杨方方
- 作品数：17 被引量：31H指数：4
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- 一种北葶新苷D及其制备方法与应用
- 本发明涉及北葶新苷D及其制备方法与应用，有效解决从北葶苈子中提取北葶新苷D及用于制备治疗心肌细胞H9c2损伤药物的问题，北葶苈子清炒，加水煎煮，提取液减压浓缩，醇沉，上清液浓缩至无醇味，上Dianion HP‑20柱，用...
- 冯卫生李孟郑晓珂杨方方张靖柯张志广吕锦锦赵璇
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- 一种从北葶苈子中提取硫苷化合物的方法及其应用
- 本发明涉及从北葶苈子中提取硫苷化合物的方法及其应用，可有效挖掘北葶苈子的新作用，其解决的技术方案是，硫苷化合物分子式为C<Sub>14</Sub>H<Sub>19</Sub>NO<Sub>6</Sub>S[M+H]+m/...
- 郑晓珂李孟杨方方冯卫生张志广张靖柯吕锦锦赵璇
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- 一种桑辛素M‑3'‑O‑β‑D‑葡萄糖苷及其制备方法与应用
- 本发明涉及桑辛素M‑3'‑O‑β‑D‑葡萄糖苷及其制备方法与应用，可有效解决从桑白皮中提取桑辛素M‑3'‑O‑β‑D‑葡萄糖苷，以及在制备治疗LPS诱导的HPAEC损伤药物中的应用问题，方法是，将桑白皮煎煮，提取液减压浓...
- 郑晓珂克迎迎曹彦刚杨翠兰袁培培傅阳杨方方王小兰冯卫生
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- 南葶苈子水提物对多柔比星诱导H9c2细胞凋亡和氧化应激的抑制作用被引量：6
- 2018年
- 目的探明南葶苈子水提物对多柔比星(doxorubicine,Dox)引起的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及潜在机制。方法应用5μg·m L^(-1)Dox处理H9c2细胞诱导建立心肌细胞损伤模型,分为对照组、模型组、阳性组、南葶苈子水提物不同剂量给药组,检测细胞活力,凋亡率,线粒体膜电位,细胞活性氧(ROS)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平,凋亡通路关键蛋白p53、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达水平,使用UPLC-MS联用的方法分析鉴定南葶苈子水提物中主要成分峰。结果南葶苈子水提物能提高H9c2细胞活力(P <0. 01),降低凋亡水平(P <0. 01),改善线粒体膜电位水平与ROS水平(P <0. 05),改善细胞内SOD及GSH-PX酶活力、LDH、MDA水平(P <0. 01或P <0. 05),调节凋亡通路关键蛋白caspase-3、Bax/Bcl-2、p53蛋白表达水平(P <0. 01或P <0. 05),同时,共分析鉴定了南葶苈子水提物中7种含量最高的成分。结论南葶苈子水提物可以有效保护由Dox引起的H9c2细胞损伤,其机制可能与改善细胞的氧化应激,抑制内源性凋亡通路,而抑制细胞凋亡的发生有关。
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- 关键词：南葶苈子H9C2细胞氧化应激
- 南葶苈子抑制氧化应激与自噬通路抗H_2O_2诱导的H9c2细胞损伤作用研究被引量：12
- 2019年
- 目的探究南葶苈子水提物(DS)对H_2O_2诱导的心肌H9c2细胞损伤的保护作用及潜在机制。方法使用高效液相色谱与质谱联用方法分析鉴定DS中主要成分峰。采用H_2O_2处理制备H9c2细胞损伤模型,分为对照组、模型组、普罗布考组及DS 100、200、400μg/m L组,MTT法检测H9c2细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞自噬水平、线粒体膜电位;试剂盒检测细胞氧化应激相关指标;Incell-Western法检测凋亡通路关键蛋白和自噬标志性蛋白表达水平。结果共分析鉴定了DS中含量最高的7种成分。与模型组比较,DS可以提高H9c2细胞活力(P<0.05、0.01)与细胞存活率(P<0.01),改善线粒体膜电位水平(P<0.01),调节凋亡通路关键蛋白Caspase-3和Bax/Bcl-2蛋白表达(P<0.01),抑制心肌细胞凋亡;并能极显著降低细胞自噬水平(P<0.01),升高自噬标志性蛋白自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)、p62表达水平(P<0.01),抑制心肌细胞自噬;降低心肌活性氧(ROS)水平(P<0.01),调节细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平(P<0.01),改善心肌细胞氧化应激。结论 DS可以有效保护由H_2O_2引起的H9c2细胞损伤,其机制可能与改善细胞的氧化应激、抑制细胞凋亡和自噬有关,其物质基础可能与所含的黄酮苷类成分有关。
- 郑晓珂杨方方杨方方张莉曾梦楠樊慧曾梦楠
- 关键词：南葶苈子心脏疾病氧化应激自噬线粒体凋亡途径
- 一种北葶新苷E及其制备方法与应用
- 本发明涉及北葶新苷E及其制备方法与应用，可有效解决从北葶苈子中提取北葶新苷E及用于制备治疗心肌细胞H9c2损伤药物的问题，北葶苈子清炒，加水煎煮提取，提取液浓缩，醇沉，上清液浓缩至无醇味，上Dianion HP‑20柱，...
- 冯卫生李孟郑晓珂杨方方张靖柯赵璇张志广吕锦锦
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- 北葶苈子炮制前后对H2O2诱导的H9c2心肌细胞损伤保护作用被引量：7
- 2020年
- 目的比较北葶苈子炮制前后对H2O2诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用。方法H2O2诱导H9c2细胞建立细胞损伤模型,同时加入北葶苈子生品及炮制品(400、200、100μg/mL)处理细胞6 h。MTT法检测H9c2细胞存活率,流式细胞术检测细胞ROS、线粒体膜电位、细胞凋亡率、自噬空泡,Incell-Western法检测细胞凋亡相关蛋白,并检测细胞LDH、MDA、T-SOD、GSH-PX水平。结果与模型组比较,北葶苈子炮制前后均能降低H9c2细胞凋亡率、自噬空泡、ROS水平及凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值(P<0.01),增加线粒体膜电位(P<0.01),降低细胞培养液中LDH及细胞MDA水平(P<0.01),提高细胞T-SOD、GSH-PX水平(P<0.05,P<0.01);北葶苈子炮制品抑制caspase-3蛋白表达(P<0.05)。结论北葶苈子炮制前后均可有效改善由H2O2诱导的心肌细胞损伤,可能与其调节氧化应激的作用有关。
- 王慧慧张莉杨方方冯卫生郑晓珂
- 关键词：H9C2细胞自噬氧化应激
- 一种从北葶苈子中提取酚苷化合物的方法及其应用
- 本发明涉及从北葶苈子中提取酚苷化合物的方法及其应用，可有效挖掘北葶苈子的新作用，其解决的技术方案是，北葶新苷A，分子式为C<Sub>18</Sub>H<Sub>24</Sub>O<Sub>12</Sub>[M+Na]<S...
- 郑晓珂李孟杨方方冯卫生张志广张靖柯吕锦锦赵璇
- 独行菜磷酸甲羟戊酸激酶LaPMK基因克隆、生物信息学分析及原核表达被引量：8
- 2016年
- 目的从独行菜Lepidium apetalum中克隆萜类合成途径关键酶磷酸甲羟戊酸激酶(phosphomevalonate kinase,PMK)基因,进行序列分析和原核表达。方法根据独行菜转录组数据中La PMK基因序列设计特异性引物,克隆得到La PMK基因的开放阅读框(open reading frame,ORF),构建p ET32a-La PMK原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达La PMK融合蛋白。结果 La PMK基因ORF全长为1 518 bp(Genbank注册号KT004541),编码505个氨基酸。生物信息学分析结果显示La PMK蛋白没有跨膜区,不含信号肽,位于细胞质中,含有GHMP激酶家族特异的N末端和C末端的保守结构域。系统进化树结果显示La PMK蛋白与芜菁的PMK蛋白具有92%的序列相似性,亲缘关系较近。构建p ET32a-La PMK原核表达载体,在大肠杆菌中成功表达La PMK融合蛋白。结论克隆了La PMK基因,建立其稳定的原核表达体系,为La PMK蛋白纯化、抗体的制备,进一步研究La PMK基因在独行菜萜类合成途径中的作用奠定了基础。
- 赵乐马利刚杨方方冯卫生郑晓珂
- 关键词：独行菜基因克隆原核表达
- 北葶苈子炮制前后水煎总提物对H2O2诱导的H9c2心肌细胞损伤保护作用
- 目的：探讨北葶苈子生品、炮制品水煎总提物对H2O2引起的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及相应机制.
方法：应用H2O2处理H9c2细胞诱导建立细胞损伤模型,分为正常组(NC)、模型组(H2O2)、阳性组(P)、...
- 杨方方张莉樊慧郑晓珂冯卫生
- 关键词：中药炮制心肌保护作用
