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张丹丹

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
发文基金：上海市宝山区科学技术委员会科研项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇质粒
  • 1篇质粒构建
  • 1篇破骨
  • 1篇破骨细胞
  • 1篇转染
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞系
  • 1篇膜蛋白
  • 1篇跨膜
  • 1篇跨膜蛋白
  • 1篇骨细胞
  • 1篇RAW264...
  • 1篇病毒
  • 1篇病毒转染

机构

  • 1篇蚌埠医学院
  • 1篇上海交通大学...

作者

  • 1篇陈凤玲
  • 1篇何茳萍
  • 1篇袁慧敏
  • 1篇张光亚
  • 1篇张丹丹

传媒

  • 1篇遵义医学院学...

年份

  • 1篇2017
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
OC-STAMP基因过表达载体及稳转细胞系的构建
2017年
目的构建破骨细胞多次跨膜蛋白(OC-STAMP)基因过表达质粒,体外转染RAW264.7细胞构建稳转细胞系,为进一步研究OC-STAMP的功能提供工具。方法根据NCBI数据库中OC-STAMP基因信息,设计引物,采用PCR扩增其基因片段;运用基因重组方法双酶切目的基因,并将其克隆至含有绿色荧光蛋白(GFP)的p CDH-CMV慢病毒载体,经酶切测序对重组质粒进行鉴定;转染成功构建的质粒至293T细胞中Western blotting验证蛋白过表达情况;采用ps PAX2和p MD2.G两种包装质粒包装p CDH-CMV-oc-stamp重组质粒获得病毒液,病毒感染RAW264.7细胞获得OC-STAMP过表达稳转细胞系,Q-PCR和Western blotting验证蛋白过表达情况。结果酶切和测序鉴定表明成功构建p CDH-CMV-oc-stamp的基因重组质粒;将成功构建的p CDH-CMV-oc-stamp质粒转染至293T,可观察到大量绿色荧光表达;将成功包装获得的病毒液感染RAW264.7细胞后q-PCR及Western blotting结果证实OC-STAMP成功过表达。结论成功构建p CDH-CMV-oc-stamp重组质粒及OC-STAMP过表达的稳转细胞系。
袁慧敏何茳萍张光亚张丹丹陈凤玲
关键词：质粒构建病毒转染RAW264.7细胞
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