张东明
- 作品数:8 被引量:18H指数:2
- 供职机构:河北医科大学更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划河北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- BMP7和罗格列酮诱导脂肪源干细胞分化为棕色脂肪细胞的比较研究
- 哺乳动物体内有两种脂肪组织,白色脂肪和棕色脂肪.白色脂肪以储存能量为主,棕色脂肪则以消耗能量产热,维持体温恒定.棕色脂肪细胞富含大量线粒体和解偶联蛋白1(UCP1),线粒体产生大量的ATP,通过UCP1的解偶联作用,转换...
- 郑龙刘健敏王俊霞张东明徐明志徐增年刘树锋
- 关键词:BMP7罗格列酮分化
- 无内毒素污染的基因工程鼠源SINE RNA的制备被引量:1
- 2020年
- 目的研究从大肠埃希菌宿主提取基因工程RNA同时去除内毒素的条件。方法将串联的小鼠短散布核元件(short interspersed nuclear elements,SINE)B1插入pET-28a(pET)构建pET-B1×16反序质粒(pET-B1as),转化大肠埃希菌BL21(DE3),获得pET-B1as-DE3菌。用TRlzol法、SDS-热酚法、SDS-NaCl离心法和SDS-NaCl过滤法从p ET-B1as-DE3菌制备基因工程RNA,Triton X-114相分离法进一步去除内毒素,检测制备的RNA中内毒素含量及RNA产量、纯度、完整性,并进行小鼠体内毒性试验和家兔热源试验。结果TRlzol法制备的RNA产量低;SDS-热酚法制备的RNA中内毒素含量高;SDS-NaCl过滤法去除内毒素的效果优于SDS-NaCl离心法,同时具有较高的RNA产量及较好的RNA完整性。小鼠静脉注射用SDS-热酚法和SDS-NaCl过滤法制备的RNA,前者引起小鼠不良反应,后者未引起小鼠不良反应。用Triton X-114相分离能进一步去除由SDS-NaCl过滤法制备的RNA中的内毒素,家兔热源试验证明SDS-NaCl过滤法联合Triton X-114相分离法制备的RNA,其热原符合动物体内试验要求。结论建立了用SDS-NaCl过滤法联合Triton X-114相分离法制备基因工程RNA的方法,可有效去除RNA中污染的内毒素。
- 杨爽爽曹洪益闫丽芳KHAN Murad吉宁刘鑫宋志学张东明王秀芳吕占军
- 关键词:反义RNA内毒素
- 罗格列酮诱导大鼠脂肪干细胞分化成棕色样脂肪细胞的研究
- 目的 探讨罗格列酮对大鼠不同部位脂肪组织中脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)诱导分化成棕色样脂肪细胞的影响.方法 分离大鼠背部肩胛间区棕色脂肪组织(iBAT)、双侧下肢腹股沟皮下白色脂肪组织(sWAT)和附睾白色脂肪组织...
- 郑龙刘健敏张东明王俊霞范晓飞刘树锋
- 关键词:罗格列酮
- HFJ大鼠与Wistar大鼠用于动脉粥样硬化造模的比较研究被引量:6
- 2013年
- 目的通过高脂喂养和免疫损伤结合的方法,建立HFJ近交系大鼠和Wistar封闭群大鼠动脉粥样硬化动物模型并进行比较分析。方法选择HFJ近交系和Wistar封闭群大鼠,分别随机分为模型组和正常组,正常组给予基础饲料饲喂,模型组给予高脂饲料饲喂,并采用牛血清白蛋白(40mg/kg)和卵清白蛋白(2.5mg/kg)进行免疫损伤,并辅以维生素D3(25万U/kg)灌胃,饲养90d后测定血脂水平、血液生化指标、观察病理变化和血管内皮生长因子(VEGF)免疫组化情况。结果 (1)HFJ和Wistar大鼠正常组相比较,前者TG、TC和LDL-C水平高于后者(P<0.05),HFJ大鼠模型组LDL-C含量明显高于Wistar大鼠(P<0.05);(2)心肌损伤指标,HFJ和Wistar大鼠模型组均较正常组心肌激酶(CK)、心肌激酶同工酶(CK-Mb)明显升高;(3)HE染色发现与Wistar大鼠模型组相比,HFJ近交系大鼠斑块形成更为明显,明显处于动脉粥样硬化病理Ⅲ期,可见纤维帽形成,纤维帽下具有典型的胆固醇结晶裂隙和泡沫细胞,中层平滑肌排列紊乱;(4)免疫组化法测定主动脉弓VEGF蛋白的表达,HFJ大鼠模型组较Wistar大鼠表达升高(P<0.05)。结论成功建立了HFJ大鼠动脉粥样硬化疾病动物模型,与Wistar大鼠相比HFJ大鼠模型特点更为显著,可为动脉粥样硬化研究提供一新的实验动物品系。
- 连伟光郑龙尤红煜刘健敏张东明刘福英王俊霞
- 关键词:动脉粥样硬化动物模型免疫损伤
- 罗格列酮诱导大鼠脂肪间充质干细胞分化成棕色样脂肪细胞的研究
- 目的探讨罗格列酮对大鼠不同部位脂肪组织中脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)诱导分化成棕色样脂肪细胞的影响。方法分离大鼠背部肩胛间区棕色脂肪组织(iBAT)、双侧下肢腹股沟皮下白色脂肪组织(sWAT)和附睾白色脂肪组织(e...
- 郑龙刘健敏张东明王俊霞范晓飞刘树锋
- 关键词:罗格列酮
- 金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌多重PCR方法的建立与初步应用被引量:11
- 2017年
- 目的建立金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺炎克雷伯杆菌多重PCR检测方法,为实验动物细菌检测提供快速、灵敏、简便的方法。方法根据金黄色葡萄球菌nuc基因、绿脓杆菌Las I基因、肺炎克雷伯杆菌Pho E基因和细菌通用16S rRNA基因设计出特异性引物;经过多重PCR引物浓度和退火温度的优化,特异性和敏感性的检测,建立多重PCR体系。应用该PCR体系对人工感染标本、实验动物粪便样本进行验证检测,与传统检测方法对比。结果多重PCR分别扩增出金黄色葡萄球菌(153 bp)、绿脓杆菌(600 bp)、肺炎克雷伯杆菌(368 bp)和通用(520 bp)的目的条带。多重敏感性为10 pg,特异性检测未从其他细菌中检测出目的条带。应用建立的多重PCR体系检测出不同组合的人工感染标本,从76只粪便检测出绿脓杆菌阳性1例,与传统检测方法结果一致。结论本文建立的多重PCR方法具有特异、灵敏、简便、快速等优点,为实验动物微生物的快速检测提供了可靠的方法。
- 祝岩波郑龙尤红煜王璇梁晓亮刘健敏张东明连伟光栗彦宁王俊霞
- 关键词:金黄色葡萄球菌绿脓杆菌肺炎克雷伯杆菌多重PCR
- 罗格列酮诱导大鼠脂肪间充质干细胞分化成棕色样脂肪细胞的研究
- 目的 探讨罗格列酮对大鼠不同部位脂肪组织中脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)诱导分化成棕色样脂肪细胞的影响.方法 分离大鼠背部肩胛间区棕色脂肪组织(iBAT)、双侧下肢腹股沟皮下白色脂肪组织(sWAT)和附睾白色脂肪组织...
- 郑龙刘健敏张东明王俊霞范晓飞刘树锋
- 关键词:罗格列酮
- 一种同时检测多种病原体的五重PCR检测方法
- 本发明公开了一种同时检测多种病原体的五重PCR检测方法。首先筛选出具有金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、多杀巴氏杆菌、支气管败血性波氏杆菌和肺支原体的保守性序列的基因,作为PCR检测的靶点,分别合成扩增对应保守序列的特异性引物,...
- 王俊霞郑龙祝岩波尤红煜连伟光刘健敏张东明
- 文献传递