崔映波
- 作品数:2 被引量:27H指数:2
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- 云南阿昌族G6PD基因突变G487A在DF213中的表达被引量:5
- 2007年
- 为获得阿昌族G6PDWT和G6PDG487A重组蛋白,研究G6PDG487A的结构和功能改变,从云南省德宏州梁河县杞木寨乡湾中村阿昌族聚集地的G6PD缺陷家系先证者和正常阿昌族个体全血提取RNA,经RT-巢式PCR得cDNA,将cDNA克隆至pMD18-Tsimple载体中并测序;错配碱基经定点突变修复后,目的基因亚克隆至pThioHis(A)载体,构建了阿昌族G6PD基因野生型和G487A突变型原核表达载体:pThioHis(A)-AChang-G6PDWT和pThioHis(A)-AChang-G6PDG487A。用重组质粒转化E.coli Competent Cells DF213(G6PD defeciency),经IPTG诱导G6PD表达、10%SDS-PAGE电泳检测表达蛋白和紫外340nm定量测定G6PD活性的分析表明,pThioHis(A)-AChang-G6PDWT和pThioHis(A)-AChang-G6PDG487A在DF213中成功表达,分子量约为59kDa。IPTG诱导0、3、6、9、和12h后,G6PD活性逐渐增高,G6PD基因WT表达的酶活性约是G487A的20-25倍。表达载体的构建以及G6PDcDNA在DF213中成功表达,为重组酶G6PDG487A的进一步研究奠定了基础。
- 杨银峰朱月春李鸿钧李治纲吕会茹李丹怡崔映波冯维杨余果宇黄尤光
- 关键词:阿昌族葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因
- PBL教学法在硕士研究生培养中的应用被引量:22
- 2007年
- 我国正面临着研究生规模快速扩大,为更好地适应国家、社会和市场的需求,探索高素质和能力强的基础医学硕士培养途径已刻不容缓。文中讨论了PBL教学法在研究生培养中的可行性、教师如何分阶段设置问题,并动态分析了PBL过程中教师及学生的责任和义务及其角色变化。
- 朱月春况应敏崔映波杨银峰童淑芬
- 关键词:PBL研究生培养