李彦阳
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：吉林农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种多酚氧化酶提取新方法与几种常规方法的比较研究被引量：4
- 2013年
- [目的]对一种新的多酚氧化酶的提取方法与几种常用提取方法的综合效果进行比较。[方法]以苹果梨为研究对象,对匀浆法、匀浆吸附法、匀浆后丙酮抽提法、丙酮粉法、丙酮抽提后吸附法这5种多酚氧化酶提取方法所得酶液进行了多酚类化合物残余、总酶活及酶的稳定性的比较。同时,还对几种氨基酸对酪氨酸酶的抑制情况进行了检测。[结果]试验得出,以改进的丙酮抽提后吸附法所得酶液多酚残余少,总活力保持良好,为几种方法中最佳的提取方法。谷胱甘肽、谷氨酰胺、半胱氨酸、谷氨酸对酪氨酸酶的活力均有抑制作用,其IC50值分别为(0.48±0.028)、(0.59±0.032)、(0.37±0.016)和(1.87±0.087)mmol/L。[结论]研究可为多酚氧化酶的相关研究提供参考。
- 毕云枫姜仁凤刘薇薇李彦阳沈明浩
- 关键词：多酚氧化酶稳定性
- 白腐菌产漆酶培养条件的响应面法优化被引量：1
- 2013年
- [目的]采用Plackett-Burman试验设计法、响应面法,对灰盖鬼伞菌(Coprinopsis cinerea)产漆酶进行了发酵工艺条件的优化研究。[方法]首先利用Plackett Burman设计试验筛选出影响产酶的麦麸、稻草粉和酵母粉3个主要因素。在此基础上,用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,再利用Box-Behnken试验设计、响应面分析法进行回归分析。[结果]麦麸、稻草粉和酵母粉浓度与漆酶活力存在显著的相关性,得到最佳培养基条件。当麦麸10.188 g/L、稻草粉9.379 g/L、酵母粉3.613 g/L时,漆酶活力达到729.89 U/ml。[结论]经3批培养验证,预测值与验证试验平均值接近。
- 毕云枫李振光李彦阳刘薇薇沈明浩
- 关键词：CINEREA漆酶响应面法
- Thermotoga nea politana葡萄糖苷酶基因的克隆、表达及其酶学性质被引量：2
- 2013年
- 目的：从新阿波罗栖热袍菌Thermotoga neapolitana（DSM4359）中克隆葡萄糖苷酶基因，并将其转化进大肠杆菌中进行体外表达，研究重组酶的酶学性质。方法：以Thermotoga neapolitana基因组DNA为模板，根据该基因序列设计引物，采用PCR法扩增出葡萄糖苷酶基因，将其连接到pET-28a（4-）载体上，转化入E．coli BL21（DE3）宿主菌中。经IPTG诱导体外高效表达。研究重组酶的最适反应温度、pH值和底物特异性。结果：PCR扩增得到825bp的片段，编码274个氨基酸，并连接到载体pET-28a（＋）上，成功转化到宿主菌中。并在体外进行了高效表达。丙烯酰胺凝胶电泳，目标蛋白相对分子质量约为63000。重组酶的最适反应温度为75℃，在70℃～85℃范围内仍保持60％以上活力。最适反应pH值为5．0，在pH3．0～6．0范围内仍能保持70％以上活力。最适底物为海藻糖，其次为龙胆二糖，其他糖苷键连接的二糖的活力均很低或没有活力。结论：Thermotoga neapolitana（DSM4359）中葡萄糖苷酶基因成功克隆并表达于大肠杆菌中。葡萄糖苷酶能特异性水解α-（1→1）糖苷键。
- 毕云枫刘薇薇李彦阳杨万才沈明浩
- 关键词：葡萄糖苷酶基因
