李永亮
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：甘肃农业大学草业学院草业生态系统教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 转HhERF2和PeDREB2a基因棉花对胁迫的耐受能力分析被引量：6
- 2015年
- AP2/ERF转录因子普遍存在于植物中,并广泛参与植物对生物和非生物胁迫的响应。为了提高棉花对病害及非生物逆境的抵抗能力,将分别从抗逆性优良的沙生植物铃铛刺(Halimodendron halodendron)和胡杨(Populus euphratica)中分离的Hh ERF2和Pe DREB2a转录因子基因构建以rd29A为启动子的表达载体,并通过花粉管通道法转化棉花。利用Real-time PCR分析胁迫处理的转基因阳性植株Hh ERF2和Pe DREB2a基因异位表达及下游PR(pathogenesis-related protein)基因表达情况,结果表明在病原菌、干旱和盐胁迫下转基因植株体内Hh ERF2基因能够超表达,而Pe DREB2a基因仅在干旱和盐胁迫诱导下超表达。接种大丽轮枝菌(Verticillium dahlia)后能够诱导转基因植株相关PR基因表达,同时与对照J12相比植株体内PAL、SOD和POD等酚类代谢相关酶的活性显著增加,且增强了转基因棉花对大丽轮枝菌的抵抗能力。干旱和高盐胁迫下生理生化特性分析表明,与对照相比,转基因棉花叶片中可溶性碳水化合物和相对含水量显著升高,而电导率和丙二醛(MDA)含量显著降低。因此,转基因棉花对大丽轮枝菌及干旱和高盐胁迫表现出了较强的耐受能力。
- 李永亮董雪妮雷志杨沛燕陶飞唐益雄徐秉良吴燕民
- 关键词：非生物胁迫生物胁迫转基因棉花大丽轮枝菌
- 铃铛刺抗逆转录因子基因HhDREB2的克隆及分析被引量：2
- 2014年
- 利用同源克隆和RACE（rapid amplification of cDNA end）技术从豆科铃铛刺属灌木铃铛刺中分离了一个DREB类转录因子基因的全长cDNA序列,命名为HhDREB2（GenBank No.：EU872018）。序列分析表明,该基因全长为873 bp,在108-626 bp处为开放阅读框,无内含子,编码172个氨基酸残基,分子质量为19.702 kDa,等电点8.92。系统进化树和同源序列比对分析结果显示,该基因编码的蛋白含有一个典型的AP2/ERF保守结构域,并与大豆GmDREB1和GmDREB2的亲缘关系较近,属于A5亚组。通过酵母单杂交试验,发现HhDREB2基因编码的蛋白具有转录激活的功能。此外,在洋葱表皮细胞中进行该基因的瞬时表达,证实了HhDREB2蛋白定位于细胞核。半定量RT-PCR检测发现,HhDREB2基因受干旱、高盐和低温的诱导表达,而对GA3、NAA、ABA和6BA的处理无明显的变化。
- 雷志阴翠翠李永亮孙占敏吴燕民
- 关键词：DREB转录因子RACE技术酵母单杂交半定量RT-PCR
