任红卫
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
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- 冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)生产毒种的筛选被引量：2
- 2017年
- 目的筛选冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)生产毒种。方法将原代地鼠肾细胞传毒种(北京固定毒7aG)和豚鼠脑传毒种(北京固定毒6aG4)平行接种于10层细胞工厂培养的原代单层地鼠肾细胞,收获病毒液,共收获8次,1、3、5、7、9号细胞工厂接种脑毒,2、4、6、8、10号细胞工厂接种细胞毒。1次收获(简称1收)培养72h,从2次收获(简称2收)开始,培养24h,收获液经超滤浓缩、柱层析纯化、除菌过滤、再浓缩配制成人用狂犬病疫苗半成品,检测各项指标,筛选最佳毒种。结果6aG4株毒种制备的病毒收获液、浓缩液、纯化液、纯化除菌过滤液、狂犬病疫苗半成品的各项检定指标都优于7aG毒种。结论豚鼠脑传毒种(6aG4)明显优于原代地鼠肾细胞传毒种(7aG),选择豚鼠脑传毒种(6aG4)作为人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)生产毒种。
- 任红卫郑学刚李守丽金学敏杨淼李国晏何彦林
- 关键词：超滤浓缩
- 应用细胞工厂建立人用狂犬病疫苗连续培养多次收获工艺被引量：8
- 2013年
- 目的为提高生产效率、增加原代地鼠肾细胞单产量及狂犬病病毒产量,建立人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)连续培养多次收获工艺。方法选用12~14日龄SPF地鼠,无菌取肾经消化,制备成细胞悬液,分装到40层细胞工厂并培养细胞成单层;接种狂犬病病毒固定毒aG株,连续培养病毒并多次收获。分别对同一细胞批制备的多个单次病毒收获液的免疫原性、病毒滴度和地鼠肾细胞蛋白质含量进行检测。结果用40层细胞工厂培养原代地鼠肾细胞和狂犬病病毒,细胞接种浓度为1.0×106~1.5×106cells/mL,(36±1)℃培养72 h成致密单层;按0.1 MOI病毒接种,可进行6次收获病毒;多个单次病毒收获液病毒滴度均不低于6.0 lgLD50/mL;免疫原性检查保护指数不低于100;地鼠肾细胞蛋白质残留量随着收获次数的增加而不断降低。结论用细胞工厂建立了人用狂犬病疫苗连续培养多次收获工艺,能显著提高地鼠肾单产量,增加产能。
- 李红芳赵祖波任红卫杨淼马超辛军龚健李守丽于滢徐枫
- 关键词：细胞工厂原代地鼠肾细胞
