韩莉
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院重点部署项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 异戊烯基焦磷酸异构酶基因及其应用
- 本发明涉及一种异戊烯基焦磷酸异构酶基因及其应用，其解决了利用工程菌合成萜类化合物效率不高的技术问题，本发明提供了一种异戊烯基焦磷酸异构酶基因、其表达的蛋白质、含有异戊烯基焦磷酸异构酶基因的原核表达载体及产萜类化合物工程菌...
- 李春胡开蕾韩莉张莎莎赖小勤刘伟丰徐欣怡高珊陶勇
- 文献传递
- 重组产番茄红素大肠杆菌工程菌株中异戊烯异构酶(IDI)基因的筛选被引量：4
- 2016年
- 番茄红素是一类在食品、医药等领域具有广泛应用价值的萜类化合物。异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IDI)是番茄红素合成途径中的关键酶,也是代谢工程改造的主要靶点。本研究为了系统比较不同来源IDI对重组大肠杆菌番茄红素(Lycopene)产量的影响,分别克隆了原核微生物、真核微生物、植物、古菌等多种来源的I型及II型异戊烯基焦磷酸异构酶(IDI)基因,在大肠杆菌E.coli中异源表达,在加强自身2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)代谢途径的背景下,通过优化多靶点组合及转化时间提高番茄红素的合成水平。结果表明酿酒酵母来源的I型IDI(Sc IDI)及枯草芽孢杆菌来源的II型IDI(Bs IDI)在经优化的背景下可以获得最高的番茄红素产量,产量分别达到9.96 mg/g DCW,8.78 mg/g DCW,番茄红素积累在转化8 h达到最高,最高能达到10.29 mg/g DCW。本研究最终确定了不同类型IDI发挥功能的条件,为后续番茄红素以及萜类化合物的代谢途径的改造提供依据。
- 韩莉张莎莎王博军刘京国刘伟丰王艳萍陶勇
- 关键词：大肠杆菌番茄红素代谢工程
- 通过番茄红素环化酶的优化构建β-胡萝卜素高产菌株被引量：4
- 2017年
- 目标产物的合成途径往往需要对关键酶的来源、表达水平等因素进行系统性优化才能实现代谢通量的最大化。β-胡萝卜素是一类具有重要应用价值的萜类化合物,其中番茄红素环化酶(Lycopene cyclase,CrtY)是β-胡萝卜素合成途径中的关键酶,能够催化FAD依赖的环化反应将番茄红素转化合成β-胡萝卜素。本研究通过对CrtY的系统优化提高β-胡萝卜素的合成水平,并确定CrtY的表达对代谢通路的影响。在大肠杆菌中以番茄红素合成模块为基础,通过引入番茄红素环化酶基因crt Y构建了β-胡萝卜素合成模块。并进一步利用寡聚接头介导的DNA组装方法 (Oligo-linker mediated assembly method,OLMA)引入一系列不同强度的人工设计的核糖体结合位点(Ribosome-binding site,RBS),对CrtY的表达强度、基因来源等因素进行高通量的优化。通过OLMA文库构建和平板筛选,获得了5株高产β-胡萝卜素的工程菌株。在摇瓶中,5株工程菌株的β-胡萝卜素产量可达15.79-18.90 mg/g DCW(Dry cell weight),比优化前提高了65%。进一步选取了其中的CP12菌株,在5 L发酵罐上,利用高密度培养技术验证工程菌株合成β-胡萝卜素的能力。最终β-胡萝卜素产量可达1.9 g/L。RBS强度分析及代谢中间体分析表明,适当地降低CrtY表达强度能够有利于β-胡萝卜素模块相关基因之间协同发挥作用。以上结果为β-胡萝卜素合成途径的优化规律提供了理论指导。
- 金应福韩莉张莎莎李世忠刘伟丰刘伟丰
- 关键词：大肠杆菌代谢工程
- 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了1‑脱氧‑D‑木酮糖‑5‑磷酸合成酶及其编码基因与应用。本发明所提供的1‑脱氧‑D‑木酮糖‑5‑磷酸合成酶是如下a)或b)的蛋白质：a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)将序列表中序列2所示的...
- 张莎莎韩莉刘伟丰江贤章陶勇
- 文献传递
- 异戊烯基焦磷酸异构酶基因及其应用
- 本发明涉及一种异戊烯基焦磷酸异构酶基因及其应用，其解决了利用工程菌合成萜类化合物效率不高的技术问题，本发明提供了一种异戊烯基焦磷酸异构酶基因、其表达的蛋白质、含有异戊烯基焦磷酸异构酶基因的原核表达载体及产萜类化合物工程菌...
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- 文献传递
