本文利用DA201-C大孔树脂对鳕鱼肉碱性蛋白酶酶解液进行脱盐后,用SP Sephadex C-25阳离子交换层析和反相高效液相色谱等方法对鳕鱼肉酶解液进行分离纯化,最终得到了浓度较高的两种苦味肽。将得到的苦味肽采用液相色谱-飞行时间串联质谱(LC-TOF-MS/MS)技术对多肽结构进行鉴定,确定其氨基酸序列分别为:HWPWMK(His-Trp-Pro-Trp-Met-Lys)和AVVLII(Ala-ValVal-Leu-Ile-Ile)。同时本文采用感官评定与多肽Q值相结合的方法对苦味进行评价,通过氨基酸分析仪对苦味样品进行氨基酸组成的测定,得出具有苦味的C7和S9组分的Q值分别为6.03 k J/mol和6.79 k J/mol,通过感官评定得出其苦味强度为:9±0.8和8.2±1.6。鉴定得到的苦味肽S9purity和S10purity的Q值分别为:8.85 k J/mol和8.53 k J/mol,苦味强度为:9.4±0.8和8.9±0.9。本文从鳕鱼肉酶解液中分离纯化得到的苦味肽为苦味肽家族增添了新成员,为下一步的研究提供了原料和实验基础。
