姚霏
- 作品数：13 被引量：50H指数：4
- 供职机构：苏州市中医医院更多>>
- 发文基金：苏州市科技发展计划江苏省中医药管理局科技项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 3-脱氧葡萄糖醛酮还原酶药物筛选体系的建立及应用被引量：1
- 2011年
- 目的从鸡肝中提取3-脱氧葡萄糖醛酮(3-DG)还原酶,并建立3-DG还原酶体外反应体系筛选药物。方法以辅酶NADPH的消耗量为评价指标来表示3-DG还原酶的活性,通过对反应体系底物3-DG、辅酶NADPH、酶量和反应时间的优化,考察温度等影响因素,建立3-DG还原酶体外反应体系并应用于寻找提高3-DG还原酶活性的药物。结果优化后的反应体系为:100μg.mL-1 3-DG溶液、250μg.mL-1 NADPH、酶液各20μL,用50 mmol.L-1的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液(pH6.4)调反应体系至200μL,混合物于37℃反应40 min;以NADPH的消耗量来定义3-DG还原酶的酶活单位,并应用于17种药物的筛选。结论该反应体系可用辅酶NADPH的消耗来反映体系中3-DG还原酶的活性,并能为寻找提高3-DG代谢酶活性的药物提供方法。
- 江国荣张露蓉姚霏
- 关键词：药物筛选
- 玉屏风散通过STAT3改善肝细胞肝癌免疫抑制微环境中NK细胞活性的机制研究
- 2023年
- 目的:阐明玉屏风散在发挥抗肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)效应作用中对自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)活性的影响及其机制。方法:采用Hepa1-6 HCC小鼠模型,造模后5 d,用玉屏风散药液(20、30、40 g生药/kg)进行灌胃给药,2周后处死小鼠。瘤体质量称重用于抑瘤率的计算;Western Blot检测肿瘤组织中信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)/p-STAT3、程序性死亡因子1的配体(ligands for programmed death factor 1,PD-L1)的蛋白表达情况;ELISA法检测肿瘤组织中吲哚胺2,3-二氧化酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)、TGF-β的表达情况;从癌旁组织中分选出NK细胞,流式细胞术和ELISA法检测NK细胞活性相关因子颗粒酶、穿孔素(Granzyme,Perforin)、IFN-γ的表达情况。结果:与模型组相比,不同剂量的玉屏风散(20、30、40 g生药/kg)均显著抑制HCC小鼠肿瘤的生长(均P<0.05),且呈剂量依赖型,其抑瘤率分别为21.48%、36.12%、49.56%;与模型组比,玉屏风散(20、30、40 g生药/kg)可抑制肿瘤组织中STAT3/p-STAT3、PD-L1的蛋白表达,以及IDO、TGF-β的分泌;且对癌旁组织中NK细胞活性相关因子Granzyme、Perforin、IFN-γ的表达有明显促进作用。结论:玉屏风散是通过抑制STAT3的活化来改善HCC免疫微环境中NK细胞的免疫活性,从而抑制HCC的发生发展。
- 袁琴姚霏刘敏张露蓉
- 关键词：肝细胞肝癌玉屏风散自然杀伤细胞信号转导和转录激活因子3
- 参芪五味子颗粒对肝癌荷瘤小鼠免疫抑制调节的影响被引量：1
- 2022年
- 目的探讨参芪五味子颗粒(SQW)对H22肝癌荷瘤小鼠免疫抑制调节的影响。方法运用昆明种小鼠腋下荷瘤模型,称量荷瘤小鼠体重、肿瘤、脾脏、胸腺,计算抑瘤率与脏器指数。采用流式细胞术分析荷瘤小鼠脾淋巴免疫细胞荧光表达情况。ELISA法检测血清中TNF-α水平。结果参芪五味子颗粒治疗后荷瘤小鼠肿瘤缩小,对体重、胸腺指数无影响;但脾脏指数增加,脾脏中的CD3~+CD8~+阳性T细胞、CD19~+阳性B细胞、CD3~+CD4~+NK1.1~+阳性NK细胞比例以及血清中TNF-α水平显著增加(P<0.05或0.01),CD4~+CD25~+Foxp3~+阳性Treg细胞比例呈微弱的减少趋势。结论参芪五味子颗粒可增加H22荷瘤小鼠免疫器官重量,激活机体的细胞免疫和非特异性免疫,增强T细胞介导的抗肝癌免疫反应。
- 贾丽君单煜戴伟汪丞礼姚霏
- 关键词：H22肝癌荷瘤小鼠免疫抑制NK细胞TREG细胞
- 玉屏风散直接抑制和免疫调节抗肝细胞癌作用的实验研究被引量：20
- 2014年
- 目的:阐明玉屏风散直接抑制和免疫调节抗肝细胞癌的作用和初步机制。方法:MTT法评价玉屏风散抑制肝癌细胞增殖和促进免疫细胞杀伤能力;以小鼠肝癌移植模型观察玉屏风散在体抗肝癌作用和对免疫调节的影响;采用流式细胞术观察玉屏风散对肝癌细胞凋亡和周期的影响。结果:玉屏风散呈现量效和时效依赖性抑制肝癌细胞的增殖;抑制肝癌荷瘤裸鼠和C57小鼠的肿瘤生长;促进肝癌细胞凋亡和阻滞细胞在G2期。可增加肝癌荷瘤C57小鼠脾脏的重量(P<0.05),但对胸腺重量和脾脏中CD4+T、CD8+T细胞比例及二者比值无影响;可显著提高血液和肿瘤组织中CD4+T、CD8+T细胞比例(P<0.01)和降低二者比值;可增强脾淋巴细胞杀伤肝癌细胞的能力。结论:玉屏风散抗肝癌作用是增强机体免疫和微弱的直接诱导肿瘤细胞凋亡的综合效应。
- 张露蓉姚霏江国荣梁国强
- 关键词：玉屏风散抗肝癌凋亡免疫调节
- 追毒方调控c-JUN抑制糖基化异常逆转三阴性乳腺癌耐药的机制被引量：1
- 2023年
- 目的从c-JUN调控的糖基化角度探究追毒方逆转三阴性乳腺癌(TNBC)耐药的机制。方法MTT检测细胞增殖,采用Western blot检测c-JUN、β3GnT8和ppGalNAc-T1/2、CD147、耐药蛋白BCRP和MDR1的表达。采用转染c-JUN质粒建立过表达c-JUN的MDA-MB-231/ADR细胞。体内实验采用耐药TNBC原位移植裸鼠模型。结果追毒方可显著抑制MDA-MB-231/ADR细胞的增殖(P<0.01),具有时效和量效关系;可明显抑制耐药TNBC原位移植裸鼠的肿瘤质量(P<0.01);降低耐药蛋白BCRP和MDR1表达(P<0.01),并同时明显降低c-JUN、β3GnT8和ppGalNAc-T1/2、CD147蛋白的表达(P<0.05)。过表达c-JUN后,与空白质粒对照组比较,β3GnT8、ppGalNAc T1/2、CD147、BCRP和MDR1的表达均显示增加(P<0.05,P<0.01)。而空白质粒对上述蛋白的表达无影响。追毒方可以显著降低过表达c-JUN后的上述蛋白的表达,但其表达水平还是显著高于空白质粒加药组(P<0.05,P<0.01)。结论追毒方通过作用于调控因子c-JUN,下调β3GnT8和ppGalNAc-T1/2的激活,从而抑制CD147的糖基化修饰,导致耐药蛋白BCRP和MDR1下调而逆转TNBC耐药。
- 李雨璇刘春亮袁琴陈婷蒋言涛姚霏孙华郝敏侠张露蓉刘敏
- 关键词：逆转耐药
- 玉屏风散对Hepa1-6肝癌荷瘤小鼠T淋巴细胞表型的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨玉屏风散对肝癌荷瘤小鼠T淋巴细胞表型的影响。方法以皮下接种肿瘤细胞建立荷瘤C57BL/6小鼠模型,随机分为模型对照组、玉屏风散组(20、25、30 g生药/kg),并选取不荷瘤小鼠为正常对照组,每组各5只。玉屏风散组按20 mL/kg灌以生药浓度为1.00、1.25、1.50 g/mL)的玉屏风散浓缩液,每日1次,正常对照组与模型对照组灌以等容积0.9%氯化钠注射液,连续给药2周。2周后处死小鼠制备脾细胞悬液,应用免疫荧光标记法,采用流式技术检测和分析小鼠脾脏中CD4+CD25+、CD4+CD69+、CD8+CD69+、CD8+CD44+、CD8+CD44+CD62L-及CD8+CD44+CD62L+T细胞比例的变化。结果与正常对照组比较,玉屏风散组脾CD4+CD25+T细胞比例均下降(P<0.05,P<0.01);CD4+CD69+、CD8+CD69+、CD8+CD44+、CD8+CD44+CD62L-和CD8+CD44+CD62L+T细胞比例均增加(P<0.05,P<0.01)。与模型对照组比较,玉屏风散组脾CD8+CD44+和CD8+CD44+CD62L-T细胞比例均无变化(P>0.05);玉屏风散20 g生药/kg组、25 g生药/kg组CD8+CD69+T细胞比例增加(P<0.05);玉屏风散30 g生药/kg组CD4+CD25+T细胞比例有降低趋势,差异无统计学意义(P>0.05);CD4+CD69+和CD8+CD69+T细胞比例均下降(P<0.05,P<0.01);CD8+CD44+CD62L+T细胞比例增加(P<0.01)。结论玉屏风散通过降低CD4+CD25+调节性T细胞比例,促进CD8+T细胞活化,增加记忆型CD8+T细胞比例,从而改善肝癌小鼠免疫紊乱状态,发挥抗肿瘤作用。
- 姚霏张露蓉江国荣
- 关键词：玉屏风散肝肿瘤小鼠T淋巴细胞表型
- 玉屏风散对肝癌微环境中血管生成的调节机制被引量：12
- 2020年
- 目的阐明玉屏风散通过抑制胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)和信号转导因子(STAT3)的活化,调控肝癌微环境的免疫状态抑制微血管的形成从而发挥抗肝癌效应的机制。方法采用Hepa1-6原位肝癌小鼠模型,灌胃给予玉屏风散药液(20、30、40 g/kg),给药2周后处死小鼠。剥离瘤体称质量并计算抑瘤率;ELISA法检测肿瘤组织和癌旁组织上清液中VEGF、TSLP、TSLPR的表达水平;免疫组化法检测微血管密度MVD的表达情况;Western blot法检测STAT3和p-STAT3的蛋白表达情况。结果与模型组比较,不同浓度的玉屏风散(20、30、40 g/kg)可明显抑制肿瘤的生长(P<0.05~0.01),且呈剂量依赖,抑瘤率分别为26.37%、35.89%和56.01%;玉屏风散组肿瘤组织和癌旁组织的MVD和VEGF水平明显降低(P<0.05~0.01);不同浓度的玉屏风散可降低TSLP/TSLPR和p-STAT3/STAT3的表达,并且呈剂量依赖性(P<0.05~0.01)。结论玉屏风散可通过抑制TSLP表达,进而减弱TSLP-STAT3信号通路的激活,抑制肝癌微环境中血管的形成,发挥抗肝癌作用,该研究为延长肝癌患者生存和开发理想治疗药物靶点的新策略提供了实验依据。
- 袁琴姚霏张露蓉刘敏
- 关键词：玉屏风散TSLPSTAT3肝肿瘤
- 追毒方逆转三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞耐药的作用机制被引量：3
- 2019年
- 目的基于糖基转移酶β3GnT8探讨追毒方逆转三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞耐药的作用机制。方法通过MTT法观察追毒方对MDA-MB-231耐药细胞增殖的抑制作用,通过转染β3GnT8得到高表达β3GnT8的MDA-MB-231/TAX细胞株,采用Western blot观察糖基转移酶β3GnT8和耐药蛋白BCRP、P-gp的表达,通过凝集素流式细胞术观察转染β3GnT8MDA-MB-231/TAX细胞膜表面β3GnT8的荧光强度。结果追毒方有效成分能明显抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231耐药细胞的增殖,作用72h抑制率达到50.16%,能有效下调β3GnT8和耐药蛋白BCRP、P-gp的表达,并且β3GnT8的表达与BCRP、P-gp呈正相关。结论追毒方可通过下调糖基转移酶β3GnT8,从而降低耐药蛋白BCRP、P-gp的表达,逆转三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞耐药性。
- 刘敏刘春亮梁国强姚霏张晓迪陈婷袁雅琴吴士良
- 关键词：逆转耐药
- 玉屏风散通过胸腺基质淋巴细胞生成素改变Th1/Th2的平衡发挥抗肝癌效应的研究被引量：8
- 2016年
- 目的:阐明玉屏风散通过胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)改变Th1/Th2的平衡发挥抗肝癌效应的作用机制。方法:在C57BL/6小鼠肝脏接种2×106个Hepa1-6肝癌细胞建立肝癌原位小鼠模型,造模成功的小鼠被随机分为对照组、顺铂组及玉屏风散组(20、30、40 g生药/kg),每组8只,连续给药2周后处死小鼠。剥离瘤体称重并计算抑瘤率;将肝癌小鼠的肿瘤组织和癌旁组织进行匀浆,用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测组织上清液中TSLP的表达水平,流式微珠阵列法(flow cytometric bead array,CBA)法检测干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)的表达情况。结果:玉屏风散20、30、40 g生药/kg对肝癌小鼠的抑瘤率分别为25.48%、34.92%、46.76%;与对照组相比,玉屏风散组(30、40 g生药/kg)的肿瘤组织中和(40 g生药/kg)的癌旁组织中TSLP的表达显著降低(P<0.05);玉屏风散组(20、30、40 g生药/kg)的肿瘤组织中和(30、40 g生药/kg)的癌旁组织中IFN-γ/IL-4的比值显著增加(P<0.05)。结论:玉屏风散通过降低TSLP的表达,增加IFN-γ/IL-4的比值,从而改变Th1/Th2的平衡发挥抗肝癌效应。
- 袁琴姚霏张露蓉
- 关键词：玉屏风散胸腺基质淋巴细胞生成素干扰素-Γ白细胞介素-4
- 薏苡附子败酱散抗肝癌作用的实验研究被引量：3
- 2019年
- 目的探讨薏苡附子败酱散对肝癌的抑制作用及可能的凋亡机制。方法应用C57BL/6荷瘤小鼠模型考察薏苡附子败酱散动物体内对肝癌生长的抑制作用,24只荷瘤小鼠,随机分为模型对照组、顺铂阳性药物组(5 mg/kg)、薏苡附子败酱散低、高剂量组(7.735、15.47 g/kg),灌胃14 d。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法研究薏苡附子败酱散不同生药浓度(10、20、30、40、50 mg/mL)及不同处理时间(24、48、72 h)对Hepa1-6肝癌细胞增殖的影响。流式细胞术检测其对肝癌细胞凋亡的作用。Western blot检测细胞中Caspase-3、cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白水平。结果体内实验结果显示,与模型对照组比较,阳性药组、薏苡附子败酱散不同剂量组均可抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,差异具有统计学意义(P<0.05)。体外实验结果显示,与空白对照组相比,阳性药组、薏苡附子败酱散组均能够明显抑制Hepa1-6细胞增殖,且呈时间-剂量依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术结果表明,薏苡附子败酱散可以诱导肝癌细胞发生凋亡,可使促凋亡蛋白Bax、Caspase-3、cleaved Caspase-3表达升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,Bax/Bcl-2比值增高,与空白对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论薏苡附子败酱散具有抗肝癌效应,可诱导肝癌细胞凋亡,作用机制与调控Caspase-3、cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达有关。
- 孙燕张露蓉姚霏姚霏
- 关键词：薏苡附子败酱散抗肝癌细胞增殖细胞凋亡
