您的位置: 专家智库 > 作者详情>刘红军

刘红军

作品数:1 被引量:2H指数:1
供职机构:北京放射与辐射医学研究所更多>>
发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇质粒
  • 1篇重组质粒
  • 1篇基因
  • 1篇基因治疗

机构

  • 1篇北京放射与辐...

作者

  • 1篇张庆林
  • 1篇肖凤君
  • 1篇毕建进
  • 1篇劳妙芬
  • 1篇吴祖泽
  • 1篇刘红军
  • 1篇段海峰

传媒

  • 1篇生物技术通讯

年份

  • 1篇2006
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
重组质粒pUDKH的质量分析被引量:2
2006年
目的:分析研究pUDKH的质量。pUDKH是由本实验室构建的携带人肝细胞生长因子(HGF)基因的真核表达质粒,具有治疗肢体动脉闭塞病的应用潜能。方法:用光密度法分析pUDKH的浓度及纯度;用0.8%琼脂糖凝胶电泳分析超螺旋pUDKH比例及RNA;以地高辛标记的核酸探针固相斑点杂交法测定残留宿主DNA含量;用酶联免疫法测定残留宿主菌蛋白;以4组限制性内切酶分析一致性;PCR扩增目的基因片段;抑菌圈测定板测定残余抗生素;用鲎试剂检测细菌内毒素;对CHO细胞进行基因转染;ELISA检测上清HGF表达量;用Transwells法分析表达的上清液诱导ECV304细胞迁移数。结果:03批次pUDKH的浓度为1.97mg/mL,D260nm/D280nm值为1.84,超螺旋pUDKH比例为95.5%;电泳图谱中未见RNA;残留宿主DNA含量低于质粒DNA的0.2%;菌体蛋白质残留含量低于质粒DNA的0.1%;限制性酶切图谱与自行制备的对照品一致;PCR扩增到HGF基因片段,长约2.2kb;未见残余抗生素(卡那霉素)抑菌圈;细菌内毒素≤0.03125EU/mL;转染的CHO细胞上清HGF表达量为39.32ng/mL;表达的上清诱导ECV304细胞迁移数高于对照组2倍。结论:03批次pUDKH的质量符合药学规格。
张庆林肖凤君毕建进刘红军段海峰劳妙芬吴祖泽
关键词:重组质粒基因治疗
共1页<1>
聚类工具0