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口腔鳞癌患者PBMC表面活化性受体NKG2D的表达及临床意义: 2012年; 目的:探讨口腔鳞癌患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)表面活化性受体自然杀伤细胞2族成员D(natural killer group 2,member D,NKG2D)的表达及临床意义。方法:应用流式细胞术检测54例口腔鳞癌患者和20例健康成年人(正常对照组)PBMC表面活化性受体NKG2D的表达情况,采用SPSS16.0软件包中的方差分析及两独立样本t检验对数据进行统计学分析。结果:54例口腔鳞癌患者PBMC表面NKG2D表达的阳性率为(12.49±5.26)%,显著低于健康成人的(22.93±8.14)%(P<0.05)。进一步分析表明,口腔鳞癌患者PBMC表面NKG2D表达的阳性率在不同肿瘤大小和临床分期间,差异有显著性(P<0.05),而不同性别、年龄、肿瘤部位、病理分化程度及颈淋巴结是否转移之间,差异无显著性(P>0.05)。结论:口腔鳞癌患者PBMC表面NKG2D表达低于正常,且与肿瘤大小及临床分期相关。; 李超石芳琼杨丹王洁翦新春蒋灿华; 关键词：口腔鳞状细胞癌 NKG2D 免疫逃逸

MHC-Ⅰ类链相关基因A修饰的口腔鳞癌细胞疫苗诱导抗肿瘤免疫应答的实验研究: 2012年; 目的:研究MHC-Ⅰ类链相关基因A(MHC classⅠchain-related gene A,MICA)修饰的口腔鳞癌疫苗诱导机体抗肿瘤免疫应答的有效性并探讨其作用机制。方法:灭活稳定转染MICA基因的口腔鳞癌细胞,制备成肿瘤疫苗,通过腹腔注射严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)鼠,观察其对皮下移植瘤生长的抑制作用;应用流式细胞术和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法检测免疫重建荷瘤SCID鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)和脾细胞表面NKG2D的表达及对肿瘤靶细胞的杀伤活性。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学处理。结果:转染MICA基因的口腔鳞癌疫苗能显著抑制免疫重建荷瘤SCID鼠皮下移植瘤的生长,上调PBMC和脾细胞表面NKG2D的表达,并增强对肿瘤靶细胞的杀伤活性,与未转染组及转染空白载体组比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:过表达MICA蛋白的口腔鳞癌疫苗能显著增强机体的抗肿瘤免疫应答能力,MICA有望作为口腔鳞癌免疫基因治疗的潜在靶标。; 李超石芳琼王洁杨丹翦新春蒋灿华; 关键词：口腔

口腔鳞癌患者血清可溶性MHC-I类链相关蛋白A的检测及其临床病理意义被引量：1: 2012年; 目的：探讨口腔鳞癌患者血清中可溶性MHC-I类链相关蛋白A（soluble major histocompatibility complex classI-related chain A,sMICA）的表达水平及其临床意义。方法：选用口腔鳞癌患者78例作为实验组,19例健康成年人作为正常对照组,应用酶联免疫吸附定量分析法检测实验组和正常对照组血清中sMICA的含量。结果：实验组血清sMICA检出率为98.7%（77/78）,其含量的95%可信区间为74.30~93.95 pg/mL,中位数为82.17 pg/mL;对照组血清sMICA检出率为94.7%（18/19）,其含量的95%可信区间为29.48~50.30 pg/mL,中位数为37.54 pg/mL,实验组血清sMICA含量显著高于对照组（P〈0.01）。实验组血清sMICA含量在不同肿瘤大小、临床分期及颈部淋巴结是否转移与正常对照组比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）;而不同性别、年龄及肿瘤分化程度两组间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：口腔鳞癌患者血清sMICA表达水平增高,且与肿瘤大小、临床分期及颈部淋巴结转移相关,检测血清sMICA的含量有助于判断口腔鳞癌患者的免疫功能状态。; 李超石芳琼杨丹王洁翦新春蒋灿华; 关键词：口腔鳞状细胞癌免疫逃逸

MHC-Ⅰ类链相关基因A真核表达载体的构建及稳定转染舌鳞癌细胞的实验研究被引量：7: 2011年; 目的构建人类MHC-Ⅰ类链相关基因A(MICA)的真核表达载体,转染人舌鳞癌脑高转移Tca8113-Tb细胞,建立稳定过表达MICA基因的口腔鳞癌细胞系。方法采用PCR技术扩增pCMV-SPORT6-MICA中编码MICA基因的cDNA序列,重组至有绿色荧光蛋白标记的真核表达载体pEGFP-N1,构建最终的表达载体pEGFP-N1-MICA,脂质体法转染Tca8113-Tb细胞,G418筛选,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,有限稀释法建立稳定过表达MICA基因的Tca8113-Tb细胞系,RT-PCR、real time PCR和免疫细胞化学检测MICA在该细胞中的表达。结果通过PCR技术获取了MICA基因并成功克隆入载体,测序鉴定该序列与GenBank中的序列相同。转染的细胞可见绿色荧光蛋白表达,RT-PCR、real time PCR及免疫细胞化学检测到目的基因MICA在转染细胞中为过表达。结论 pEGFP-N1-MICA真核表达载体的成功构建与稳定转染Tca8113-Tb细胞系的建立,为进一步研究该基因的功能奠定了良好的实验基础。; 李超杨丹石芳琼李跃辉陈新群翦新春蒋灿华; 关键词：质粒构建

口腔鳞癌细胞过表达MHC-Ⅰ类链相关蛋白A对自然杀伤细胞与细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性影响的实验研究被引量：1: 2012年; 目的探讨口腔鳞癌细胞过表达MHC-Ⅰ类链相关蛋白A(MICA)对自然杀伤细胞(NK)与细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的影响。方法通过绘制细胞生长曲线、检测细胞周期、进行平板集落形成率及裸鼠皮下成瘤等方法对稳定转染并过表达MICA的口腔鳞癌细胞株进行生物学特性鉴定。采用乳酸脱氢酶释放法及流式细胞术分析口腔鳞癌细胞过表达MICA对NK与CTL细胞杀伤活性及自然杀伤细胞2族成员D(NKG2D)受体表达的影响。结果口腔鳞癌细胞转染MICA基因后主要生物学特性未发生改变,但能显著增强NK与CTL细胞杀伤活性并上调其表面NKG2D的表达,与未转染及转染空白载体的细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MICA可作为口腔鳞癌免疫基因治疗的潜在靶标,值得进一步研究。; 李超石芳琼杨丹王洁翦新春蒋灿华; 关键词：口腔杀伤活性

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杨丹