刘雪冰
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：海南大学材料与化工学院更多>>
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- 产碱假单胞菌精氨酸脱亚胺酶的纯化
- 2015年
- 提取精氨酸脱亚胺酶粗酶液,采用硫酸铵分级沉淀法初步分离精氨酸脱亚胺酶,然后通过DEAESephadex A 50柱色谱层析和Sephadex G-100柱色谱层析进一步分离纯化精氨酸脱亚胺酶,并利用SDS-PAGE电泳法来鉴定其纯度,最终达到纯化产碱假单胞菌来源的精氨酸脱亚胺酶(ADI)的目的。结果表明:分离纯化过程中,粗酶液的总酶活为424.43 U,比酶活为0.42 U·mg^(-1);盐析透析酶液的总酶活是222.10 U,比酶活为2.05 U·mg^(-1);离子交换分析活性部位的总酶活为105.83 U,比酶活是5.61 U·mg^(-1);凝胶渗透分析活性部位的总酶活为17.94 U,比酶活为11.80 U·mg^(-1)。纯化得到了电泳纯级别的ADI,其相对纯度为96%。因此,本研究方法可以得到较高纯度和酶活的精氨酸脱亚胺酶。
- 操凤刘雪冰曹献英
- 关键词：精氨酸脱亚胺酶分离纯化
- 芥子中甲代烯丙基异硫氰酸酯对k562细胞的抑制与诱导被引量：2
- 2013年
- 从海南十字花科植物芥菜种子中提取异硫氰酸酯类化学成分甲代烯丙基异硫氰酸酯(MITC),并将其作用于k562细胞,用MTT比色法测定增殖抑制效果,应用瑞式姬姆萨、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)、罗丹明123染色观察细胞形态。结果表明,MITC作用k562细胞呈现一定的量效关系,MITC体积分数为120μmol·L-1,作用时间为96 h时,抑制率达到最高,为(87.5±1.4)%。MITC作用k562细胞24,48,72,96,120 h的半数抑制体积分数(IC50)分别为250.007,100.584,39.030,54.701,88.719μmol·L-1。MITC处理的K562细胞出现凋亡形态特征:细胞皱缩,细胞核固缩,细胞核向内凹陷,线粒体电势下降。根据细胞形态变化初步判断MITC诱导k562细胞凋亡。
- 侯杰刘雪冰操凤潘彦鹏吕杨吴紫阳郑育声曹献英
- 关键词：异硫氰酸酯K562细胞细胞凋亡芥菜
- κ^-卡拉胶十一糖对小鼠巨噬细胞增殖的影响
- 2016年
- 目的:探讨κ^-卡拉胶十一糖对小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7细胞增殖活性的影响。方法:使用不同浓度的κ^-卡拉胶十一糖作用RAW264.7一段时间后,采用MTT比色法及检测LDH总量,测定细胞增殖率;通过测定LDH释放量及ATP水平,研究κ^-卡拉胶十一糖对细胞膜完整性及细胞活性的影响;绘制细胞生长曲线,观察κ^-卡拉胶十一糖对RAW264.7增殖能力的影响。结果:实验结果显示,使用100μg/m L的卡拉胶十一糖作用RAW264.7细胞24h后,细胞增殖率达到141.5%,且在此条件下,细胞膜完整性、细胞活性及细胞增殖能力的提高最为显著。但当作用时间延长为60h时,κ^-卡拉胶十一糖对细胞数量、细胞膜完整性、细胞活性及细胞增殖能力有影响。结论:在体外条件下,κ^-卡拉胶十一糖对小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7的生长具有促进作用。
- 刘雪冰曹献英
- 关键词：多糖
- 芥子中异硫氰酸酯对k562细胞增殖抑制实验研究
- 从海南十字花科植物芥菜种子中提取鉴定了四种异硫氰酸酯类化学成分：3-甲硫基苯基异硫氰酸酯、3-氰基苯基异硫氰酸酯、4-氰基苯基异硫氰酸酯、甲代烯丙基异硫氰酸酯.MTT法检测四种异硫氰酸酯化学成分对k562细胞的增殖抑制效...
- 侯杰刘雪冰操凤郑育声曹献英
- 关键词：异硫氰酸酯MTTK562细胞
- 产碱假单胞菌产精氨酸脱亚胺酶的发酵条件优化被引量：1
- 2015年
- 对产碱假单胞菌产精氨酸脱亚胺酶的发酵条件进行了优化,结果表明,产碱假单胞菌产ADI的最佳发酵条件为:10 g·L-1蔗糖为碳源,6 g·L-1蛋白胨为氮源,10 g·L-1精氨酸诱导物,4%的接种量和30%的装液量,发酵温度29℃,发酵时间24 h,摇床转速为150 r·min-1,发酵液的初始p H8.5。在此条件下,产碱假单胞菌产ADI的酶活最高。
- 操凤刘雪冰曹献英
- 关键词：精氨酸脱亚胺酶发酵酶活
