陈稳
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 共生菌对小鼠肺泡巨噬细胞长链非编码RNA表达的调控作用被引量：1
- 2020年
- 目的探讨共生菌群对小鼠肺泡巨噬细胞长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)表达的调控作用。方法分离纯化共生菌缺失小鼠及正常小鼠肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages,AMs),利用LncRNA芯片技术筛选差异表达的LncRNA并进行生物信息学分析,利用荧光原位杂交(FISH)、RNA干扰等技术检测LncRNA-30162的亚细胞定位及其对RAW264.7细胞基因表达的调控。结果分选后的AMs纯度大于95%,共生菌缺失小鼠与正常小鼠相比较,其差异表达LncRNA共有634个(变化倍数≥2),上调363个(57.26%)、下调271个(42.74%);差异LncRNA的靶基因与免疫系统调控、细胞分化、趋化作用等密切相关;干扰LncRNA-30162的表达可以降低RAW264.7细胞中CCL24及Arg1的表达水平,干扰前CCL24及Arg1的表达水平分别为(420.23±56.25)μg/L、(2.63±0.31)×103U/L,与干扰后表达水平(218.70±31.45)μg/L、(1.24±0.21)×103U/L比较差异有统计学意义(t=5.416、6.409,P=0.006、0.003)。结论共生菌可以调控小鼠AMs LncRNA的表达,差异表达的LncRNA与多个基因功能分析分类和基因信号通路密切相关,LncRNA-30162可以调控RAW264.7细胞CCL24、Arg1的表达。
- 母英杰陈稳胡世莲程民
- 关键词：共生菌RNA
- 细胞因子诱导的杀伤细胞基本特性及抗肿瘤效应研究被引量：1
- 2014年
- 目的建立培养细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞方法,并评价其基本特点、体内外抗肿瘤活性及安全性。方法使用抗CD3单克隆抗体、rhIL-2及rhIFN-γ刺激PBMC细胞,使其在体外大量扩增,利用流式细胞术、体外杀伤实验及荷人卵巢癌小鼠模型检测CIK细胞的特点及抗肿瘤活性;并检测CIK细胞中外源性因子污染情况及其急性毒性作用。结果体外培养21 d后,CIK细胞总数可达1010以上,其主要成分为CD3+CD8+T细胞及CD3+CD56+NKT细胞,CIK细胞在体外对Ho8910、A549、K562及HepG2细胞均有较高的杀伤活性,并对荷瘤小鼠具有治疗作用。同时在CIK细胞中未检测到外源性病原体污染。结论 CIK细胞在体内外均具有较高的抗肿瘤活性且无毒性作用。
- 程民陈稳毛菊王静程翠沈国栋卞庚徐婷娟徐维平沈干胡世莲
- 关键词：免疫疗法细胞培养技术细胞因子诱导杀伤细胞卵巢肿瘤
- γδT细胞体外扩增方法的建立及其抗肿瘤活性被引量：2
- 2018年
- 目的探讨建立体外培养18T细胞的方法及其体内外抗肿瘤活性及安全性。方法应用植物血凝素、唑来膦酸、白细胞介素2（IL-2）和IL-7等刺激外周血单个核细胞，在体外进行大量扩增。采用流式细胞术、体外杀伤实验和荷人肺癌小鼠模型检测18T细胞的特点和抗肿瘤活性，采用病毒检测试剂盒检测^y6T细胞中外源性因子的污染情况。结果体外培养14-16d后，16T细胞扩增总数〉1．0×10^10个，其中CD3＋γδTCR＋细胞所占比例〉90％，无细菌、真菌、支原体和病毒因子等污染。体外扩增后的18T细胞对肺鳞癌细胞SK-MES．1、卵巢癌细胞H08910、肺腺癌细胞A549和慢性髓原白血病细胞K562均具有较强的细胞毒性，杀伤效率均〉65％（效靶比为50：1）。实验组和对照组小鼠的肿瘤体积分别为（828．99±61．05）mm^3和（1723．51±84．30）mm^3，差异有统计学意义（P〈0．05）。输注18T细胞的小鼠无急性不良反应。结论培养的γδT细胞具有足够的数量、高纯度、较强的活性、良好的体内外抗肿瘤活性及安全性，对肺癌、卵巢癌和白血病肿瘤细胞具有杀伤活性。
- 谢蕾陈稳王亮程民胡世莲沈干
- 关键词：肺肿瘤肿瘤免疫治疗ΓΔT细胞抗瘤活性
