陈延飞
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 供职机构:中国农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 鸡传染性贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
- 引言鸡传染性贫血病(chicken infectious anemia,CIA)是由鸡传染性贫血病毒(CIAV)引起的鸡的免疫抑制性疾病。VP2是CIAV的非结构蛋白,含有CIAV中和抗原表位[1],还与病毒复制、组装以...
- 陈延飞覃尧李夏莹王永强李晓齐曹红郑世军
- 鸡传染性贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量:2
- 2015年
- 为制备CIAV VP2单克隆抗体,将原核表达的His-VP2融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠。经4次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合。将原核表达的GST-VP2融合蛋白作为包被抗原,利用间接ELISA筛选阳性克隆。阳性细胞株经3次亚克隆后,获得3株稳定分泌抗CIAV VP2蛋白的杂交瘤细胞克隆,分别命名为3D7、3B8、2D3。经间接ELISA测定,以上3株杂交瘤细胞腹水效价分别为1:8.0×10~5、1:4.0×10~5,以及1:6.4×10~6,亲和力解离常数分别为7.34×10^(-11)、2.65×10^(-11),以及2.98×10^(-11)。IgG亚类分别为IgG1、IgG2b以及IgG2b。经Western Blot试验证明,3D7株单抗能特异地识别CIAV VP2蛋白,其识别的抗原表位区域为VP2 N-端的20~40 aa。经IFA试验证明,3株单抗均能识别天然的CIAVVP2蛋白。此单抗为研究CIAVVP2的生物学功能和CIAV致病机理奠定基础。
- 陈延飞覃尧李夏莹王永强李晓齐曹红郑世军
- 关键词:鸡传染性贫血病毒VP2蛋白原核表达单克隆抗体