王振华
- 作品数：4 被引量：23H指数：3
- 供职机构：山西农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-MC1R的构建及在羊驼毛囊干细胞中的表达被引量：3
- 2015年
- 旨在构建含有MC1R基因的pcDNA3.1(+)真核重组表达载体,为进一步研究MC1R的生物学功能奠定基础。应用RT-PCR技术从羊驼皮肤cDNA文库中扩增MC1R基因全长cDNA,然后通过双酶切将MC1R基因全长cDNA克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),然后采用脂质体法转染体外培养的羊驼毛囊干细胞后,通过G418筛选培养,建立稳定的转染体系,直接荧光观察pcDNA3.1/MC1R融合蛋白在细胞中的分布定位,并通过Western Blot方法检测MC1R在羊驼毛囊干细胞中的表达。结果表明,成功构建了pcDNA3.1/MC1R重组表达载体,并且发现试验组的毛囊干细胞中表达MC1R蛋白显著高于空白组(P<0.05)。成功构建了含有绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pcDNA3.1/MC1R,且MC1R基因在羊驼毛囊干细胞中获得表达。
- 白瑞王振华尹志红弓慧敏于志慧庞全海
- 关键词：羊驼毛囊干细胞真核表达载体转染
- 毛囊干细胞的分离方法及其应用被引量：5
- 2010年
- 毛囊干细胞是皮肤组织工程理想的种子细胞,分离纯化是其研究的基础手段。毛囊干细胞能分化成毛囊、皮脂腺、表皮,在组织维持与更新及某些临床疾病的治疗中均起到重要的作用。作者介绍了近年来毛囊干细胞几种常用的分离纯化方法,包括组织块法和酶消化法等,为进一步研究毛囊干细胞的特性和应用提供参考。
- 赵奎贾宗菲弓慧敏王振华王恩峰庞全海
- 关键词：毛囊干细胞分离纯化基因治疗
- 牛病毒性腹泻的流行情况及防制被引量：14
- 2009年
- 牛病毒性腹泻是由牛病毒性腹泻病毒引起的一种急性热性传染病。除了引起牛发病外,还可引起猪、羊、鹿及多种野生动物感染,给畜牧业造成严重的经济损失。作者对牛病毒性腹泻的流行情况进行了总结,并提出了相应的防制措施。
- 张会敏郑明学古少鹏马海利王栋李仰陶徐志炜张建蒙王振华王恩峰
- 关键词：牛病毒性腹泻防制
- 羊驼毛囊干细胞分离、培养与鉴定被引量：3
- 2014年
- 采用0．2％中性蛋白酶Ⅱ和0．25％胰酶：0．02％EDTA（1：1）“两步酶”消化法从羊驼背部皮肤分离得到羊驼毛囊干细胞。用无血清角质细胞培养基（K-SFM）培养进行形态学观察、细胞生长曲线克隆形成率及免疫组化染色检测。结果显示，细胞生长曲线表明，不同代次毛囊干细胞接种前3d生长缓慢，4～6d进入倍增期，有无限增殖的趋势，所分离的羊驼毛囊干细胞具备毛囊干细胞特征（体积小、立体感强），呈现未分化特征；CK19、CK15、81-integrin和CD34免疫组化染色阳性；第3、5、7、9代克隆形成率分别为（32．7±2．27）％、（47．0±3．46）％、（46．3±3．18）％和（43．3±3．76）％。结果表明，用“两步酶”消化法成功分离获得羊驼毛囊干细胞，无血清角质细胞培养基（K—SFM）可使羊驼毛囊干细胞体外维持未分化状态并传代至12代。
- 赵奎庞全海王振华王恩峰
- 关键词：羊驼毛囊干细胞克隆形成率体外培养
