISA检测细胞上清液白细胞介素12(IL-12)的水平;以卵清蛋白(OVA)为抗原,各TLR配体为佐剂免疫小鼠后,流式细胞术检测引流淋巴结中DC、自然杀伤(NK)细胞比例和表型变化以及CD4^+T细胞、CD8^+T效应细胞比例的变化;ELISA检测免疫小鼠血清中抗OVA抗体IgG2a的浓度。结果在体外实验中,仅CpG-C和R848能显著增强IL-12的分泌。在体内实验中,与其他TLR配体佐剂相比,R848更有效地促进DC和NK细胞向小鼠淋巴结中聚集并诱导CD4^+和CD8^+效应T细胞生成,以及刺激产生大量抗OVA特异性IgG2a。结论与其他免疫佐剂相比,R848更具增强Th1细胞免疫作用。
- 沈沅曾梦华邱峰唐华
- 关键词：疫苗佐剂
