杨玲
- 作品数:35 被引量:3H指数:1
- 供职机构:广东溢多利生物科技股份有限公司更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 提高比活的α-淀粉酶突变体BasAmy-3及其编码基因和应用
- 本发明涉及基因工程领域,具体涉及提高比活的α‑淀粉酶BasAmy突变体及其编码基因和应用。所述突变位点为:氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的α‑淀粉酶BasAmy发生以下突变:L29A,A112R,L269F,K2...
- 李阳源王建荣黄江聂金梅陈丽芝何小梅杨玲黄佳乐
- 提高比活的α-淀粉酶突变体BasAmy-4及其编码基因和应用
- 本发明涉及基因工程领域,具体涉及提高比活的α‑淀粉酶BasAmy突变体及其编码基因和应用。所述突变位点为:氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的α‑淀粉酶BasAmy发生以下突变:S267Q,L269F,S270P,K...
- 李阳源王建荣黄江聂金梅陈丽芝何小梅杨玲黄佳乐
- 提高比活的α-淀粉酶突变体BasAmy-2及其编码基因和应用
- 本发明涉及基因工程领域,具体涉及提高比活的α‑淀粉酶BasAmy突变体及其编码基因和应用。所述突变位点为:氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的α‑淀粉酶BasAmy发生以下突变:L29A,L269F,S270P,A2...
- 李阳源王建荣黄江聂金梅陈丽芝何小梅杨玲黄佳乐
- 密码子优化及透明颤菌血红蛋白共表达提高耐热脂肪酶在毕赤酵母的表达被引量:1
- 2016年
- 根据毕赤酵母密码子的偏好性,通过在线软件对Thermomyces lanuginosus脂肪酶基因(tll)和透明颤菌血红蛋白基因(vhb)进行密码子优化。优化后的脂肪酶基因(tll-opt)和透明颤菌血红蛋白基因(vhb-opt)中碱基GC含量分别由原来的46%提高到49%和42%提高到51%,碱基A、T、C、G均匀分布,减少了AT和GC富集区,利于tll-opt和vhb-opt基因在毕赤酵母X33中的表达。将tll和tll-opt连接到表达载体p PICZαA并转入毕赤酵母X33中。摇瓶培养条件下,含有tll和tll-opt重组工程菌的最大酶活力分别为7 U/m L和16 U/m L。50 L发酵罐培养条件下,含有tll和tll-opt重组工程菌的最大酶活力分别为201 U/m L和430 U/m L。为了进一步提高含tll-opt重组工程菌的表达酶活性,将vhb-opt转入该重组工程菌得到工程菌VHb^+(含有tll-opt和vhb-opt)。重组工程菌VHb+在摇瓶培养条件下最大酶活力为23 U/m L,分别是优化后基因和原始基因最大表达酶活力的1.39倍和3.28倍。重组工程菌VHb+在50 L发酵罐瓶培养条件下最大酶活力为610 U/m L,分别是优化后基因和原始基因最大表达酶活力的1.41倍和3.03倍。
- 王建荣刘丹妮夏雨杨玲刘金山唐业陈丽芝黄佳乐李阳源
- 关键词:密码子优化脂肪酶透明颤菌血红蛋白高密度发酵
- 优化密码子及诱导温度提高雪白根霉脂肪酶在毕赤酵母中的表达被引量:3
- 2017年
- 根据毕赤酵母密码子的偏好性,通过在线软件对雪白根霉脂肪酶基因(rnl)进行密码子优化。优化后的脂肪酶基因(rnl-opt)GC含量由原来的46%提高到49%,碱基A,T,C,G均匀分布,减少了AT和GC富集区,适应指数由0.82提升到0.85。将rnl-opt连接到表达载体p PICZαA并转入毕赤酵母X33中。将含有rnl和rnlopt的重组工程菌在摇瓶和50 L发酵罐中进行诱导表达。摇瓶培养条件下,含有rnl和rnl-opt重组工程菌的最大酶活分别为458、956 U/m L。50 L发酵罐培养条件下,含有rnl和rnl-opt重组工程菌的最大酶活和总蛋白浓度分别为14 856、30 500 U/m L和3.61、7.8 g/L。为了进一步提高含rnl-opt重组工程菌的表达酶活,对其在50L发酵罐培养的诱导温度进行优化,当诱导温度为22℃时,含rnl-opt重组工程菌的酶活和细胞湿重均达到最大值分别为39 520 U/m L和461 g/L。相对于30℃,酶活和细胞湿重分别提高了30%和16%。
- 王建荣刘丹妮夏雨杨玲刘金山唐业陈丽芝黄佳乐李阳源
- 关键词:密码子优化脂肪酶
- 一种热稳定性提高的脂肪酶TTL突变体TTL-Ser61Asn及其基因和应用
- 本发明涉及基因工程领域,具体涉及一种热稳定性提高的脂肪酶TTL突变体TTL‑Ser61Asn及其基因和应用。所述脂肪酶TTL突变体TTL‑Ser61Asn的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示,突变体TTL‑Ser61...
- 周银华夏雨刘丹妮杨玲李阳源
- 文献传递
- 一种热稳定性提高的脂肪酶TTL突变体及其编码基因和应用
- 本发明涉及基因工程领域,具体涉及一种热稳定性提高的脂肪酶TTL突变体及其编码基因和应用。所述脂肪酶TTL突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明利用分子生物学技术定点突变脂肪酶TTL,获得了热稳定性提高的脂...
- 李阳源王建荣杨玲黄江王勇徐树德周志刚
- 文献传递
- 一种重组耐热木聚糖酶的制备方法
- 本发明属于分子生物学及基因工程领域,具体涉及一种重组耐热木聚糖酶的制备方法。本发明通过密码子优化技术优化了来源于嗜热细菌Thermotoga petrophila RKU的β‑1,4‑内切木聚糖酶基因tx,将优化后的tx...
- 李阳源王建荣杨玲瞿曼周银华
- 文献传递
- 提高比活的α‑淀粉酶BasAmy突变体及其编码基因和应用
- 本发明涉及基因工程领域,具体涉及提高比活的α‑淀粉酶BasAmy突变体及其编码基因和应用。所述突变位点为:氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的α‑淀粉酶BasAmy的29位由L突变为A;267位由S突变为Q;270位...
- 李阳源王建荣黄江聂金梅陈丽芝何小梅杨玲黄佳乐
- 脂肪酶变体Ala36Ser/Asp49His/Ala52Val/Asn55Asp
- 本发明涉及基因工程领域,具体涉及一种热稳定性提高的脂肪酶TTL突变体TTL‑Ala36Ser/Asp49His/Ala52Val/Asn55Asp及其基因和应用。所述脂肪酶TTL突变体TTL‑Ala36Ser/Asp49...
- 周银华李阳源刘丹妮王建荣夏雨杨玲
- 文献传递