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刘苏君

作品数：5 被引量：6H指数：2
供职机构：温州科技职业学院更多>>
发文基金：浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 5篇病毒
  • 4篇原核表达
  • 3篇猪流行性腹泻
  • 3篇猪流行性腹泻...
  • 3篇流行性
  • 3篇流行性腹泻
  • 3篇流行性腹泻病
  • 3篇流行性腹泻病...
  • 3篇腹泻
  • 3篇腹泻病
  • 3篇腹泻病毒
  • 2篇蛋白
  • 2篇疫病
  • 2篇原核
  • 2篇新城疫
  • 2篇新城疫病
  • 2篇新城疫病毒
  • 2篇核表达
  • 2篇N蛋白
  • 2篇N基因

机构

  • 5篇温州科技职业...

作者

  • 5篇涂宜强
  • 5篇白宇
  • 5篇刘苏君
  • 4篇高永安
  • 4篇荀飞琼
  • 3篇金俊杰

传媒

  • 1篇黑龙江畜牧兽...
  • 1篇畜牧与兽医
  • 1篇浙江农业学报
  • 1篇浙江畜牧兽医
  • 1篇温州农业科技

年份

  • 3篇2015
  • 2篇2014
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
猪流行性腹泻病毒浙江分离株(ZJ-WZ)的N蛋白原核表达
2015年
以猪流行性腹泻病毒(PEDV)标准株CV777为参考毒株设计特异性引物,利用RT-PCR从PEDV浙江流行毒株ZJ-WZ中扩增出核衣壳蛋白(N)基因。将其克隆至p BluscriptⅡKS(+/-)多克隆位点区,经过PCR检测、EcoR I单酶切以及测序鉴定,结果表明成功克隆获得N基因。将N基因亚克隆到原核表达载体p ET-30a(+)中,构建重组表达质粒p ET-30a-PEDV-N,经IPTG诱导、SDS-PAGE和Western blot分析表明,N蛋白获得高效表达。本试验为深入研究PEDV的N蛋白免疫学特性及功能奠定了基础。
张陈量涂宜强高永安刘苏君刘滔涛荀飞琼白宇
关键词：猪流行性腹泻病毒N基因原核表达
新城疫病毒NP基因的克隆与原核表达研究被引量：1
2014年
参照GenBank新城疫病毒(NDV)LaSota株NP基因序列,设计并合成1对特异性引物。提取NDV LaSota株基因组RNA,利用RT-PCR方法扩增出NP基因片段,将其克隆至pBluscriptⅡKS(+/-)多克隆位点,经PCR检测、酶切及测序检测,结果表明成功克隆获得NP基因。再将NP基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-NDV-NP。经酶切、PCR鉴定后的阳性重组质粒转化感受态BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE分析结果表明,获得该蛋白的高效表达,主要以可溶性形式存在。Western-blot分析表明重组蛋白具有良好的反应原性。
刘苏君高永安张陈量金俊杰涂宜强荀飞琼白宇
关键词：NP基因原核表达新城疫病毒
抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：3
2015年
为了制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白的单克隆抗体(Mab),以原核表达的融合蛋白GST-N为免疫原,免疫7周龄雌性BALB/c小鼠,利用重组蛋白His-N和Vero细胞培养病毒液作为检测筛选抗原,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。结果表明:获得3株稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株(5B2,3H1和4H5),单抗亚型鉴定均为Ig G1,轻链均为Kappa链。Western blot和间接免疫荧光试验结果表明,Mab能够识别重组N蛋白和PEDV。制备获得3株稳定性好、特异性强的Mab,可为今后建立检测猪流行性腹泻特异性诊断方法和研究PEDV核衣壳蛋白功能奠定基础。
刘苏君段松焕胡景炎金俊杰涂宜强白宇
关键词：猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体
新城疫病毒HN基因的克隆及原核表达被引量：2
2015年
为了获得新城疫病毒(NDV)HN基因和重组表达蛋白,试验采用基因克隆和原核表达的方法,以NDV La Sota毒株为参考毒株设计特异性引物,利用RT-PCR技术从NDV La Sota毒株中扩增出去信号肽和跨膜区的HN基因(大小为1 593 bp),将其克隆至p BluscriptⅡKS(+/-)多克隆位点,再将HN基因亚克隆到原核表达载体p ET-28a中,构建重组表达质粒p ET-28a-NDV-HN,并用IPTG诱导表达,最后进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明:重组蛋白获得高效表达,且具有良好的免疫反应性。
刘滔涛高永安刘苏君金俊杰涂宜强荀飞琼白宇
关键词：HN基因原核表达重组蛋白
猪流行性腹泻浙江流行毒株（ZJ-WZ）N基因的克隆及蛋白的原核表达
2014年
为了深入研究猪流行性腹泻病毒（PEDV）N蛋白的免疫学特性、结构与功能，本试验以PEDV标准株CV777为参考毒株设计特异性引物，利用反转录聚合酶链式反应RT—PCRZXPEDV浙江流行毒株（ZI—WZ）中扩增出核衣壳蛋白N基因。将其克隆至克隆载体质粒pBluscriptⅡKs（＋／一）多克隆位点区，经过PCR检测、EcoRI单酶切以及测序鉴定，结果表明成功克隆获得N基因。再将N基因亚克隆到原核表达栽43gpET-30a（＋）中，构建重组表达质粒pET-30a—PEDV—N，并在37qC的条件下经IPTG诱导表达，通过SDS—PAGE分析结果表明，获得了该蛋白的高效表达。免疫印迹反应Westem—blot分析结果表明重组蛋白具有良好的免疫反应性。
张陈量涂宜强高永安刘苏君刘滔涛荀飞琼白宇
关键词：猪流行性腹泻病毒N基因原核表达
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