王雅冰
- 作品数：7 被引量：36H指数：2
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- LincRNA-EPS对脂多糖诱导的小鼠牙周膜细胞炎症因子表达的影响被引量：4
- 2021年
- 目的:探究基因间区长链非编码RNA-EPS(long intergenic noncoding RNA,lincRNA-EPS)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的小鼠牙周膜细胞(mouse periodontal ligament cells,mPDLCs)炎症因子表达的影响。方法:使用CRISPR/Cas9技术构建lincRNA-EPS基因敲除的C57BL/6J小鼠。分离培养野生型及lincRNA-EPS基因敲除型mPDLCs,并进行免疫荧光鉴定。制备纳米粒材料,搭载lincRNA-EPS过表达质粒,并测定转染效率。设立5个实验组:野生型对照组(WT组)、野生型刺激组(WT+LPS组)、敲除型对照组(KO组)、敲除型刺激组(KO+LPS组)和挽救实验组(KO+LPS+lincRNA-EPS组)。在WT+LPS组、KO+LPS组及KO+LPS+lincRNA-EPS组中添加100 ng/mL的LPS,刺激6 h,其中,在KO+LPS+lincRNA-EPS组中提前加入lincRNA-EPS过表达质粒进行转染。WT组及KO组不做处理。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测各实验组炎症因子cxcl10、cxcl12、cxcl14、IL-1α、IL-6 mRNA的表达量。应用酶联免疫吸附测定技术(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组炎症因子cxcl10、IL-1α、IL-6的蛋白水平。结果:成功构建了lincRNA-EPS基因敲除的C57BL/6J小鼠模型;搭载lincRNA-EPS过表达质粒的纳米粒成功转染了mPDLCs,转染效率接近20%;在无LPS刺激的状态下,KO组的炎症因子表达水平较低,且与WT组无差异(P>0.05),lincRNA-EPS基因的缺失不会导致mPDLCs炎症因子基础表达量的改变;LPS刺激6 h后,KO+LPS组和WT+LPS组相较于各自的对照组,各个炎症因子的表达均上调(P<0.05),且KO+LPS组相较于WT+LPS组,各炎症因子表达上调更为显著(P<0.05),说明lincRNA-EPS缺失的mPDLCs受到LPS刺激时,更易引发强烈的炎症因子表达;KO+LPS+lincRNA-EPS组相较于KO+LPS组,炎症因子的表达量下调(P<0.05),可见外源性lincRNA-EPS的转入在一定程度上抑制了炎症因子的表达。结论:lincRNA-EPS对LPS诱导的mPDLCs炎症因子表达起负向调控作用。
- 叶远舟刘凯王雅冰苏俭生
- 关键词：脂多糖
- 载药纳米粒明胶纤维缓释支架对牙周膜细胞MMPs的影响被引量：1
- 2016年
- 目的 :研究载免疫抑制剂SB203580的纳米粒-明胶(Ms-SB203580-gelatin)纤维缓释支架对牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,h PDLCs)的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteninases,MMPs)表达的影响。方法 :通过透析法制备载药纳米胶束(Micelles-SB203580,Ms-SB203580),并通过电纺法构建载纳米粒明胶支架,检测支架材料的细胞相容性和对牙周膜细胞MMP-2、MMP-13基因和蛋白的表达影响。结果:透射电镜显示载药纳米粒能负载于明胶纤维中;细胞与支架复合后增殖情况良好;实验组MMP-2、MMP-13的表达低于阳性对照组。结论:载药纳米粒明胶纤维缓释支架能明显地抑制炎症因子,可进一步应用于牙槽骨骨组织工程。
- 王雅冰苏俭生
- 关键词：免疫抑制剂牙周膜细胞MMPS
- 川陈皮素纳米粒对破骨细胞作用的实验研究
- 2019年
- 目的:研究载川陈皮素(nobiletin,NOB)纳米粒(Nanoparticles,NPs)对破骨细胞的作用。方法:通过透析法制备载川陈皮素纳米胶束(NOB-poly(ethylene glycol)-block-poly(e-caprolactone micelles,NOB-PEG-PCL),以包封率和粒径作为评价指标。采用Malvern粒度仪测定纳米粒的粒径分布,透射电镜考察其形态,并考察纳米粒的体外释放行为。检测空白胶束和载药胶束对破骨细胞前体巨噬细胞的生物相容性,以及对破骨细胞相关基因的表达影响。结果:川陈皮素载药纳米粒的包封率为(76.34±3.25)%,载药量为(7.60±0.48)%,粒径为124 nm,透射电镜显示纳米粒粒径均一,成球状分布,12 h累积释放为65%,实验组NOB-PEG-PCL TRAP细胞阳性细胞数以及TRAP基因显著减少(P<0.05)。结论:实验表明载川陈皮素纳米粒能明显地减少破骨细胞数量,可进一步应用于牙槽骨骨组织工程。
- 王雅冰苏俭生
- 关键词：川陈皮素纳米粒破骨细胞
- 续断皂苷Ⅵ对小鼠骨髓基质干细胞成骨分化的影响被引量：30
- 2017年
- 目的:探讨续断皂苷VI(ASA VI)对小鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用机制及对小鼠骨质疏松的防治作用。方法:采用MTT法、钙浓度检测及RT-q PCR方法评价ASA VI对BMSCs细胞活力、成骨分化及Wnt通路相关基因表达的作用;通过Micro-CT定量分析ASA VI对去卵巢(OVX)小鼠骨形态计量参数的影响。结果:适宜浓度下的ASA VI能提高BMSCs的细胞活力,促进细胞基质矿化,升高BMP-2、Runx2、β-catenin、OCN的基因表达,Wnt信号阻断剂(DKK-1)能降低这些成骨基因表达。ASA VI能增加OVX小鼠的股骨骨量,改善骨小梁微结构。结论:ASA VI促进BMSCs成骨分化,Wnt信号可参与了ASA VI诱导的成骨分化过程。
- 李家林晓晟王雅冰苏俭生
- 关键词：骨质疏松症骨髓基质干细胞成骨分化
- 载药胶束-明胶纤维缓释支架对MMPs表达的影响
- 目的:牙周炎症的发生与宿主炎症反应相关。成纤维细胞炎症信号的响应在牙槽骨吸收和骨稳态中发挥重要作用,其中成纤维细胞金属基质蛋白酶水平的变化与骨量减少密切相关。MMP-2,13在胶原基质的降解和牙槽骨吸收发挥了重要的调节作...
- 王雅冰苏俭生
- 载药胶束-明胶纤维缓释支架对MMPs表达的影响
- <正>目的:牙周炎症的发生与宿主炎症反应相关。成纤维细胞炎症信号的响应在牙槽骨吸收和骨稳态中发挥重要作用,其中成纤维细胞金属基质蛋白酶水平的变化与骨量减少密切相关。MMP-2,13在胶原基质的降解和牙槽骨吸收发挥了重要的...
- 王雅冰苏俭生
- 文献传递
- 长链非编码RNA-EPS对小鼠牙髓细胞凋亡的影响被引量：1
- 2019年
- 目的:研究长链非编码RNA-EPS(long noncoding RNA-EPS,lnc-EPS)对炎症状态下小鼠牙髓细胞凋亡的影响。方法:分离和培养小鼠牙髓细胞(mouse dental pulp cells,mDPCs),利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激情况下,lnc-EPS的表达情况。应用lnc-EPS过表达质粒和小干扰RNA(siRNA)影响lnc-EPS的表达后,采用qRT-PCR检测不同组细胞中NLRP3炎症小体(NLRP3、ASC、Caspase-1)相关基因和白介素-1β(IL-1β)的表达情况。采用Western Blot检测细胞NLRP3炎症小体蛋白的表达情况;采用免疫荧光流式细胞术检测不同组细胞的凋亡情况。结果:在LPS刺激情况下,lnc-EPS的表达明显升高(P<0.05);lnc-EPS沉默后,NLRP3炎症小体和IL-1β的mRNA水平显著升高(P<0.01);NLRP3炎症小体表达量和凋亡率均显著升高(P<0.01)。相反,lnc-EPS过表达后,NLRP3炎症小体蛋白和IL-1β的mRNA水平显著降低(P<0.01);NLRP3炎症小体蛋白表达量和凋亡率均显著降低(P<0.01)。结论:lnc-EPS可抑制小鼠牙髓细胞凋亡。
- 刘凯叶远舟王雅冰苏俭生
- 关键词：细胞凋亡
