任艳红
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：西南大学生物技术学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金四川省科技厅应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 四倍体果桑嘉陵30号再生植株的研究被引量：2
- 2018年
- 以四倍体果桑品种嘉陵30号(Morus atropupurea Roxb.)的春芽和冬芽为外植体,建立了嘉陵30号的高频再生体系。结果表明,冬芽比春芽更适合作外植体,低温处理后再用赤霉素处理对解除冬芽休眠效果最好;0.1%HgCl_2消毒15min且在培养基中添加300mg/L噻孢霉素钠盐(Cef,Cefotaxime Sodium Salt)能有效控制污染;培养基MS+3.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA适用于果桑的初代和继代培养。嘉陵30号通过直接器官发生途径再生,使用不定芽诱导丛生芽此种增殖方式效果更佳,增值系数高达7.04,且苗粗壮,生长旺盛,最适诱导培养基为1/2MS+0.6mg/L IAA,生根率可达87.5%,根系粗壮。
- 植爽任艳红唐星徐凤翔王茜龄赵爱春
- 关键词：果桑
- 中国桑属15个种RAD-seq高通量测序被引量：2
- 2016年
- 利用RAD-seq对中国桑属15个种进行了高通量测序,总共得到36.72Gb clean data,总Tags数2 788 927(reads),平均每个种原始数据都在10M以上,Tags都在20万条以上,质量值Q30都在90%以上。用Stacks软件对15个种进行比对,获得68904个SNPs位点。用最大似然法建树,分支图首先将白桑、广东桑分出,接着是山桑、鲁桑、瑞穗桑,再次分出的是鸡桑、细齿桑、蒙桑和鬼桑,最后分出的是黑桑、川桑、华桑、滇桑、长穗桑、奶桑。分支图能将栽培种和野生种完全分开;可以将蒙桑和鬼桑、鸡桑、华桑、川桑、奶桑分开。认为白桑、广东桑属原始类型,长穗桑、奶桑属进化类型;山桑、鲁桑、瑞穗桑这三个种被分在一个分支,自检支持率99%,黑桑、川桑这两个种被分在一个分支,自检支持率56%,长穗桑、奶桑这两个种被分在一个分支,自检支持率100%,说明这些种之间有较近的亲缘关系,桑属RAD-seq测序能大规模筛查SNPs位点,系统发育分析的准确性就更加可靠。
- 陈祥平吕银刘玲柯皓天刘凯旋王茜龄任艳红陈仁芳
- 关键词：SNP标记系统发育
- 桑树谷氨酸脱氢酶基因MaGDHs的克隆及表达分析被引量：3
- 2018年
- 【目的】克隆桑树的谷氨酸脱氢酶基因GDH,了解其结构、组织特异性表达以及调控特点,并获得桑树谷氨酸脱氢酶蛋白,为进一步研究谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH)在桑树氮代谢过程中的功能奠定基础,也为多年生木本植物的GDH研究提供参考。【方法】根据川桑基因组数据库搜索GDH同源序列设计引物,以杂交桑品种桂桑优62号(M.atropurpurea Roxb.)c DNA为模板,通过RT-PCR克隆获得Ma GDHs。利用NCBI上BLAST和CDD进行氨基酸序列比对和保守结构域分析;利用Expasy在线软件对Ma GDH氨基酸组成、分子量、等电点进行分析;采用MEGA 5.0软件构建系统进化树;通过q RT-PCR检测试管苗在不同浓度的蔗糖、铵盐、激素(6-BA)状态下Ma GDHs的表达量,用Step One Software V2.1软件根据2-△△Ct法进行基因相对表达量分析。以p ET-28a(+)、p ET-32a(+)、p Cold-TF为载体构建Ma GDH的融合蛋白重组质粒并转入到大肠杆菌中进行表达。【结果】成功获得2个Ma GDHs,序列全长均为1 236 bp,编码411个氨基酸,含一个开放阅读框,分别命名为Ma GDH1和Ma GDH2。Ma GDH1蛋白质的分子量为44.1 k D,理论等电点为5.84,Ma GDH2蛋白质的分子量为44.2 k D,理论等电点为6.68。Ma GDHs氨基酸序列含有9个外显子,8个内含子,具有线粒体转移肽、Glu/a-KG结合域和NAD(P)结合域,与川桑同源性均为99%,与双子叶植物同源性为90%左右,与单子叶植物的同源性为85%左右。重组蛋白Ma GDHs以包涵体的形式在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,经过纯化和复性后获得了具有活性的酶蛋白,酶活性以p ET-28a(+)-Ma GDH1重组蛋白最高,为10.07 nmol·min^(-1)·m L-1。Ma GDHs的表达具有组织特异性,在桑花中表达量最高,其次是嫩叶,在果实中几乎不表达。Ma GDHs的表达受到蔗糖、NH4+和6-BA的调控。随着蔗糖浓度的增加,Ma GDHs表达量增加;过量的NH4+促进Ma GDH1的表达,而没有NH4+的情况下,Ma GDHs也有表达;细�
- 植爽任艳红唐星徐凤翔王传宏赵爱春赵爱春
- 关键词：桑树谷氨酸脱氢酶原核表达
