田明芳
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：华中农业大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪Prox1基因的染色体定位和亚细胞定位的研究被引量：3
- 2013年
- 在克隆猪Prox1基因(sProx1)的基础上,对猪Prox1基因进行染色体定位分析,并通过EGFP融合蛋白对该基因产物进行亚细胞水平定位。本研究将人和鼠的Prox1基因编码区在猪的ESTs数据库中进行检索,然后根据EST进行序列拼接并设计引物对猪Prox1基因编码区进行克隆。通过比对人、鼠及其他物种Prox1基因第二个内含子序列,设计引物扩增猪Prox1基因部分内含子,根据克隆得到的部分内含子序列设计引物,利用猪-仓鼠体细胞辐射杂种板(IMpRH)对猪Prox1基因进行染色体定位。根据已获得的猪Prox1基因编码区序列,构建猪Prox1基因的融合绿色荧光超表达载体EGFP-Prox1,并转染猪肾PK15细胞,12h后倒置荧光显微镜观察Prox1蛋白在亚细胞内的定位。结果表明:Prox1基因定位于猪第9号染色体长臂的26区,与标记SW1651紧密连锁;构建猪Prox1基因的真核表达载体pEGFP-N1-Prox1,融合蛋白EGFP-Prox1定位于PK15细胞的细胞核中。
- 袁继红龙欢田明芳杨在清
- 关键词：染色体定位亚细胞定位
