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薛麒: 作品数：69 被引量：68H指数：4; 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>; 发文基金：公益性行业(农业)科研专项北京市科技计划项目国家重点实验室开放基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>

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一种羊痘灭活疫苗及其生产方法: 本发明涉及一种羊痘灭活疫苗及其制备方法。本发明采用山羊痘病毒AV41株接种BHK‑21细胞，收获培养物，经浓缩、纯化、BEI灭活后，按一定比例加入适宜佐剂混合乳化制成。用于预防山羊痘和绵羊痘。采用本发明提出的悬浮培养BH...; 陈小云杜吉革王磊王静文张敏薛麒朱真; 文献传递

产气荚膜梭菌ε毒素重组突变体大肠杆菌表达条件的优化被引量：1: 2021年; 为优化产气荚膜梭菌ε毒素重组蛋白的表达条件,以前期构建的产气荚膜梭菌ε毒素重组突变体为基础,通过控制变量法确定诱导温度、诱导时间、IPTG诱导浓度以及诱导时菌液浓度等原核蛋白表达条件。结果表明,ε毒素的重组突变体在37℃、菌液OD_(600)值为0.895~1.295,1.6 mM IPTG诱导6 h条件下可溶性表达量最高。这为下一步大规模生产ε毒素基因工程亚单位疫苗奠定基础。; 朱真杜吉革薛麒李启红印春生张莹辉李倩琳姚文生陈小云; 关键词：产气荚膜梭菌基因工程亚单位疫苗蛋白表达

产气荚膜梭菌ε毒素突变体的表达及免疫保护力评价被引量：4: 2018年; 为获得产气荚膜梭菌ε毒素(ETX)的重组突变体,并评价其毒力及免疫原性。对已知的D型产气荚膜梭菌ETX编码基因进行优化设计,并将第106位组氨酸突变为脯氨酸,经人工合成获得基因片段GETXH106P。将GETXH106P克隆至原核表达载体p ET30a(+),转染BL21(DE3)菌中进行表达与纯化,从而获得重组蛋白r ETXH106P。利用Western blot方法检测r ETXH106P与D型产气荚膜梭菌抗血清的反应性,并检测其对犬肾细胞系(MDCK细胞)以及小鼠的毒力。随后,将r ETXH106P与Montanide ISA 201佐剂混合乳化制备疫苗,免疫4只健康家兔,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测一免及二免后兔血清的中和抗体效价。结果表明,r ETXH106P为可溶性表达,通过灰度扫描,其可溶性表达量比例可达30%;该重组蛋白能与D型产气荚膜梭菌毒素抗血清反应;细胞毒性试验结果显示,100μg/m L的重组蛋白仍无细胞毒性;小鼠安全性实验结果显示,6.25×106ng/kg剂量的重组蛋白对小鼠仍无致死性;每毫升的一免抗血清可中和450~700个最小致死量(MLD)、二免抗血清可中和3000~4000个MLD的D型产气荚膜梭菌毒素;用1 MLD的D型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔4/4保护。以上结果表明,产气荚膜梭菌r ETXH106P重组蛋白毒力基本消失,且保留了良好的免疫原性,是D型产气荚膜梭菌病基因工程亚单位疫苗的理想候选抗原蛋白。; 杜吉革彭小兵张秀坤朱真薛麒王磊李启红印春生姚文生康凯蒋玉文陈小云; 关键词：突变毒力抗原性

一种无毒C型肉毒梭菌基因工程亚单位疫苗及其生产方法: 本发明涉及一种无毒C型肉毒梭菌基因工程亚单位疫苗及其生产方法，本发明制备的无毒性C型肉毒梭菌亚单位疫苗，系采用经过密码子优化、含有麦芽糖蛋白(MBP)标签的肉毒梭菌毒素(BoNTs)重链的无毒区域H<Sub>C</Sub...; 陈小云薛麒刘莹李旭妮杜吉革李启红朱真张莹辉印春生姚文生; 文献传递

一种腐败梭菌α毒素重组亚单位疫苗及其生产方法: 本发明涉及一种腐败梭菌α毒素重组亚单位疫苗及其生产方法。本发明将野生型腐败梭菌α毒素成熟毒素的第54位半胱氨酸突变为亮氨酸，第264位天冬酰胺突变为丙氨酸，第269位组氨酸突变为丙氨酸，第310位色氨酸突变为丙氨酸，获得...; 陈小云杜吉革薛麒朱真王磊印春生李启红康凯姚文生

一种无毒性破伤风毒素和诺维梭菌α毒素重组融合蛋白: 本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和诺维梭菌α毒素重组融合蛋白。本发明制备的重组融合蛋白，系采用经过密码子优化、破伤风毒素C片段与诺维梭菌α毒素的C末端以及N端的无毒性抗原表位的重组融合蛋白生产，即最大限度地保留两种毒素蛋白...; 杜吉革刘莹张莹辉陈小云李旭妮李启红薛麒朱真王磊印春生姚文生; 文献传递

一种产气荚膜梭菌β毒素重组亚单位疫苗及其生产方法: 本发明涉及一种产气荚膜梭菌β毒素重组亚单位疫苗及其生产方法。本发明制备的产气荚膜梭菌β毒素重组亚单位疫苗，系采用经过密码子优化、含有4个氨基酸突变的重组产气荚膜梭菌β毒素蛋白生产，即最大限度地保留天然毒素蛋白的完整性和空...; 杜吉革陈小云朱真薛麒刘莹印春生李启红康凯姚文生

一种羊痘、山羊传染性胸膜肺炎二联灭活疫苗及其生产方法: 本发明涉及一种羊痘、山羊传染性胸膜肺炎二联灭活疫苗及其制备方法。本发明采用山羊痘病毒AV41株和山羊支原体山羊肺炎亚种C87001株分别接种悬浮培养的BHK‑21细胞和适宜培养基培养，收获培养物，经浓缩、纯化，分别用BE...; 陈小云王磊杜吉革张敏王静文朱真薛麒; 文献传递

一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白: 本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白。本发明系采用经过密码子优化、破伤风梭菌毒素C片段与含有多个氨基酸突变的产气荚膜梭菌β毒素突变体的重组融合蛋白，即最大限度地保留两种毒素蛋白的免疫原性，又避免...; 杜吉革刘莹王磊陈小云李旭妮李启红朱真薛麒张莹辉姚文生印春生; 文献传递

卵黄抗体三种提取方法的比较研究被引量：3: 2015年; 运用硫酸铵法、聚乙二醇(PEG)法、冷乙醇法对卵黄抗体进行提取,并使用间接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定所得卵黄抗体的特异性,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测其纯度,用Nanodrop2000测其蛋白浓度并计算提取量,比较三种方法所得抗体的特异性、纯度和提取量。结果显示,三种提取方法所得卵黄抗体特异性高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法;纯度高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法;三种方法的提取量高低依次为PEG法、硫酸铵法、冷乙醇法。经综合分析与评价,硫酸铵法的抗体特异性较好、纯度较高、提取量也较高,且其操作方法相对简便,是比较具有优势的提取方法。; 张莹辉吴思捷薛麒梁琦姚文生; 关键词：卵黄抗体硫酸铵法

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