刘学
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：江苏大学食品与生物工程学院更多>>
- 发文基金：江苏省博士后科研资助计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 一种构建新型T载体的简便方法及应用被引量：4
- 2011年
- T载体能够用于PCR产物的快速克隆且易于操作。以常用的克隆载体pGEM-3zf(+)为出发材料,将其进行改造为通用的T载体。通过一步反向PCR方法在该载体中插入带有Xcm I酶切位点的一段序列,在Xcm I酶的切割下产生两端含有T核苷酸的线型核苷酸序列,最终获得用于克隆PCR产物的T载体。外源基因xdh克隆试验表明该载体构建成功,此载体完全可以用于PCR产物的基因克隆试验,为相关载体的改造提供了思路。
- 齐向辉陈辉沈琦何晨曦刘学郭齐陈华友徐虹
- 关键词：T载体I
- 一种带有组氨酸标签的新型表达载体的构建及应用被引量：4
- 2010年
- 目的:利用基因重组技术,对已有载体pSE380进行改造,获得具有组氨酸标签的新型表达载体。方法:以pSE380载体为出发材料,通过一步反向PCR技术在多克隆位点处添加一个六聚组氨酸纯化标签,并用该载体对xdh外源基因进行克隆表达及纯化验证。结果:测序结果显示该标签已成功插入,xdh基因克隆表达及纯化表明,镍柱亲和层析完全可以将重组的表达蛋白纯化,并达到电泳纯级别,融合标签并没有影响的该重组酶的功能。结论:通过一步反向PCR技术成功地获得了改造pSE380载体,该技术为载体的相关改造提供了一种方便可行的方法。
- 齐向辉孙储鹏何晨曦沈琦刘学郭齐陈华友徐虹
