魏秀英
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：黑龙江省杰出青年科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 禽网状内皮组织增生症病毒真核表达载体的构建及免疫保护研究
- 禽网状内皮增生症(Rrticuloendotheliosis,RE)是由禽网状内皮组织增生症病毒(RniculoendotheliosisVirus,REV)群引起的鸡、火鸡、鸭、鹌鹑和鹅等以淋巴-网状细胞增生为特征的肿...
- 石星明杨桂花赵妍张晶魏秀英胡顺磊王玫王云峰
- 文献传递
- 传染性喉气管炎病毒WG株糖蛋白gD基因主要抗原区的表达
- 2011年
- 为表达传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD蛋白,根据GenBank中登录的ILTV全基因组序列(EU675324)设计了1对引物,进行gD全基因的PCR扩增,产物经纯化后连接至pGEM-T Easy载体,进行序列测定,采用DNAStar软件分析gD蛋白的抗原性,选择抗原性强的第256～405aa的编码片段设计引物并进行PCR扩增,结果获得截短的gD基因,将其克隆至原核表达载体pET-32a中,并转化E.coli BL21(DE3)。经IPTG诱导后,获得大小为43.5ku的重组蛋白,命名为r-gD。Western-blot分析结果表明,r-gD具有较强的抗原性。
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- 关键词：传染性喉气管炎病毒糖蛋白D
- 禽网状内皮组织增生症病毒真核表达载体的构建及免疫保护研究
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- 禽网状内皮增生症病毒gp90基因真核表达及ELISA检测方法的建立
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- 禽网状内皮增生症病毒gp90基因真核表达及ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2010年
- 为建立禽网状内皮增生症病毒(REV)的ELISA检测方法,本研究通过RT-PCR方法扩增gp90基因,构建杆状病毒重组质粒,转化DH10Bac后,通过转座获得重组杆粒,并将其转染Sf9昆虫细胞,SDS-PAGE及western blot分析表明,表达的重组蛋白分子量约为45 ku,具有良好的反应原性。将表达的重组蛋白纯化后包被ELISA反应板,建立检测REV抗体的rgp90-ELISA方法。特异性试验结果表明该方法具有良好的特异性;将该方法与IDEXX公司生产的试剂盒共同检测包括63份已知背景的血清在内的黑龙江省和广东省的临床血清样品共477份,符合率分别为90.5%和86.4%。该方法的建立为禽群REV抗体的监测提供了方便、快捷、准确的技术手段。
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- 关键词：禽网状内皮组织增生症病毒GP90基因真核表达
- 禽网状内皮增生症病毒gp90蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：4
- 2011年
- 为获得分泌抗禽网状内皮增生症病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞,通过表达pET32a-gp90重组蛋白,以纯化的gp90蛋白为抗原,免疫BALB/c鼠,筛选分泌抗REV McAb的杂交瘤细胞株。经过细胞的融合及筛选,共获得能稳定分泌抗REV gp90的McAb细胞系2株,分别命名为A9E8和B3F8。2株细胞培养上清的效价均在1∶4×102以上,腹水效价均在1∶8×103以上。亚型鉴定结果表明,2株皆为IgG型,轻链均为κ链;Western blot及间接免疫荧光结果显示,这2株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体均能识别REV全病毒抗原,与其发生特异性反应,并且不与禽类其他病毒发生反应;病毒中和试验结果表明,获得的单克隆抗体均能REV临床分离株发生中和反应,具有较好的中和活性。利用制备的单克隆抗体建立了REV的间接免疫荧光检测方法,临床病料检测结果表明,该方法与病毒分离及PCR的检测结果基本一致,阴、阳性符合率分别为100%和90%。作者制备了针对REV gp90的McAb,为REV的快速诊断及抗原表位分析与鉴定等奠定了基础。
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- 关键词：GP90基因单克隆抗体
- 禽网状内皮增生症病毒gp90基因真核表达及ELISA检测方法的建立
- 禽网状内皮增生症(Rctiiculoendoetheliosis,RE)是由禽网状内皮增生症病毒(Reticuloendoeheliosisvirus,REV)引起的一组综合症,该病主要侵害机体的免疫系统,导致机体免疫力...
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