夏斐斐
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 供职机构：吉林大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶LysK的表达及其多克隆抗体的制备被引量：4
- 2014年
- 将噬菌体与细菌孵育25min提取噬菌体感染细菌的总RNA,通过逆转录的方法获得cDNA,以此为模板进行PCR扩增得到目的片段,以pET-15b为载体构建重组质粒pET-15b-lysK并转入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达金黄色葡萄球菌噬菌体K裂解酶基因lysK,表达产物蛋白经镍柱纯化后,测定LysK的裂解活性、裂解谱,并免疫家兔制备多克隆抗体。结果表明,成功诱导表达可溶性LysK并获得重组蛋白,酶谱试验证明LysK对金黄色葡萄球菌具有裂解活性,LysK比噬菌体K裂解谱广。制备的兔多克隆抗体能够与LysK发生特异性反应且具有较高效价,为后续进行LysK体内治疗研究打下了基础。
- 李跃宫鹏娟夏斐斐宋军顾敬敏张蕾杨梅孙长江冯新韩文瑜
- 关键词：金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶多克隆抗体
