朱国方
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：大连大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：大连市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 2-脱氧-D-葡萄糖联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:研究2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)与顺铂(Cisplatin,Cis-DDP)单独及联合对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响。方法:培养Hela细胞,2-DG、Cis-DDP单独及联合作用于Hela细胞,MTT法检测细胞的存活率;流式细胞仪检测各组药物处理后Hela细胞的凋亡率;ATP实验检测各处理组ATP生成情况;Western blot测定AKT、Caspase-3、PARP-1、MCL-1蛋白表达水平。结果:2-DG、Cis-DDP单独及联合作用Hela细胞均可降低细胞活性,呈时间剂量依赖性,联合用药组与其他各组存活率之间具有显著差异(P<0.05);用药组比对照组细胞ATP生成量降低但24h差异无统计学意义,48h联合用药组ATP生成量明显低于其他各组,且差异具有统计学意义(P<0.05);用药组细胞凋亡率均大于对照组,联合用药组凋亡率大于单药组,且具有明显差异(P<0.05);Western blot显示,联合用药可明显降低AKT、PARP-1、MCL-1蛋白的表达量,并使PARP-1、Caspase-3蛋白分解。结论:2-DG、Cis-DDP可有效抑制肿瘤细胞增殖,诱导其凋亡,2-DG联合Cis-DDP抗肿瘤作用明显增强。
- 朱国方王若雨李红霞孙英明秦建中刘庆平
- 关键词：顺铂HELA细胞凋亡
- 2-脱氧葡萄糖增强顺铂对人黑色素瘤细胞杀伤作用及其机制
- 2016年
- 目的：探讨2-脱氧葡萄糖（2-deoxy-glucose,2-DG）和顺铂（cisplatin）药物组合对人黑色素瘤细胞凋亡的影响及其作用机制。方法：用MTT法检测细胞活力,Annexin-V/PI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡。Western blotting检测相关蛋白表达。细胞内ATP含量用生物发光试剂盒检测。结果：不同浓度顺铂（5-25μmol/L）单药处理虽然能以剂量和时间依赖方式抑制A375细胞活力,但与2-DG（10 mmol/L）联合使用,顺铂处理浓度除5μmol/L外都显示增强对细胞活力的抑制作用。2-DG（10 mmol/L）单独处理并不诱导A375细胞出现明显死亡（〈10%）,顺铂（20μmol/L）单独作用导致50%左右的细胞死亡,而两者联合则导致大于80%的细胞死亡,与单独用药组比较差异显著（P〈0.01）。顺铂单药或与2-DG联合均诱导Caspase-3和PARP-1裂解,并抑制抗凋亡蛋白Mcl-1的表达。2-DG联合顺铂（20μmol/L）能明显抑制Ⅱ型己糖激酶表达,并且使细胞内ATP含量降低于对照组（6.3 vs 33.0μmol/mg）,与单药组比较差异显著（P〈0.01）。2-DG联合顺铂不诱导正常人黑色素细胞凋亡。此外该药物联合对另外三种人黑色素瘤细胞（SK-100,C8161和Mum-2C）也有增强杀伤的作用。结论：2-DG能特异地增强顺铂诱导人黑色素瘤细胞凋亡的敏感性,作用机制可能与下调抗凋亡蛋白Mcl-1表达,抑制肿瘤己糖激酶水平和ATP合成有关。
- 李红霞朱国方谢敏路遥薄俊霞刘庆平王若雨秦建中
- 关键词：黑色素瘤2-脱氧葡萄糖顺铂细胞凋亡三磷酸腺苷
- 二甲双胍调控AKT/MDR-1增强人结肠癌细胞HT-29对5-FU药物敏感性机制探讨被引量：4
- 2015年
- 目的:探究二甲双胍增强化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)对人结肠癌细胞株HT-29细胞毒的相关机制。方法:体外培养人结肠癌细胞株HT-29,以5-FU联合或不联合二甲双胍干预细胞,MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡;Lipofectmin 2000转染AKT质粒;RT-PCR法检测AKT、MDR-1核酸表达;Western Blot法检测AKT、p-AKT、MDR-1蛋白表达。结果:二甲双胍能够增强5-FU对HT-29细胞增殖的抑制作用,单用5-FU与5-FU联合二甲双胍干预的细胞早期及晚期凋亡率分别为(50.12±5.96)%和(78.00±3.39)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。二甲双胍可以在核酸及蛋白的水平上下调AKT、pAKT及MDR-1水平;过表达AKT单独5-FU处理较空白质粒组凋亡率降低(19.72±2.23)%,过表达联合用药组凋亡率较空白质粒组降低(20.30±3.15)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:二甲双胍通过调节AKT/MDR-1增强人结肠癌细胞HT-29对5-FU的药物敏感性。
- 孙英明谢敏孙丽娟朱国方王若雨刘庆平秦建中
- 关键词：结直肠癌二甲双胍AKTMDR-1
