秋雯
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 抗菌肽CM4与绿色荧光蛋白融合基因的真核载体构建及表达被引量：3
- 2008年
- 目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)与抗菌肽CM4融合基因的真核表达载体。方法:采用递归PCR(rPCR)将GFP基因与CM4基因通过一段核苷酸片段连接成GFP-CM4融合基因,构建真核表达载体pcDNA3-GFP-CM4,用脂质体介导转染人K562白血病细胞,用MTT检测其活性。结果:融合基因可在K562细胞中表达,抗菌肽CM4的表达可抑制K562细胞的生长。结论:为全面了解抗菌肽的生物学活性及其在基因治疗中的可能作用提供了重要的理论依据。
- 陈玉清张双全焦波秋雯张杰
- 关键词：抗菌肽CM4绿色荧光蛋白真核表达K562细胞
- 抗菌抗癌肽CM4N在大肠杆菌中的融合表达与活性鉴定被引量：3
- 2008年
- 为探讨内含肽intein在抗菌肽表达与纯化中的应用,采用递归PCR法合成CM4末端添加Asn的基因CM4N,克隆至E.coli表达载体pTYB11中,构建了与intein的C端融合的表达载体pTYB11-CM4N。重组质粒转化至E.coliBL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,融合蛋白intein-CM4N主要以可溶形式存在于胞内。利用载体中intein中的chitin结合域,将融合蛋白通过chitin亲和层析一步纯化,经DTT诱导intein的自我切割活性,实现CM4N在亲和柱上的切割与分离,透析冻干后得到了纯度95%以上的重组CM4N。活性检测结果显示,重组CM4N具有抗大肠杆菌、沙门氏菌和K562肿瘤细胞的活性。研究认为,内含肽在抗菌肽的基因工程中可能具有重要的应用前景。
- 陈玉清秋雯焦波张杰张双全
- 关键词：抗菌肽CM4原核表达活性
