陈思 作品数:4 被引量:1 H指数:1 供职机构: 上海交通大学医学院 更多>> 发文基金: 上海市“科技创新行动计划” 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
支链氨基酸分解代谢在肺癌细胞中的功能 2021年 目的·探索支链氨基酸(branched-chain amino acid,BCAA)分解代谢在肺癌细胞中的功能和作用机制。方法·采用瞬时转染法分别向非小细胞肺癌细胞H1299、A549和HCC827转染含无义序列的小干扰RNA(small interfering negative control,siNC)、支链酮酸脱氢酶激酶(branched-chain keto acid dehydrogenase kinase,BCKDK)基因的小干扰RNA(small interfering BCKDK,siBCKDK),并采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测siNC组和siBCKDK组中BCKDK表达水平、支链酮酸脱氢酶亚基E1α(branched-chain keto acid dehydrogenase e1,αpolypeptide,BCKDE1α)及其磷酸化水平。采用CCK-8法检测上述2组细胞的增殖活力。用含0、100、200μmol/L的BCKDK小分子抑制剂BT2(3,6-二氯-2-苯并噻吩羧酸)培养液分别培养上述3种细胞,采用Western blotting检测3种浓度BT2组细胞中BCKDE1α及其磷酸化水平。用CCK-8法检测0μmol/L BT2组和200μmol/L BT2组细胞的增殖活力。采用台盼蓝染色计算H1299和A549细胞中siNC组和siBCKDK组、0μmol/L BT2组和200μmol/L BT2组的细胞活率;并用碘化丙啶染色检测细胞周期,而后行Western blotting检测细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,P21)的表达水平。结果·在H1299、A549、HCC827细胞中,与siNC组相比,siBCKDK组的BCKDK表达下调,BCKDE1α磷酸化水平下调,且细胞的增殖活力减弱(均P=0.000)。与0μmol/L BT2组相比,100μmol/L BT2组和200μmol/L BT2组的上述3种细胞中BCKDE1α磷酸化水平下调,且200μmol/L BT2组下调更明显;200μmol/L BT2组较0μmol/L BT2组的细胞增殖活力减弱(均P=0.000)。在H1299、A549细胞中,分别与siNC组、0μmol/L BT2组相比,siBCKDK组、200μmol/L BT2组的细胞活率均无差异,但发生了G0/G1期细胞周期阻滞(均P<0.05),且该2组的P21表达水平升高。结论·siBCKDK和BT2能够促进BCKDE1α去磷酸化,加快BCAA分解代谢,可能通过上调P21、阻滞细胞周期来抑制肺癌细胞的增殖。 贺艳琪 迟锐 陈梦萍 陈思 陈思 刘云霞 孙海鹏关键词:支链氨基酸 肺癌 细胞增殖 超速效赖脯胰岛素治疗2型糖尿病患者:一项前瞻、随机、双盲、国际多中心、Ⅲ期阳性对照临床研究 2024年 2022年8月4日,Science Bulletin在线发表了由上海交通大学医学院附属第六人民医院贾伟平教授牵头,多国41家研究中心共同参与完成的一项前瞻性临床研究[Zhou J,Chen S,Cheng J,et al.Ultra rapid lispro improves postprandial glucose control versus lispro in combination with insulin glargine/degludec in adults with type 2 diabetes:a prospective,randomized,double-blind,phase 3 trial.Sci Bull(Beijing),2022,67(17):1785-1791.]。 陈思 陆静毅 周健 包玉倩 贾伟平关键词:赖脯胰岛素 超速效赖脯胰岛素在2型糖尿病治疗中效果与安全性的随机对照研究 被引量:1 2023年 目的评估和比较超速效赖脯胰岛素(URLi)和赖脯胰岛素(HL)治疗2型糖尿病的效果与安全性。方法国际多中心、双盲、随机对照研究。纳入2019年5月至2021年1月上海交通大学医学院附属第六人民医院等中国34家研究中心的481例使用胰岛素至少90 d且血糖控制不佳的2型糖尿病患者,通过分层区组随机分为URLi组(319例)和HL组(162例)。主要终点指标为治疗26周后糖化血红蛋白(HbA_(1c))相对基线的变化。次要终点指标为治疗26周后HbA_(1c)(<7.0%和≤6.5%)达标率、第26周混合餐耐量试验中餐后1 h血糖(1hPG)及餐后2 h血糖(2hPG)增幅和安全性指标等。计量资料组间比较采用重复测量混合效应模型或协方差分析模型,计数资料组间比较采用logistic回归模型或Fisher精确检验。结果中国数据显示,URLi组和HL组在男性比例[56.1%(179/319)比56.2%(91/162);P=0.990]、年龄[(59.5±8.4)比(59.6±9.3)岁;P=0.839]等基线特征上的差异无统计学意义。HbA_(1c)相对基线变化方面,URLi组与HL组差异无统计学意义(-0.59%±0.05%比-0.66%±0.06%;P=0.312)。URLi组和HL组在HbA_(1c)<7.0%[47.3%(138/292)比45.2%(70/155);P=0.907]和HbA_(1c)≤6.5%[27.7%(81/292)比27.7%(43/155);P=0.816]达标率上的差异无统计学意义。URLi组1hPG增幅和2hPG增幅均低于HL组[(6.20±0.21)比(6.90±0.25)mmol/L,P=0.001;(8.10±0.27)比(9.30±0.31)mmol/L,P<0.001],差异均有统计学意义。安全性方面,URLi组和HL组治疗期间发生不良事件的受试者比例差异无统计学意义[49.8%(159/319)比50.0%(81/162);P=1.000]。URLi组夜间低血糖发生比率低于HL组[(0.53±0.10)比(0.89±0.16)事件/患者年;P=0.040],差异有统计学意义。结论URLi具有良好的血糖控制作用,非劣效于HL,对餐后血糖增幅控制更佳;并且其夜间低血糖风险低于HL。 陈思 周健 陆静毅 包玉倩 许建伟 朱建坤 贾伟平关键词:胰岛素 赖脯胰岛素 餐后血糖 FKBP12蛋白RNA干扰与回复表达细胞系的建立 2015年 目的建立FKBP12蛋白(FK506 binding-protein 12,基因名FKBP1A)RNA干扰和回复表达的人肺癌细胞系A549,并初步探索FKBP12的功能。方法设计3条核心序列位于FKBP1A 3'UTR区域的siRNA,它们仅靶向内源性的FKBP12。利用p LKO.1-puro载体包装相应的shRNA慢病毒感染A549,得到FKBP12表达调低的细胞系。使用带neo基因筛选标记的pc DNA3.1载体回复表达FKBP12,并筛选得到不受shRNA干扰的回复表达细胞系。用实时荧光定量PCR和Western blotting检测调低和回复表达效果,并初步分析细胞系表型。结果 FKBP12在mRNA和蛋白质水平上的表达均被抑制,干扰效率在75%以上(P<0.01)。FKBP12不影响A549的细胞形态和增殖效率,而下调m TORC1(mammalian target of Rapamycin complex 1)下游转录调控相关蛋白4E-BP1(e IF4E-binding protein 1)的表达。结论成功构建了FKBP12蛋白敲低和回复表达的A549细胞系,为后续探究FKBP12的功能奠定了基础。 陈思 陈鑫 赵永旭 李伟 王毓美关键词:SIRNA MTOR信号通路 A549