许传武
- 作品数:6 被引量:0H指数:0
- 供职机构:潍坊医学院基础医学院山东省高校免疫学重点实验室更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 小鼠HBsAg免疫耐受模型的建立及OX40L基因转染对其耐受的影响
- 目的:构建小鼠HBsAg免疫耐受动物模型并进行初步鉴定,将OX40L转染巨噬细胞并输入模型鼠体内,观察小鼠免疫状态的变化,探讨OX40L作为协同刺激分子对免疫耐受的影响。方法:取Babl/c新生乳鼠并随机分为三组,一组注...
- 许传武冯永堂牟东珍苗乃法梁淑娟邸大琳吴国庆魏兵王丽娜
- 关键词:免疫耐受动物模型HBSAGOX40L基因转染
- 文献传递
- 小鼠OX40原核表达载体的构建及表达
- 2008年
- 目的构建小鼠OX40胞外段基因的原核表达载体并进行诱导表达。方法PCR扩增OX40胞外段基因并将其插入原核表达质粒pET32a(+),重组pET32a-OX40经测序鉴定后转入表达菌株BL21(DE3)进行融合蛋白的小量诱导表达。结果出现新增蛋白条带,融合蛋白主要存在于包涵体中;Western Blotting分析表明该融合蛋白可与相应抗体发生特异性结合。结论构建了小鼠OX40基因的原核表达载体,获得OX40胞外段融合蛋白。
- 林志娟刘艳菲冯永堂许传武杜雪梅苗乃法
- 关键词:OX40原核表达
- OX40L基因修饰小鼠腹腔巨噬细胞抗肿瘤的实验研究
- 目的:通过脂质体法将构建的OX40L真核表达载体转染小鼠腹腔巨噬细胞,观察OX40L基因修饰的巨噬细胞对小鼠体内外抗肿瘤效应的影响。研究方法:(1)无菌获取小鼠腹腔巨噬细胞,将含有绿荧光蛋白报告基因的OX40L重组质粒p...
- 史琳冯永堂许传武牟东珍苗乃法刘艳菲林志鹃邸大琳吴国庆魏兵
- 关键词:巨噬细胞OX40LH22转染肿瘤
- 文献传递
- mOX40-hIgG1Fc真核表达载体的构建
- 2008年
- 目的构建mOX40-hIgG1Fc的真核表达载体。方法从正常人外周血单个核细胞中提取总RNA,应用RT-PCR法扩增获得hIgG1Fc段基因,将其插入pcDNA3.1,构建pcDNA3.1-hIgG1Fc重组质粒。进而从本室保存的pIRES2-EGFP-mOX40重组质粒中PCR扩增mOX40胞外段,再利用pcDNA3.1-hIgG1Fc重组载体构建pcDNA3.1-mOX40-hIgG1Fc真核表达载体,并经PCR、限制性酶谱分析和测序分析进行证实。结果构建的pcDNA3.1-mOX40-hIgG1Fc真核表达载体,经PCR、限制性酶谱分析和测序分析,证实获得的hIgG1Fc段及mOX40胞外段基因均与国际生物信息资源库GenBank登录的相应基因序列完全一致。结论成功构建pcD-NA3.1-mOX40-hIgG1Fc真核表达载体,为OX40分子的进一步研究奠定良好的基础。
- 刘艳菲冯永堂林志娟许传武史琳苗乃法
- 关键词:OX40FC真核表达
- CD_(226)与临床相关疾病
- 2005年
- 许传武冯永堂
- 关键词:CD226PTA1血小扳肾综合症出血热肌炎
- mOX40-Ig的表达及其生物学活性的初步研究
- 2008年
- 目的:构建pcDNA3.1-mOX40-Ig真核表达载体,转染CHO细胞进行稳定表达,获得有生物学活性的mOX40-Ig融合蛋白。方法:RT-PCR法扩增获得hIgG1Fc段基因,构建pcDNA3.1-hIgG1Fc重组质粒并经测序证实。从本室保存的pIRES2-EGFP-mOX40重组质粒中PCR扩增mOX40胞外段,将其插入pcDNA3.1-hIgG1Fc重组质粒中构建pcDNA3.1-mOX40-Ig真核表达载体。脂质体法转染CHO细胞获得稳定表达,用RT-PCR与ELISA法检测其表达,蛋白A亲和纯化后,SDS-PAGE进行鉴定。3H-TdR掺入法研究OX40信号对B细胞的体外促增殖作用。结果:测序证实hIgG1Fc段、mOX40胞外段及mOX40-Ig基因序列正确,RT-PCR与ELISA证实mOX40-Ig的表达,SDS-PAGE证实其为mOX40-Ig融合蛋白,3H-TdR掺入法显示mOX40-Ig在体外能有效地促进B细胞增殖。结论:成功地构建pcDNA3.1-mOX40-Ig真核表达载体,并获得有生物学活性的mOX40-Ig融合蛋白的稳定表达,为进一步开展OX40相关领域的横向应用研究奠定了基础。
- 刘艳菲林志娟冯永堂许传武史琳苗乃法
- 关键词:OX40CHO细胞真核表达